1 Nouveaux outils virologiques et participation aux activités de laction coordonnées 11/12.

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1 1 Nouveaux outils virologiques et participation aux activités de laction coordonnées 11/12

2 2 Introduction Dans les pays du sud à ressources limitées –Accès au traitement antirétroviral progression différentes initiatives internationales –Tests de laboratoires essentiels au suivi biologique des patients inaccessible coût problèmes logistiques –Nouveaux outils

3 3 Introduction Nouveaux outils –Techniques alternatives de suivi Numération des LTCD4+ Charge virale Résistance –Support alternatifs de prélèvement Papier buvard –Diagnostic précoce –Charge virale –Résistance génotypique

4 4 Techniques alternatives de suivi PCR en temps réel –Charge virale : Technologie LTR/ANRS Participation au contrôle de qualité –Co et Super infection : pour le MHA Détermination des co et super-infections –Hybridation sonde spécifiques

5 5 Techniques alternatives de suivi Résistance « Technique maison » –Technologie ANRS Participation au contrôle de qualité Séquences de deux gènes (RT et Protéase) –IRD Participation au contrôle de qualité Séquences en 1 seul fragment (RT et Protéase)

6 6 Support alternatifs de prélèvement Papier buvard –Diagnostic précoce –Charge virale –Résistance génotypique

7 7 Papier buvard Le papier buvard ou papier filtre – Décentralisation facilitée –Acheminement, malgré la chaleur et sans congélation, de l'échantillon sanguin à diagnostiquer. –Terrain vers le laboratoire de référence

8 8 Utilisation du papier buvard Formation en zone décentralisée –Prélèvement –Séchage –Conservation des spots –Acheminement vers labo de référence –Elaboration dun guide national

9 9 Support alternatifs de prélèvement Papier buvard et charge virale –Evaluation de son utilisation sur le terrain après optimisation plasma et DBS à J15

10 10 Etude de résistance sur papier buvard Technique de Plantier et al Nombre déchantillons de plasma: N = 20 -5 échantillons: 5000 copies/ml <CV<10000 copies/ml -10 échantillons: 10000 copies/ml <CV<100000 copies/ml -5 échantillons: CV > 100000 copies/ml Comparaison de deux méthodes dextraction dARN: -Nuclisens EasyQ -Qiagen Méthode damplification: Téchnique ANRS: amplification des gènes de la protéase et de la transcriptase inverse séparément.

11 11 Résultats Amplification du gène de la protéase Méthode dextraction Charge virale (en copies/ml) Pourcentage déchantillons amplifiés Nuclisens 5000 <CV< 10000 60 % 10000 <CV< 100000 CV > 100000 Qiagen 5000 <CV< 10000 55 % 10000 <CV< 100000 CV > 100000

12 12 Support alternatifs de prélèvement Utilisation dans la décentralisation –Diagnostic précoce n= 8 –Charge virale n= 8 –Génotypage n = 8 Régions formées

13 13 Contraintes Techniques alternatives –Approvisionnement en Réactifs CV/PCRTR_LTR Résistance « Technique maison » –(plusieurs produits séparés) Supports alternatifs –Couverture nationale en formation –Circuit dacheminement formel

14 14 Perspectives Effectivité de la décentralisation Disposer dun bon circuit formel Technique ANRS au moins dans une zone décentralisée Demander à la firme Bio centric de disposer dun distributeur au niveau local

15 15 Equipes participantes Sénégal –Hôpital le Dantec –DLSI –Acteurs régionaux de la prise en charge FranceFrance – Laboratoire Retrovirus, UMR 145 –Laboratoire de Virologie Necker

16 16 Merci de votre attention