ANATOMIE PATHOLOGIQUE

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1 ANATOMIE PATHOLOGIQUE
Dr.N.Yelles 3ème année médecine Tlemcen

2 ANATOMIE ET CYTOLOGIE PATHOLOGIQUES
Introduction Technique « standard » (différentes étapes) Examen extemporané Technique immunohistochimique

3 PATHOLOGISTE Rôle diagnostique et pronostique Démarche étiologique
Pathologie inflammatoire Pathologie vasculaire Maladies métaboliques Pathologie tumorale: Bénin/Malin Démarche étiologique

4 Prélèvements Biopsie Pièces d’exérèse chirurgicale
Examen extemporané Examen histologique standard Prélèvement cytologique Nécropsie

5 EXAMEN HISTO-PATHOLOGIQUE « STANDARD »
Différentes étapes Fixation/Congélation en banque Enregistrement du prélèvement Inclusion en paraffine Coupe du bloc inclus en paraffine Coloration (Hématoxyline-eosine-safran, HES) Examen microscopique Rédaction du compte-rendu Archivage des lames, des blocs d’inclusion et du double du compte-rendu

6 CONGÉLATION Pratiquée de plus en plus souvent
Fragment tissulaire choisi par le pathologiste sur une pièce opératoire Congélation dès que possible (minuté) Vise à conserver intacts les acides nucléiques, les protéines, les germes,… Stockage en azote liquide (-196°C) ou en congélateur (-80°C) Utile pour les soins et la recherche

7 FIXATION La pièce opératoire ou la biopsie fraîches seront adressées immédiatement à la structure d’anatomie pathologique où elle sera prise en charge. Si la pièce doit être fixée sur place, l’ouvrir pour bien la fixer et la plonger dans 15 fois son volume de fixateur (protocole à établir avec le pathologiste). Les fixateurs sont des produits très toxiques. Ne pas mettre les pièces dans du sérum physiologique ou de l’eau, de l’alcool...

8 MACROSCOPIE Après fixation de 12 à 24H (parfois délai supplémentaire de décalcification), des prélèvements systématiques et dans les zones pathologiques sont réalisés sur la pièce opératoire (2,5 cm de côté, 3 mm d’épaisseur): pour les tumeurs malignes: Limites de résection Tumeur ou autre lésion Ganglions du curage Parenchyme à distance

9 Curage Mammectomie

10 Couper la pièce en tranches fines
Cancer Encrer les limites d’exérèse Cancer

11 Dissection du curage

12 Tumeur Mamelon Prélèvements systématiques au niveau des différents quadrants Zone de mastopathie Curage

13 TECHNIQUE STANDARD Inclusion en paraffine
Déshydratation dans bains d’alcool Eclaircissement en bains de toluène Imprégnation en paraffine à 56°C 1 2 3

14 TECHNIQUE STANDARD Inclusion en paraffine Bloc refroidi, confère
rigidité au prélèvement permettant de le couper au microtome

15 TECHNIQUE STANDARD Coupe de 4m étalée sur lame
Passage dans bains de toluène, d’alcool et d’eau (déparaffinage, réhydratation) Coloration par l’HES

16 TECHNIQUE STANDARD Examen microscopique Elaboration du compte-rendu
Frappe du compte-rendu Envoi du compte-rendu Archivage

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19 Goitre nodulaire

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21 techniques spéciales 1-histochimie:
-PAS et le bleu alcian(mucopolysaccharides -sels d’argent(fibres de réticuline) -trichrome de Masson(fibres de collagene) -orceine(fibres élastiques) -Fontana(mélanine) -Perls(dépôts de fer)

22 AMYLOSE RENALE ET ROUGE CONGO

23 COMPTE-RENDU (PATHOLOGIE TUMORALE)
Identification du patient, N° propre au Service Description macroscopique (Description des prélèvements) Description histologique Conclusion Type histologique de la tumeur Taille Limites de résection chirurgicales Métastases ganglionnaires Grading histopronostique (pTNM,…)

