LA PLAQUE D’ADHESION Paxilline MATRICE EXTRA- CELLULAIRE MEMBRANE

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2 LA PLAQUE D’ADHESION Paxilline MATRICE EXTRA- CELLULAIRE MEMBRANE
CYTOPLASME AU NIVEAU D’UNE PLAQUE D’ADHESION Paxilline D’après Alan Horwitz, « L’adhérence des cellules » Dossier Hors série Pour la Science, 1998

3 Le cycle des plaques adhésion dans la cellule en migration
Figure 2. Illustration of Integrin Adhesion Receptor Dynamics in Cell Migration Newly synthesized or recycled integrins may be inserted into the plasma membrane behind the leading lamella, then transported to the edge by diffusion and directed transport (possibly mediated by myosin I actions). Once there, adhesion bonds are formed with substratum ligands, followed by nascent aggregates—adhesion complexes—which grow as the cell moves forward. At the rear of the cell, these adhesions are released as the trailing edge detaches from the substratum. Their integrin contents may be extracted from the membrane and left behind on the substratum, or dispersed by diffusion on the membrane surface, or internalized. The aggregates may also move along the edge of the migrating cell for a while before being eventually disrupted. D’après D.A. Lauffenberger and Alan Horwitz, Cell, 1996.

4 a5b1 avb3 Dynamique et ségrégation des adhésions cellule–matrice
chez des fibroblastes en culture a5b1 avb3 D’aprés Eli Zamir and coll., Nature and Cell Biology, Vol 2, 2000:

5 La mobilité des cellules dépend des interactions cellules/matrice
D’après Elisabeth A. Cox, David Bennin, Ashley T. Doan, Timothy O’Toole and Anna Huttenlocher, Molecular Biology of the Cell, Vol. 14, 658–669, February 2003.

6 DYNAMIQUE DE L’ACTINE

7 D’après D.A. Lauffenberger and Alan Horwitz, Cell, 1996.

8 La polymerisation de l’actine fait naitre la lamellipode
D’après Thomas D. Pollard1, and Gary G. Borisy, Cell, Vol. 112, 453–465, February 21, 2003.

9 DES PLAQUES D’ADHESION
DYNAMIQUE DES PLAQUES D’ADHESION

10 Les forces dépendent de protéines kinases
Les differents complexes Integrine/substrat repondent a la contractilite du systeme ACTO-MYOSINE Visualiser les forces Keratocyte sur silicone D’après Kevin Burton et al., Molecular Biology of the Cell, Vol. 10, 3745–3769, November 1999. Les forces dépendent de protéines kinases Staurosporine inhibe les kinases Le LPA active les kinases Y27632 inhibe la ROCK1 Qui phosphoryle la Myosin II Segregation des integrines Consolidation des plaques d’adhesion D’après Eli Zamir and coll., Nature and Cell Biology, Vol 2, 2000:

11 détruit transitoirement les plaques d’adhésion
Visualiser les plaques d’Adhesion UV N-term C-term Alpha 5 GFP Les plaques d’adhésion sont sensibles à la tension: Y27632(=Inhibiteur de la RhoKinase, kinase qui active la myosine II) détruit transitoirement les plaques d’adhésion Protéine de fusion alpha5-GFP Fluorescence verte D’après Christoph Ballestrem, et al., The Journal of Cell Biology, Volume 155, Number 7, December 24, –1332

12 Localisation de la Paxilline chez Dictyostelium discoideum
D’après Tanya Bukahrova, et al., Journal of Cell Science 118, « Paxillin is required for cell-substrate adhesion, cell sorting and slug migration during Dictyostelium Development »

13 D’après Irina Kaverina, Olga Krylyshkina, and J. Victor Small,
RELATION ENTRE PLAQUES D’ADHESION ET MICROTUBULES D’après Irina Kaverina, Olga Krylyshkina, and J. Victor Small, J. Cell Biol Vol. 146 No. 5 p.1033. « Microtubule Targeting of Substrate Contacts Promotes Their Relaxation and Dissociation »

14 D’après Irina Kaverina et al.
LES MICROTUBULES ET LES PLAQUES D’ADHESION D’après Irina Kaverina et al. J. Cell Biol Vol. 146 No. 5 p.1033.

15 L’ Acide Hyaluronique (HA) induit la formation de lamellipodes
Via la petite proteine G Rac D’après Snezhana Oliferenko, Irina Kaverina, J. Victor Small, and Lukas A. Huber, J. Cell Biol Vol. 148 No. 6 p.1159. “Hyaluronic Acid (HA) Binding to CD44 Activates Rac1 and Induces Lamellipodia Outgrowth”.

16 Migration des cônes de croissances:
Images en lumière polarisée (Pol-scope) D’après Kaoru Katoh, Katherine Hammar, Peter J. S. Smith, and Rudolf Oldenbourg, Molecular Biology of the Cell, Vol. 10, 197–210, January 1999. « Birefringence Imaging Directly Reveals Architectural Dynamics of Filamentous Actin in Living Growth Cones»

17 Migration des cellules in vivo
1) Explants de tissu embryonnaire, lampe tres puissante pour echantillon epais. 2) Cellules sensees migrer microinjectees avec GFP (DiI.mov) ou Rac N17-GFP (Ginsberg) Cellules Rac sauvages: Tres longues lamellipodes, cellules sautent: vitesse de migration non lineaire, contraintes d’adhesion differentes. Cellules Rac N17 cellules font toujours des lamellipodes mais bougent moins vite.

18 Migration cellulaire lors de la formation du pseudo-champignon chez D
Migration cellulaire lors de la formation du pseudo-champignon chez D. discoideum Souche exprimant 2% de cellules PaxB-null (KO pour PaxB marquées à la GFP= vertes) et 2% de cellules PaxB wt exprimant la RFP= rouges (filmdictyo_movie6) D’après Tanya Bukahrova, et al., Journal of Cell Science 118, « Paxillin is required for cell-substrate adhesion, cell sorting and slug migration during Dictyostelium Development »