Protocole : A) Mise en culture 1 100microL de levureAde2 (roses) 2 Rateau: étaler la goutte de levure Attention: Conditions stériles !! Milieu : Gélose, MM,MO, eau B) Exposition aux UV temps différents de 0s à 80s
Principe de développement de la levure 1 CELLULE de levure de bière Ade2(rose) Invisible à l’œil nu MULTIPLICATION CLONE rose Visible à l’œil nu Population de levures issues de la 1ère cellule Toutes ces cellules possèdent le même message héréditaire, la même séquence d’ADN
Résultats de la mutagenèse de la levure rose Temps UV% de clones blancsNombre de clones blancs Nombre de clones roses Nombre total de clones exp resultats dénombrement calcul % de clones blancs = Nbre clones blancs X 100 Nbre total de clones Paramètre testé= tps d’exposition aux UV
Étude du tableau Observation:+ tps d’expo aux UV est long, + les cellules meurent Donc les UV ont un effet létal sur les cellules (dégrade ADN) Obs: + tps d’UV long, + prop des clones roses diminue +prop des clones blancs augmente Donc les cellules qui ont survécu ont muté Les UV ont un effet mutagène sur les cellules(modifications de l’ADN Le témoin sans UV a des clones blancs, Donc les mutations sont spontanées et en dehors des paramètres du milieu
Construction du graphe du % de clones blancs en fonction du temps d’exposition aux UV f y = ( x ) y x résultat expérience Pour réussir: -titre -axes -échelle -placer les points
Commentaire du graphe : Au temps Os d’UV on a 3.1% de clones blancs = témoin Donc il existe des mutations sans UV De 0s à45s d’UV : la valeur des clones blancs augmente Coefficient directeur= pente= y2 – y1 x2- x1 = = O.1 Donc le % de clones blancs augmente donc les mutations augmentent avec les UV C’est l’effet mutagène
De 45s à 80s la valeur des clones blancs augmente Donc le taux de mutations augmente Pente = O.8 Le nombre total de clones diminue = effet létal Les cellules meurentsous l’action des UV (ADN muté,dégradé) Le % de clones blancs augmente = effet mutagène Les cellules qui survivent mutent encore + ( ADN muté) = interprétation
AAAAAAAAAAA TTTTTTTTTTTTT ADN normal AGAAAAAAAAA TTTTTTTTTTTTT ADN muté
Conclusion : Une mutation : c’est le changement dans la séquence des nucléotides d’un brin d’ADN (1paire de nucléotide ou plusieurs. Les mutations existent au hasard dans l’ADN en dehors de tout paramètre extérieur. Certains paramètres extérieurs (UV, radioactivité) amplifient les mutations. Les mutations sont à l’origine des nouvelles versions des gènes = les allèles. Seules les mutations des cellules reproductrices peuvent se transmettre d’une génération à l’autre.