24 EXAMEN EXTEMPORANE Diagnostic histopathologique rapide
En cours d’intervention chirurgicale Dans le but de modifier le geste chirurgical Technique « grossière » Réponse « grossière » Bénin/Malin (Douteux…) Taille de la tumeur (macroscopique) Limites

25 EXAMEN EXTEMPORANE 1. Prélèvement sur la pièce fraîche
2. Collée sur un plot 3. Congélation rapide à -30°C 1 3 2

26 EXAMEN EXTEMPORANE 4. Coupe au cryostat (20 m)
5. Etalement sur la lame 6. Coloration express au bleu de toluidine 7. Lecture au microscope 8. Communication du résultat (en 5’) 4 6

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28 CYTOLOGIE Techniquement plus simple: Inconvénients : Applications :
Fixation instantanée Pas d’inclusion en paraffine, mais dépôt sur lame Coloration Examen Inconvénients : Pas d’architecture tissulaire Peu de techniques complémentaires possibles Applications : Dépistage (frottis du col utérin) Trépied diagnostique : clinique, imagerie, cytologie (sein) Ponction diagnostique à l’aiguille fine (FNAB) Liquides organiques : extension de cancers

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31 IMMUNOHISTOCHIMIE Mises en évidence d’antigènes sur les préparations à l’aide d’anticorps spécifiques, révélés par une technique d’immunoperoxydase indirecte.

32 Anticorps anti-cytokératine

33 IMMUNOHISTOCHIMIE Intérêt Tumeur indifférenciée
Carcinome (marqueurs épithéliaux: Cytokératine, EMA) Mélanome (marqueurs mélanocytaires: PS100, HMB-45, Melan-A) Sarcome (marqueurs musculaires: actine, desmine, marqueurs vasculaires: CD31, CD34, marqueurs nerveux: PS100) Lymphome (marqueurs lymphoïdes: CD3 (marqueur T), CD20 (marqueur B).

34 Tumeur thyroïdienne indifférenciée
CD45 - (marqueur lymphoïde) PS100 - (marqueur mélanocytaire) Cytokératine + (marqueur épithélial)

35 IMMUNOHISTOCHIMIE Intérêt Différenciation particulière
Carcinome: différenciation endocrine (Ac antichromogranine, Ac anti-synaptophysine) Lymphome: Typage (lymphome B, T, anaplasique, maladie de Hodgkin) Recherche de micrométastases d’un carcinome

36 CD20 - CD3 - CD30 + CD15 + MALADIE DE HOGKIN

37 Ganglion axillaire (curage d’un carcinome lobulaire du sein)
Métastase ganglionnaire CK

38 IMMUNOHISTOCHIMIE Intérêt Signes d’infection virale
CMV, EBV Recherche de facteurs pronostiques Récepteurs hormonaux (RO, RP) Marqueurs thérapeutiques (CD20 pour les lymphomes B, C-erbB-2 pour les cancers du sein, c-kit pour les tumeurs stromales)

39 Carcinome lobulaire du sein
RO+ C-erbB-2 - RP+

40 C-erbB-2

41 MICROSCOPE ELECTRONIQUE
Lésions ultrastructurales Technologie lourde x 1200 à Indications restreintes Identification d ’agents pathogènes maladie avec aspect en MO normal syndrome néphrotique à glomérules optiquement normal certaines myopathies.

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43 AUTRES TECHNIQUES Hybridation in situ
Applique sur lame de sondes d’ADN ou d’ARN monocaténaire marquées, complémentaires de séquences d’ADN ou d’ARN que l’on recherche sur la coupe Révélation par autoradiographie Révélation histoenzymologique (sonde EBER pour le virus EBV)

44 Dépôts d ’immunoglobuline glomérulaires
Immunofluorescence. Dépôts d ’immunoglobuline glomérulaires

45 conclusion L ’étude anatomopathologique aboutit à la rédaction du compte-rendu (CR) Objectifs : comprendre les termes du CR gérer le CR et l ’intégrer dans le dossier clinique Activité anatomoclinique. Transmission des données cliniques indispensable à l ’interprétation .

46 Au total Diagnostic Classification histopronostique
Bilan pré-thérapeutique