Genetic Suppression of Polyglutamine Toxicity in Drosophila Parsa Kasemi-Esfarjani, et al ; Science 287, 1837 (2000)
Plan Introduction : visée de l’article Description de la méthode Résultats et interprétations Conclusion
INTRODUCTION Visée de l’article
Introduction Chorée de Huntington : présente des agrégats de polyglutamine Utilisation de drosophiles présentant ce phénotype comme modèle de la maladie Criblage des gènes suppresseurs de ce phénotype Homologie des protéines entre la drosophile et l’humain
DESCRIPTION DE LA MÉTHODE Description et élaboration des lignées transgéniques poly-Gln
Lignées comportant des polyCAG – 20 répétitions : lignée 20Q – 127 répétitions : lignée 127Q Après traduction des ARNm on aura des polyglutamines de ces 2 types Utilisation de différents promoteurs pour induire l’expression génique spécifiquement dans les yeux
Élaboration préalable de 2 lignées transgéniques
Lignée UAS-polyCAG Figure : construction génomique incorporée dans le génome de la drosophile Insertion d’un élément P contenant : –Promoteur UAS –Séquence polyCAG (20 ou 127 répétitions) –Séquence codant pour un épitope de l’hémagglutinine (HA)
Lignée GMR-Gal4 Insertion d’un élément P contenant : – Promoteur GMR – Séquence Gal4 codant pour la protéine GAL4 Figure : Construction génomique incorporée dans le génome de la drosophile
Croisement des 2 lignées Obtention de drosophiles exprimant les polyglutamines dans l’œil Elles sont UAS-polyCAG et GMR-GAL4
5’3’ Poly CAG UAS HA 5’3’ GAL 4 GMR Facteur de transcription spécifique de l’œil Transcription de GAL4 Protéine Gal4 ARNm Gal4 Traduction de l’ARNm Gal4 Induction de la transcription Poly CAG HA ARNm Transcription Traduction Polyglutamine avec épitope HA
Influence du fond génétique Sélection de plusieurs lignées – 3 lignées 20 Q – 3 lignées 127 Q