Groupages sanguins ABO Rhésus standard (RH1) Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean MOULIN DURAND - POCHET

Equipe pédagogique du lycée Jean MOULIN Marqueurs du système ABO Généralités Antigènes (Ag) de nature glucidique et localisés sur le feuillet externe de la membrane cytoplasmique (sur des protéines) Anticorps (Ac) de nature IgM présents dans le sang et dirigés contre des antigènes étrangers au soi Définissant 4 groupes sanguins : Groupe A B AB O Agglutinogènes Agglutinines Ag A Ag B Ag A et Ag B Pas d’Ag (hématies) Ac anti B Ac anti A Pas d’Ac Ac anti B et Ac anti A (sérum) Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean MOULIN DURAND - POCHET

Equipe pédagogique du lycée Jean MOULIN Marqueurs du système Rhésus standard Généralités Antigènes (Ag) de nature protéique localisés sur le feuillet externe de la membrane cytoplasmique Pas d’anticorps (Ac) naturels (si immuns de classe IgG) présents dans le sang Définissant 2 groupes sanguins Rhésus standard : Groupe Rhésus + (RH : 1) Rhésus – (RH : -1) Agglutinogènes Ag D Pas d’Ag D (hématies) Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean MOULIN DURAND - POCHET

Ag : naturellement particulaires Agglutination active directe Principe Ag : naturellement particulaires Ac : agglutinants Agglutination active directe Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean MOULIN DURAND - POCHET

PREPARATION DES COMPOSES SANGUINS A TESTER Sang total recueilli avec anticoagulant Séparation du surnageant (plasma contenant les anticorps) Centrifugation 10 minutes 500g Dilution à 10 % en eau φ du culot globulaire (Hématies porteuses d’antigènes) Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean MOULIN DURAND - POCHET

PREPARATION MATERIEL ET REACTIFS Réactifs Témoin Anti A Anti B Anti A + Anti B Anti D GRA GRB GRO+ GRO- Diluant Sérum tests Globules rouges tests et contrôles Plaque Témoin auto Témoin réactif Anti A Anti B Anti A + Anti B REF GR A GR B Témoin Allo Anti D CQ + CQ + CQ - Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean MOULIN DURAND - POCHET

Equipe pédagogique du lycée Jean MOULIN DEPOT DES REACTIFS Témoin auto Témoin réactif Anti A Anti B Anti A + Anti B REF GR A GR B Témoin Allo Anti D CQ + CQ - Témoin Anti A Anti B Anti A + Anti B Anti D GRA GRB GRO+ GRO- Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean MOULIN DURAND - POCHET

AJOUT DES COMPOSES SANGUINS A TESTER Globules Rouges à 10% à grouper Plasma ou sérum à grouper REF Témoin auto Anti A Anti B Anti A + Anti B GR A GR B Témoin Allo Anti D CQ - Témoin réactif CQ + REF Témoin auto Anti A Anti B Anti A + Anti B GR A GR B Témoin Allo Anti D CQ - Témoin réactif CQ + Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean MOULIN DURAND - POCHET

Equipe pédagogique du lycée Jean MOULIN MELANGE PROLONGE PAR ROULIS POUR FAVORISER LA FORMATION DE RESEAUX DE COMPLEXES IMMUNS REF Témoin auto Anti A Anti B Anti A + Anti B GR A GR B GRO/Témoin Allo Anti D CQ + Témoin réactif CQ - Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean MOULIN DURAND - POCHET

LECTURE DES AGGLUTINATS Absence d’agglutinats Pas de formation de réseau agglutinant Présence d’agglutinats Formation de réseau agglutinant de complexes immuns Pouvant être quantifié par un système de croix selon la taille et le nombre d’amas Témoin auto + Témoin réactif ++ +++ REF Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean MOULIN DURAND - POCHET

