Métabolisme des folates et des cobalamines

Présentation au sujet: "Métabolisme des folates et des cobalamines"— Transcription de la présentation:

1 Métabolisme des folates et des cobalamines
Cours DCEM Métabolisme des folates et des cobalamines Pascale CORNILLET-LEFEBVRE Laboratoire d’Hématologie CHU de REIMS

2 Vitamine B12 (cobalamines) Vitamine B9 (folates)
Structure et formes chimiques Apports et besoins Réserves et excrétion Absorption et transport Fonctions métaboliques Mégaloblastose Causes de déficits Explorations Ces deux vitamines occupent une place importante en hématologie car elles interviennent dans le renouvellement cellulaire et à ce titre dans l’hématopoïèse. Une carence en l’une ou l’autre est à l’origine d’un ralentissement de l’hématopoïèse. C’est sur la lignée des rouges que la carence se manifeste en premier à l’origine d’une anémie macrocytaire, mégaloblastique.

3 Structure et formes chimiques
radicaux Atome Cobalt Vitamine B12 et ses dérivés Noyau corrine Formes utilisées en thérapeutiques = formes stables oxydées Co état trivalent Diméthyl benz imidazole Les Cobalamines, anciennement dénommée Vitamine B12, sont un groupe de composés ayant la même structure de base : un noyaux Corinne (avec au centre un atome de Cobalt) lié à une base spécifique : la diméthylbenzimidazole lié à différents radicaux.

4 Structure et formes chimiques
Vitamine B12 et ses dérivés Formes actives (Coenzymes) formes instables réduites Co état monovalent

5 Forme stable utilisée en thérapeutique (structure commune)
Structure et formes chimiques des Folates Forme stable utilisée en thérapeutique (structure commune) Les folates sont eux-aussi un groupe de composés ayant une structure commune = acide folique ou acide ptéroyl glutamique. L’acide folique n’est ni la forme naturelle, ni la forme physiologiquement active.

6 Structure et formes chimiques des Folates
Fixation en N5 d’un groupement carboné : (Méthyl, formyl) Entre N5 et N10 = méthylene Polyglutamates = formes alimentaires et formes tissulaires Formes actives (coenzymes) réduites (H en : DHF : THF

7 Apports-Besoins quotidiens
Vitamine B12 Folates Alimentaire +++ Bactéries intestinales Protéine animale (foie +++) Levure de bière Fruits secs, légumes verts (crus) Apport = µg/j Besoins = µg/j Exclusivement alimentaire Protéine animale exclusivement Foie,viande, crustacées +++ Œuf, lait Apport = 50 µg/j Besoins = 2-3 µg/j

8 Réserves/ excrétion Vitamine B12 Folates En cas de carence :
3-4 mg (50% dans le foie) En cas de carence : épuisée en 3-4 ans Excrétion : urine +++ 10-15 mg (50% dans le foie) En cas de carence : épuisée en 3-4 mois Excrétion : urine +++

9 Absorption et Transport :
Jéjunum proximal L’absorption des folates est un phénomène actif, saturable et PH dépendant. L’absorption des folates se fait tout au long de l’intestin grêle. Dans l’intestin, ils sont clivés en monoglutamates (conjugase intestinale) puis transformés en Méthyl THF (forme circulante principale) N5 Méthyl-THF 50% Transformation des mono en poly glutamate et déméthylation

10 Absorption et Transport :
Suc gastrique Facteur intrinsèque = GlycoP secrétées par les cellules pariétales du fundus de l’estomac Transcobalamine I et III protéases duodenum Intestin grêle Iléon distal : absorption par endocytose par Récepteur VitB12-FI = cubiline Dans l’estomac, les cobalamines, libérées sous l’effet de l’acidité et de la pepsine, vont se lier à deux glycoprotéines: le facteur intrinsèque et les Haptocorrines= cobalophilines Dans le duodénum libération par les acides pancréatiques Se lie au FI non complexés aux cobalamines et chemine tout le long de l’intestin grêle Dans les cellules utilisatrices, Cobalamines et Folates vont jouer leur rôle de Coenzymes Récepteurs B12-TCII sur de nbr cellules dont les ERythro

11 Fonctions métaboliques : agents de transfert de radicaux monocarbonés/ CoE
Vitamine B12 Folates Transformation du propionylCoA (issu du catabolisme de la Valine) en succinylCoA (-> cycle de krebs) via l’acide méthylmalonique Synthèse de la Méthionine ; transformation de l’homocystéine en méthionine Transformation du méthyl THF en THF (forme active) Synthèse des Acides Nucléiques : Synthèse de base pyrimidique (Thymidylate) Synthèse de base purique (Adenine, Guanine) Synthèse des Acides Aminés : Synthèse de la Méthionine Tranformation de l’Histidine en Acide Glutamique via FIGLU Interconversion Glycine-Serine

