SEMINAIRE INTERNATIONAL "SANTE DES PLANTES AU SERVICE DU DEVELOPPEMENT". UNIVERSITE HASSIBA BEN BOUALI ,CHLEF ; LES 12- 13 & 14 AVRIL 2016 INTRODUCTION L'emploi des micro-organismes pour lutter contre les maladies d'origine tellurique fait l'objet de recherches intensive. L'emploi de souches non-pathogènes de F. oxysporum est certainement un des moyens de lutte biologique le plus étudié contre la fusariose vasculaire. Ces souches non-pathogènes proviennent pour la plupart de sols résistants aux fusarioses vasculaires (Alabouvette et al, 1979; Smith et Snyder, 1971). OBJECTIF Le but du présent travail est d'optimiser l'emploi de micro-organismes antagonistes dans la lutte contre la fusariose vasculaire du Pois en utilisant des souches de Fusarium oxysporum non pathogène isolés à partir de 03 zones agro climatiques différentes. 1.AGENTS ANTAGONISTES 1.1. Prélèvement des échantillons Des échantillons de sol et/ou des plantes sains du pois (ne montrant aucun symptôme) ont été prélevés au hasard à partir de 03 zones agroclimatiques différentes à vocation légumières: Mascara (la ferme expérimentale de l’université et la commune de Ain Ferrah) , Saida ( la ferme démonstrative de l’ITGC) et d’un palmerais (la ferme expérimentale de L’INRAA d’Adrar). 1.2. Isolement et purification des antagonistes L’isolement du F.oxysporum non pathogène est effectué par l’utilisation de la technique du soil plate décrite par Warcup, en 1950 et la technique du Suspension dilution décrite par Singelton et al (1992). 2.AGENTS PHYTOPATHOGENES Cinq isolats du F.oxysporum f. sp. pisi (RF4, RF9, RF31, RI01 et RI42) viennent de la collection du laboratoire LRSGB ont été choisis afin d’étudier l’effet antagoniste du F.oxysporum non pathogène sur ces dernières. 3.ETUDE DE L’ACTIVITÉ ANTAGONISTE A- « IN VITRO »   L : croissance linéaire D : diamètre de la colonie d : diamètre de l’explant B- « IN VIVO» L’étude de l’effet antagoniste « in vivo » des Fonp vis-à-vis le Fop est réalisé par la méthode que celle décrite par Mandeel et Baker, (1991); Alabouvette et Couteaudier (1992). Etude du pouvoir pathogène de Fo Obtention des plantes du Pois de 08 jours Obtention d’un inoculum de 10 6 spore/ml Inoculation des plantes du Pois par l’immersion des racines dans la suspension sporale ( 30 mn) Transfert des plantes du Pois inoculées vers le milieu Hogland Estimation des symptômes durant 21 jours L = (D – d) / 2 Les expériences réalisées d’une manière principale en conditions du laboratoire ont abouti à l’obtention de 19 isolats du Fo dont 07 (Fo01, Fo06, Fo07, Fo11, Fo14 et Fo19) ont été jugés non pathogènes sur le Pois pendant 21 jours. De ce fait les résultats relatifs de l’activité antagoniste des isolats non pathogènes ( Fo01,Fo06 et Fo7) sur le Pois a montré l’efficacité de ces derniers vis-à-vis de l’agents de la fusariose vasculaire du Pois, cette activité s’est montrée efficace aussi bien « in vitro » ( Fo01, Fo06 et Fo07) que « in vivo » ( Fo01et Fo06) par une compétition assez significative traduite par une vitesse de croissance de l’agent antagoniste plus élevée par rapport à l’agents pathogène Fop, ainsi que la réduction de l’indice de la maladie. D’un autre côté, l’efficacité des isolats antagoniste dans le test « in vitro » est variable selon le milieu de culture utilisé et l’agent pathogène apporté, où les meilleurs résultats sont obtenus sur milieu de culture PDA et avec les isolats Fo01 et Fo06 lorsqu’elles sont testées avec les isolats pathogènes RF4, RF9, RF31, RI01 et RI42. En se basant sur ces résultats encourageants, il est d’intérêt donc d’approfondir les études dans ce domaine, afin de sélectionner les meilleures souches antagonistes autochtones pour les utiliser dans un programme de lutte intégrée. Alabouvette, C, Rouxel, F., & Louvet, J. 1979. Characteristics of Fusarium wiltsuppressive soils and prospects for their utilisation in biological control. Dans:Soil-borne plant pathogens, B. Schippers, & W. Games (eds), Académie Press, London, New York, San Francisco, pp. 165-182. Smith, S. N and Snyder, W. C. 1971. Relationship of inoculum density and soil types to severity of Fusarium wilt of sweet potato. Phytopathology 62: 273-277. Mandel, Q. et Baker, R., 1991. Mécanismes biologiques impliqués dans le contrôle de la fusariose de concombre avec des souches de Fusarium oxysporum non pathogenic. Phytopathology 81:462-469. Phytopathology 81:462-469. 1991. Alabouvette, C., et Couteaudier, Y.,1992. Le contrôle biologique des flétrissements fusariens avec le Fusarium non pathogène. In: Tjamos, ES (Ed.). In: Tjamos, ES (Ed.). Biological control of plant diseases. Le contrôle biologique des maladies des plantes. New York. New York. Plenum Press, 1992. Plenum Press, pp.415-426. [ Links ] pp:415-426. RESULTATS MATERIELS ET METHODES CONCLUSION REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES A B C D E F A travers nos essais on a pu isolé 19 isolats du F. oxysporum, en se basant sur les critères morphologiques et microscopiques. Fig.04:Aspect microscopique du Fo: A: les macro et les microconidies, B: mycélium, conidiophore , mico et macroconidies X40 Macroconidies Conidiospore Mycélium Fig.05: Répartition des isolats de Fo en fonction des régions. Fig,08: Résultats de l’effets des isolats non pathogènes sur les isolats pathogènes « IN VITRO » Milieu PDA Milieu extrait du terre Fig.03 : Les morphotypes rencontrés chez les isolats du Fo :(A: cotonneux en mèche, B: Ras muqueux, C:Sporodochie, D: Duveteux, E: Cotonneux dense, F: Arbuculeux) sur PDA. Microconidiess Macroconidie s Fig.06: l’incidence de la maladie des isolats du Fo inoculés sur le Pois (Variété Merveille de Kelvidon). Fig.09: Résultats de l’effets des isolats non pathogènes sur les isolats pathogènes « IN VIVO » Transplantation vers Le Milieu Hogland 12 Isolats pathogènes Témoins 07 Isolats non pathogènes Fig.07: Résultats de l’inoculation des plantes du Pois ( variétés Merveille de Kelvidon) Par les isolats du Fo pendant 21 jours. Pré-germination des grains du Pois Obtention des plantules du pois âgées de 08 jours Essai de lutte biologique contre la fusariose vasculaire du Pois (Pisum sativum) causée par Fusarium oxysporum f.sp.pisi. SOUDANI Abderrahmane(1), MERZOUG Aoumria(2) et TALEB Malika(2) (1) Département d’Agronomie, Faculté SESNV, Université Mohamed Khaider, Biskra. (2) Laboratoire de Recherche sur les Systèmes Biologique et Géomatique, Faculté SNV, Université Mostapha Stamboli, Mascara. Fig.01: Méthode de l’inoculation des plantes du Pois ( variétés Merveille de Kelvidon) Par les isolats du Fo pendant 21 jours. Fig.02 : Confrontation de et Fop avec Fonp par contact direct sur milieu PDA et extrait de terre