INTERPRETATION DES TEMOINS Composition Aspect attendu Aspect non conforme Témoin Auto Témoin Réactif Témoin Allo sérum du sujet + hématies sans Ag des groupes ABO Rhésus sérum du sujet + hématies du sujet hématies du sujet + diluant des sérums tests Témoin auto Témoin réactif Présence d’Ac froids dans le sérum du sujet agissant à température du laboratoire agglutinant ses propres hématies Image d’agglutination donnée par les hématies du sujet diluées dans le réactif dans les conditions opératoires Présence d’anticorps dans le sérum du sujet, reconnaissant d’autres structures sur les hématies que les Ag ABO Rhésus REF Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean MOULIN DURAND - POCHET

Conclusion : Le sujet 6995 est du groupe AB+ EXEMPLES Globules rouges du sujet agglutinés par tous les antisérums = Présence des Ag érythrocytaires A et B Témoins non agglutinés 6995 Témoin auto Anti A Anti B Anti A + Anti B GR A GR B Témoin Allo Anti D CQ + Témoin réactif CQ - Contrôles de qualité : agglutiné pour CQ+ et non agglutiné pour CQ- Sérum du sujet n’agglutinant aucun globule rouge test = Pas d’anticorps sériques Globules rouges du sujet agglutinés par le sérum antiD = Présence des Ag érythrocytaires D Témoins et contrôles de qualité conformes : validation des réactifs et de la technique Épreuves globulaire (Beth Vincent) et sérique (Simonin) concordantes : pas d’anticorps dirigés contre les propres antigènes et présence d’anticorps contre les antigènes absents présence des agglutinogènes A et B et absence d’agglutinines : Groupe AB Mise en évidence de l’antigène D : Rhésus standard positif Conclusion : Le sujet 6995 est du groupe AB+ Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean MOULIN DURAND - POCHET

Conclusion : Le sujet 6982 est du groupe A+ EXEMPLES Témoins non agglutinés Globules rouges du sujet agglutinés par le sérum anti A (et antiA+B) = Présence des Ag érythrocytaires A 6982 Témoin auto Anti A Anti B Anti A + Anti B GR A GR B Témoin Allo Anti D CQ + Témoin réactif CQ - Contrôles de qualité : agglutiné pour CQ+ et non agglutiné pour CQ- Sérum du sujet agglutinant les globules rouges test B = Présence d’anticorps anti B Globules rouges du sujet agglutinés par le sérum antiD = Présence des Ag érythrocytaires D Témoins et contrôles de qualité conformes : validation des réactifs et de la technique Épreuves globulaire (Beth Vincent) et sérique (Simonin) concordantes : pas d’anticorps dirigés contre les propres antigènes et présence d’anticorps contre les antigènes absents présence des agglutinogènes A et présence d’agglutinines anti B : Groupe A Mise en évidence de l’antigène D : Rhésus standard positif Conclusion : Le sujet 6982 est du groupe A+ Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean MOULIN DURAND - POCHET

Conclusion : Le sujet 6985 est du groupe O- EXEMPLES Témoins non agglutinés Globules rouges du sujet agglutinés par aucun antisérum = Absence d’Ag érythrocytaires A ou B 6985 Témoin auto Anti A Anti B Anti A + Anti B GR A GR B Témoin Allo Anti D CQ + Témoin réactif CQ - Sérum du sujet agglutinant les globules rouges test A et B = Présence d’anticorps anti A et anti B Contrôles de qualité : agglutiné pour CQ+ et non agglutiné pour CQ- Globules rouges du sujet non agglutiné par le sérum antiD = Absence des Ag érythrocytaires D Témoins et contrôles de qualité conformes : validation des réactifs et de la technique Épreuves globulaire (Beth Vincent) et sérique (Simonin) concordantes : présence des deux types d’anticorps anti A et anti B chez un sujet ne possédant aucun antigène A ou B Absence des agglutinogènes A et B et présence d’agglutinines anti A et anti B : Groupe O Absence de l’antigène D : Rhésus standard négatif Conclusion : Le sujet 6985 est du groupe O- Année 2008 Equipe pédagogique du lycée Jean MOULIN DURAND - POCHET