CHROMATOGRAPHIE La chromatographie est une technique qui permet de séparer et d’identifier les différents constituants d’un mélange. Le mot chromatographie.

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1 CHROMATOGRAPHIE La chromatographie est une technique qui permet de séparer et d’identifier les différents constituants d’un mélange. Le mot chromatographie vient du grec khrôma : couleur. A l’origine, c’était une technique de séparation de substances colorées, mais elle est aujourd’hui utilisée pour tous types de mélanges.

2 séparation des constituants d'un mélange
 Verser au fond d'un bécher un peu d'eau salée.  Sur un morceau de papier filtre rectangulaire tracer au crayon à papier une légère ligne. Le niveau de l'eau doit être en dessous de cette ligne

3   Porter des lunettes  Déposer sur cette ligne trois petites taches de colorants alimentaires (jaune, bleu, vert)  Agrafer le papier filtre en cylindre et le disposer dans le bécher Pour déposer les taches, il est conseillé de s'entraîner auparavant sur un morceau de papier filtre, car elles ne doivent pas dépasser 2 à 3 mm de diamètre exp2

4 Élution des taches  L'eau (= éluant) monte par capillarité le long du papier filtre (= phase fixe) V J B V J B  Lors de son ascension, l'eau entraîne les taches de colorant à des vitesses différentes

5 Lecture verticale  Le colorant vert s’est décomposé après élution, en 2 taches : c’est un mélange constitué de 2 espèces  Les colorants jaune et bleu ne présentent qu’une seule tache: ce sont des espèces pures V J B

6 Lecture horizontale  Les taches au même niveau correspondent au même constituant  Le colorant vert est un mélange de colorant bleu et de colorant jaune V J B

7 identification d'une espèce
Comment peut-on montrer que l’on a bien obtenu du limonène lors de l'hydrodistillation des écorces d'oranges ???

8  Sur cette ligne, tracer 3 petites croix régulièrement espacées.
 Sous la hotte, verser l’éluant (cyclohexane) dans la cuve à chromatographie et la refermer à l ’aide de son couvercle  Sur une plaque CCM, tracer un trait au crayon à papier à environ 1 cm du bord  Sur cette ligne, tracer 3 petites croix régulièrement espacées. 1 cm

9   Porter des lunettes 1 : limonène pur 2 : arôme Vahiné
 Déposer à l'aide d'une pipette pasteur, sur chacune de ces croix, trois taches 1 : limonène pur 2 : arôme Vahiné 3: limonène TP

10  Après application d'une tache, sécher au sèche cheveux

11  Disposer la plaque dans le bécher sous la hotte
2 cm  Quand le front de l'éluant est à environ 2 cm du haut →retirer la plaque du bécher →faire un trait au crayon pour indiquer le front de l’éluant →sécher la plaque au sèche cheveux sous la hotte. exp1

12 Les constituants des produits analysés donnent des taches invisibles
Pour obtenir le chromatogramme et faire apparaître les différentes taches, il faut révéler les taches :

13  Corner la plaque  La prendre avec une pince  La plonger dans une solution violette de permanganate de potassium  La sécher

14 le front du solvant la ligne de dépôt

15 Que peut-on conclure à partir du chromatogramme obtenu?
- Les 3 produits déposés sur la ligne de dépôts sont des produits purs (une seule tache pour chacun) - Les 3 taches étant au même niveau, les 3 produits déposés sont identiques : ils contiennent tous du limonène