Expression des Gènes du CMH II L’expression des gènes du CMH II est strictement régulée et est restreinte dans la plupart des situations physiologiques a quelques types cellulaires hautement spécialisés - cellules présentatrices de l’antigène professionnelles = cellules dendritiques - les cellules B - les cellules T activées - compartiment cellulaire du Thymus (sélection positive) - expression peut être augmentée par l’IFN g 1

Expression des Gènes du CMH II La régulation a principalement lieu au niveau transcriptionnel : mise en évidence de régions régulatrices à proximité du site d’initiation de la transcription boites W, X1, X2, et Y. Les facteurs se fixant sur ces boites ont été décrits : RFX (FRX5 +RFXAP+FRXANK) se lie à X1 X2BP se lie à X2 NFY (NF-YA+NF-YB+ NF-YC) se lie à Y RFX + X2BP+NFY = complexe formant une plateforme servant de site de recrutement pour un coactivateur CIITA 2

Expression des Gènes du CMH II L’existence de CIITA a été démontré en étudiant les patients atteints de déficience en molécules CMHII (Bare lymphocyte Syndrome BLS) Absence des molécules de classe II à la surface des cellules présentatrices de l’antigène et des autres types cellulaires sous IFNg Immunodéficience humorale et cellulaire sévère entraînant la mort des patients au cours de l’enfance 3

Expression des Gènes du CMH II L’absence d’expression des molécules CMH II est la conséquence D’un défaut de transcription des gènes CMH II. Concerne : gènes a et b codants pour HLA-DR, HLA-DP et HLA-DQ Il est maintenant clairement démontré que CIITA et RFX sont essentiels pour la transcription des classes II et ne peuvent être « courtcircuités » Les mutations prenant place sur ces molécules sont responsables du BLS Rôle potentiel dans l’immuno-modulation? Greffes d’organes? 4

Reconnaissance allogénique Voie directe : Prédomine dans rejet aigu et début de la réponse allogénique CPA Donneur T receveur Peptide allogénique 5

Reconnaissance allogénique Voie indirecte : Rejet chronique CPA receveur T receveur Peptide allogénique 6

Reconnaissance allogénique Voie directe : Elle induit une réponse immune intense. - haute densité de déterminants : les LT alloréactifs reconnaissent principalement les déterminants étrangers de la structure du CMH allogénique Peu Ag allo présenté mais bcp CMH - multiples complexes binaires: peptides fixés par CMH allogénique sont variés et de nbreux clones T différents sont recrutés 7

Reconnaissance allogénique Voie indirecte : Plus intense en phase de rejet chronique - disparition des CPA donneur ? 8

Rejet de greffe Niveau de réponse immunologique différents en fonction de l’organe : Cœur < Foie< Rein Classification basée sur le délai de survenue du rejet après la greffe : rejet hyperaigu (mins), rejet aigu qq jours à qq années, rejet chronique (plusieurs années après la greffe) Classification basée sur la cause : anticorps, cellules Hyperaigu : anticorps seul Aigu : cellules et/ou Ac Chronique : cellules et /ou Ac 9

Rejet de greffe Comment prévenir le rejet ? Suivi immunologique des patients Cross match pré greffe 10

Greffe de cellules souches hématopoïétiques : Pourquoi? Remplacer le tissu hématopoïétique anormal d’un patient par le tissu hématopoïétique donneur En France 600 allogreffes sont réalisées chaque année (2/3 cas donneurs familiaux) Leucémies 70% des cas, Lymphomes et myélome 10%, aplasies médullaires 7%, déficits immunitaires et maladies génétiques 13%. 12

Greffe de cellules souches hématopoïétiques : Comment? Malade hospitalisé 15 j avant la date de greffe (décontamination digestive, traitements mis en œuvre) Conditionnement débute 8 à 10 j avant la greffe Irradiation totale, chimiothérapie…. Après greffe isolement de 5 à 6 semaines 13

Les sources de cellules souches Moelle osseuse : AG, hospitalisation Cellules souches périphériques : pas AG ni hospitalisation mais facteur de croissance G-CSF injecté au donneur Sang de cordon : nb fini de cellules, congélation 14

Réaction du greffon contre l’hôte GvHD Observée au cours de la greffe de cellule souches hématopoïétiques Cellules souches hématopoïétiques = cellules immunocompétentes(lymphocytes T et B, monocytes, APC) Receveur Immunodéprimé (traité par chimiothérapie, radiothérapie) 15

Réaction du greffon contre l’Hôte pourquoi ? Les cellules immunitaires du receveur ne sont pas réactives REJET Les cellules du greffon (T) sont immunocompétentes, elles peuvent réagir contre l’hôte = maladie du greffon contre l’hôte 16

Patient en attente d’un greffon de CSH Typage HLA du patient Classe I A, B, ± C: sérologie, Bio.mol. Basse résolution Classe II (DRB1 ± DQB1 ± DPB1) bio.mol. Basse résolution Typage de la famille proche : parents + frères et soeurs Classe I A, B Classe II DRB1 La recherche d’un donneur potentiel doit se faire le plus vite possible après le diagnostic 17

Réaction du greffon contre l’hôte GvHD Complication principale et limitante de le greffe de CSH. Observée dans 30% des cas greffes familiale géno-identique et plus de 80 % des greffes phéno-identiques Survient dans les 100 jours après la greffe : atteinte cutanée (paume des mains, plante des pieds) tube digestif (diarrhées +++) foie et poumon Risque et grade est d’autant plus grave que le situation de compatibilité est défavorable 18

Réaction du greffon contre l’hôte Parham et al. Nature Reviews Feb 2003 19

Réaction du greffon contre l’Hôte pourquoi ? Solution = enlever les cellules T (rosettes GR mouton, mAb…) Essais réalisés : GvH Rechutes +++++ Rôle anti leucémique des cellules T du donneur effet GvL (graft versus leukemia) 20

Les mismatchs permissifs Matching structural : HLA matchmaker (greffe d’organe) Histocheck (CSH) Matching fonctionnel Caractérisation des cellules T alloréactives 21

matching fonctionnel par analyse des cellules T alloréactives Analyse des cellules du patient avant greffe : - Culture mixte : remplacée par typage 4 digits DRB1 - Précurseur cytotoxiques : remplacés par typage 4 digits classe I Analyse des cellules du patient après greffe : - utilisation des cellules T responsables de la réponse allogénique in vivo. Rejet aigu ou GvH 22

Un seul acide aminé peut être la cible d’une réponse allogénique 23