Discussion and Conclusions ANALYSE QUALITATIVE ET QUANTITATIVE DES PRODUITS PHARMACEUTIQUES DANS L'EAU PAR CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE COUPLÉE À SPECTROMETRE DE MASSE (HAUTE PERFORMANCE LC/MS/MS) AVEC SPE EN LIGNE: DEVELOPPEMENT ANALYTIQUE ET APPLICATION InesTlili1,3, Giovanni Caria2, Sopheak Net3 , Ibtissem Ghorbel-Abid1,4, Baghdad Ouddane3, Riadh Ternane1, Malika Trabelsi-Ayadi1 1Université de Carthage, Faculté des Sciences de Bizerte, Laboratoire d’application de la chimie aux ressources et substances naturelles et à l’environnement, Bizerte 7021, Tunisie 2Institut National de la Recherche Agronomique (INRA), Arras, France 3 Université Lille 1, Laboratoire Géosystèmes-UMR 8217 CNRS, Villeneuve d’Ascq 59650, France 4Institut National de Recherche et d’Analyse Physico-chimique, Tunis, Tunisie TLILIINES6@GMAIL.COM Poster ID : 732 2. Caractéristiques des produits pharmaceutiques étudiés Résumé Le problème des résidus médicamenteux à usage humain et vétérinaire dans les eaux est devenu une préoccupation croissante partout dans le monde. Ces molécules font l’objet de plusieurs programmes de recherche nationaux et internationaux. Ceci souligne le besoin urgent d'améliorer les connaissances sur le comportement, le devenir et les impacts sanitaires de ces produits émergents. En ce sens, ce travail vise à mettre au point d’une nouvelle méthode analytique efficace et sensible pour identifier et quantifier des résidus médicamenteux à usages humains et vétérinaires présent dans les eaux. Une méthode LC/MS/MS couplée avec SPE en ligne a été optimisée et validée pour identifier et quantifier 27 produits pharmaceutiques dont 5 tétracyclines, 8 sulfanilamides et 7 fluoroquinolones. La méthode validée est ensuite utilisée pour analyser des eaux provenant de plusieurs sites tunisiens et français. Introduction Figure 2: Chromatogramme et courbe d’étalonnage relatifs à la Carbamazépine Des études ont montré que les stations d’épuration ne sont pas capable d’éliminer complétement des résidus de médicaments. En conséquence, ces molécules sont détectés dans les milieux aquatiques naturels. Ces produits sont conçus pour être biologiquement actifs à de faibles concentrations, l’exposition chronique des organismes aquatiques et des hommes suscite par conséquent de nombreuses interrogations. Il s’avère alors urgent d’évaluer des niveaux de contamination des milieux naturels pour ensuite évaluer les impactes et aussi de trouver des solutions adaptées à la fois pour rémédier des milieux altérés et pour mieux éliminer ces molécules présentes dans les eaux. La première étape est de developer une méthode d’analyse robuste, fiable et assez sensible pour identifier et quantifier avec une bonne précision des concentrations de ces molécules qui se présentent à l’état de traces et ultra-trace dans les eaux. Dans ce travail, plusieur facteurs influençants sur la détection et quantification des résidus de medicaments sont étudiés. Matériels et Méthodes Figure 3: Chromatogramme et courbe d’étalonnage relatifs à la Dicyclanil Figure 4: Chromatogramme et courbe d’étalonnage relatifs à la Sulfathiazole Composés TR (min) LOD (ng/L) Ampicilline 11,37 40 Carbamazépine 11,48 20 Chlortetracycline 8,72 Ciprofloxacine 6,47 Danofloxacine 6,65 Dicyclanil 4,36 Difloxacine 7,10 Doxycycline 9,86 Enrofloxacine 6,73 Florfenicol 6,96 100 Gemfibrozil 16,92 Monensin 19,33 Norfloxacine 6,43 Composés TR (min) LOD (ng/L) Ofloxacine 6,19 40 Orbiloxacine 6,91 Oxytetracycline 6,82 Sulfabenzamide 8,20 20 Sulfadiazine 4,81 250 Sulfadimethoxine 8,76 Sulfamerazine 5,66 Sulfamethoxazole 7,03 Sulfanilamide 2,78 Sulfathiazole 5,28 Tetracycline 6,08 trimethoprim 5,77 Tylosine 12,18 L’appareil utilisé est un HPLC/MS/MS avec un système de pré-concentration (SPE en ligne) permettant d’injecter 1 mL d’extrait. . This is a label for the image. This is a label for the image. This is a label for the image. This is a label for the image. This is a label for the image. Résultats 1. Influence du pH Le pH influence fortement sur le rendement d’extraction. Quartes valeurs de pH compris entre 2,5 et 7 ont été étudiées. Tableau 1: TR (min) et limite de détection (LOD) (ng/L) des composés étudiés Discussion and Conclusions SPE en ligne couplé à LC/MS/MS permet d’extraire et quantifier les résidus médicamenteux d’intérêts de cette étude avec des rendements satisfaisants. Le choix de cartouche, le volume de chargement, le débit et enfin le solvant d’élution ont été étudiés préalablement. Le rendement d'extraction (SPE) est en moyenne 70%. La limite de détection de chaque composé d’intérêt est d'environ 20 ng/L. De plus, on obtient également de bonne répétabilité et reproductibilité avec cette méthode. Cette méthode d'analyse est ensuit appliquée avec de bons résultats pour identifier et quantifier des résidus médicamenteux dans les eaux naturelles et eaux usées (station d’épuration, lagune) de plusieurs sites tunisiens et français. Perspectives: L’étude d’optimisation des méthodes d’extraction de ces molécules dans les sédiments, les sols et les boues font aussi objet de notre étude et les expériences sont en cours. Pour compléter notre étude déjà entamée, on visera à cartographier les niveaux de contamination des eaux, sols et sédiments dans des sites ateliers en France et en Tunisie. Figure 1: pH sur le rendement de l’extraction Le pH 2,5 donne le meilleur rendement d’extraction et fournie meilleure répétabilité pour la majorité des produits pharmaceutiques étudiés. ICIME 2014 International Conference in Integrated Management of Environment http://www.icime.net