12 Serin -> glycine Les folates sont directement impliqués dans la biosynthèse du thymidilate (dTMP), à partir du desoxyuridylate grâce au méthylene THF et de l’enzyme correspondant : la thymidilate synthetase. Ce dMTP est phosphorylé en DTDP puis DTTP pour être incorporé dans l’ADN en même temps que les 3 autres triphosphates sous l’effet de l’ADN polymerase. Les cobalamines captent le méthylTHF pour la synthèse de la méthionine permettant ainsi la régénération du THF et du méthylene THF. De ce fait, cette coopération entre les deux vitamines explique que leur carence s’accompagne des mêmes effets.

13 Effet de la carence en Vitamine B12 et/ou Folates : la mégaloblastose
Toute mitose est précédée d’une synthèse de DNA (phase S 2n>4n) 1- ralentissement de la réplication de l’ADN par carence en dTTP (dans toutes les lignées médullaires et toutes les cellules à renouvellement rapide mais la conséquence majeure sera au niveau des érythroblastes) 2- ralentissement de la cinétique de division cellulaire => Gigantisme cellulaire : Mégaloblastose (proerythroblaste) (moelle) Macrocytose (GR) (sang) (VGM>100fl) Excès de formes jeunes basophiles (moelle bleue) Anomalies nucléaires (PNN) : chromatine perlée/ noyau hypersegmenté 3- hématopoïèse (erytropoïèse) inefficace par avortement intramédullaire CONTRASTE : moelle riche et cytopénie(s) périphérique(s) (anémie+++)

14 Hémogramme Frottis sanguin Anémie macrocytaire arégénérative
+/- leuconeutropénie +/- thrombopénie Frottis sanguin Macrocytose Anisocytose Poïkilocytose Hématies polychromatophiles Polynucléaire à noyau hypersegmenté >6 lobes

15 Myélogramme (coloration MGG) Erythroblaste de grande taille hyperbasophile (riche en Hb) à chromatine perlée Hyperplasie erythroblastique dysmorphique Asynchronisme de maturation nucléocytoplasmique => « moelle bleue » Macro Métamyélocytes

16 Causes de macrocytose Hyper-réticulocytose (hémolyse ou hémorragie compensée) du fait du volume supérieur des réticulocytes Hépatopathies par augmentation du matériel lipidique membranaire Alcoolisme chronique Anomalie de la synthèse d’ADN Carence en vitamine B12 et folates Myélodydplasies avec atteintes de la cellules souche Fausse (agglutinines froides) etc……………

17 + +++ Origine des carences Vit B12 Folates Insuffisance d’apport
Besoins accrus Malabsorption gastrique (ex : Biermer) Malabsorption intestinale Troubles de l’utilisation Troubles congénitaux du métabolisme Troubles congénitaux des protéines de transport Médicaments Excrétion accrue

18

19 Exploration 1- mise en évidence de la conséquence sur l’hématopoïèse
hémogramme -> VGM > 100 fl myélogramme (après dosage et avant transfusion) 2- mise en évidence directe de la carence : dosage sanguin de la vit B12 dosage intraerythrocytaire des folates 3- mise en évidence indirecte par études des conséquences métaboliques ex : test de dU suppression 5- tests d’absorption : ex test de Schilling Le test de Schilling évalue l’absorption de vit B12. Le sujet absorbe une dose de vitB12 radiomarquée. Dans le même temps une dose de vitB12 froide est injectée par voie IM. La vit B12 froide est destinée à saturer les protéines de transport plasmatiques. De ce fait l’intégralité de la vit B12 absorbée par l’intestin est éliminée par voie rénale. On dose la vit B12 radioactive dans les urines, une proportion d’au moins 5% témoigne d’une absorption normale. Si on refait l’expérience en administrant persos du FI et que l’absorption est corrigée, on peut conclure à une malabsorption associée à un défaut de FI.

20 2- incorporation de thymidine tritiée
Test de dU suppression 2- incorporation de thymidine tritiée 1-Préincubation avec déoxy-uridine froide Voie de secours Voie endogène 3-Mesure de la radio * de cellules médullaires ce test évalue la suppression d’incorporation de la thymidine tritiée dans l’ADN par de la deoxyuridine froide Si carence => incorporation de H3 dans les cellules