AG 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Florence Buseyne ANRS-EP38-IMMIP AG 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Florence Buseyne F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

ANRS-EP38-IMMIP Inclusions et caractéristiques des sujets 93 patients inclus Février 2007-Février 2009 Infection périnatale par le VIH-1 >15 ans Statut thérapeutique inchangé depuis au moins 6 mois Age médian : 17 ans (15-24) 57% Filles 85% HAART, dont 75% ARN VIH <80 copies/ml 66% CD4 > 500 cellules/µl F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

ANRS-EP38-IMMIP : Objectifs Naissance --------- >15 ans Clinique Traitement CD4 Virus Le statut immunitaire et virologique actuel F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

Différentiation des lymphocytes T Périphérie Tissus lymphatiques Moelle osseuse Thymus Mémoire Naive Naive Mémoire Mémoire Naive Antigène Mémoire Mémoire Naive Naive Destruction VIH La taille du compartiment CD4 naif  est liée à la diversité du répertoire et la capacité des lymphocytes T à contrôler de nouvelles infections F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Méthode : analyse des cellules du sang périphérique par cytométrie en flux Adapté de Maecker, NRI, 2012 F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les proportions de lymphocytes T CD4 naifs sont préservées chez les sujets de l’étude «Témoin » : intra-laboratoire, adultes non infectés VIH et non infectés VHC «Témoin » : Littérature CD4 Médiane (10-90th) CD8 Médiane (10-90th) IMMIP 15-24 ans 56 (37-70) 31 (15-56) Non infectés  (US 12-18 ans) 51 (31-65) 56 (42-73) CD4 Médiane (25-75th) CD8 IMMIP 15-24 ans 56 (44-64) 31 (22-45) Non infectés (US Adultes) 50 (41-58) 52 (41-59) F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Shearer, JACI, 2003 Roederer, JCI, 1995

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les proportions de lymphocytes T naifs sont corrélés au nombre de lymphocytes T CD4 F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les proportions de lymphocytes T naifs ne sont pas liées à l’âge/durée d’infection par le VIH Pas d’association avec l’âge au nadir de CD4, ni avec l’âge à l’initiation des HAART F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

Différentiation des lymphocytes T et infections virales VIH Mémoire Naive Mémoire Mémoire Antigène Naive Mémoire CMV Mémoire Naive Naive Destruction VIH VIH Les infections par le VIH et le CMV induisent une diminution des % de lymphocytes T naifs chez l’adulte F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les proportions de lymphocytes T CD8 naifs sont diminués chez les sujets ayant une réplication active du VIH et chez les sujets infectés par le CMV F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les proportions de lymphocytes T CD4 naifs ne sont pas diminués chez les sujets ayant une réplication active du VIH et chez les sujets infectés par le CMV Résultat paradoxal lien CD4 chez les sujets de l’étude Littérature adultes F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

Histoire de la maladie et lymphocytes naifs → Analyses stratifiées selon ARN VIH plasmatique (interactions) Focus sur → les sujets dont l’ARN VIH est < 80 copies/ml → les lymphocytes T CD4 F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les proportions de lymphocytes T CD4 naifs sont positivement corrélés avec la virémie cumulée au cours des 10 ans précédant le prélèvement ARN VIH < 80 copies/ml F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les % de lymphocytes T CD4 naifs sont plus élevés chez les sujets ayant des virus X4R5 Virus X4R5 (« tropisme génétique »)=virus « archivé » Stades avancés de la maladie (déplétion CD4) Plus infectieux pour les lymphocytes T CD4 naifs que les virus R5 ARN VIH < 80 copies/ml F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les % de lymphocytes T CD4 naifs sont pas liés à la sévérité clinique/immunologique de la maladie ARN VIH < 80 copies/ml F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

Les % de lymphocytes T CD4 naifs « émigrants thymiques récents » Kohler, Blood 2009 L’expression de la molécule CD31 définit deux populations de lymphocytes T CD4 naifs Le % de lymphocytes T CD4 naifs CD31+ est un marqueur de l’activité thymique PBMC congelés, n=57, cytométrie en flux F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les % de lymphocytes T CD4 naifs « émigrants thymiques récents » sont plus élevés chez les sujets ayant un ARN VIH plasmatique détectable % parmi les lymphocytes T CD4 naifs F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les % de lymphocytes T CD4 naifs « émigrants thymiques récents » sont positivement corrélés au nombre de lymphocytes T CD4 Nombre lymphocytes T CD4 % CD4 naifs ARN VIH < 80 copies/ml F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les % de lymphocytes T CD4 naifs « émigrants thymiques récents » sont négativement corrélés à l’immunosuppression antérieure ARN VIH indetectables F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les % de lymphocytes T CD4 naifs « émigrants thymiques récents » ne sont pas liés à l’histoire virologique, ni au tropisme viral ARN VIH indetectables F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Les % de lymphocytes T CD4 naifs « émigrants thymiques récents » sont plus élevés chez les filles F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

Analyses multivariées Sujets ARN VIH indétectable-%CD4 naifs Naive T CD4 (% among CD4 lymphocytes) Estimate [ 95% CI] P Age 15-17 years 18-19 years 20-24 years Reference 2.7 -2.4 [-4.8;10.3] [-11.0;6.2] 0.54 CD4 cell count Per 100 cells/µl 1.7 [0.40;3.99] 0.01 Viral tropism X4R5 R5 -9.9 [-16.4;-3.5] 0.004 Cumulative viremia (10 yrs) Per 1000 log10 copie x days 0.90 [-0.12;1.93] 0.08 F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

Analyses multivariées Sujets ARN VIH indétectable-%CD4 RTE (% among naive CD4) Estimate [ 95% CI] P Age 15-17 years 18-19 years 20-24 years Reference -2.4 -1.1 [-6.4;1.6] [-5.5;3.4] 0.47 CD4 cell count Per 100 cells/µl 0.93 [0.21;1.65] 0.01 Sex Male Female 4.5 [1.0;8.0] Lifetime duration of CD4% <15% Per 100 months -5.7 [-10.3;-1.1] 0.02 Plasma IL-10 (100x per pg/ml) 1.3 [-0.2;2.9] 0.09 F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

Chez les sujets ARN VIH plasmatique détectable… en bref Prudence, manque de puissance Lié aux lymphocytes T CD4 (%CD4 naifs, mais pas %CD4 RTE) Non lié quantité d’ARN VIH plasmatique Non lié à l’âge F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Conclusions Les proportions de lymphocytes T CD4 naifs et l’activité thymique (%RTE) → Sont positivement corrélées au nombre de lymphocytes T CD4 (≈adultes) → Ne sont pas diminuées/sont augmentées par la réplication du VIH (≠ adultes) Comparaison sujets ARN VIH détectable/indétectable Histoire virologique chez les sujets ARN VIH indétectable Interprétation : la destruction des lymphocytes T CD4 par la réplication du VIH est compensée par une production accrue de lymphocytes T CD4 naifs dans le thymus Décrit chez l’enfant infecté (corrélation positive TREC-ADN VIH) Décrit chez certains adultes (<40 ans) et avant immunosuppression sévère F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Discussion Maintien activité thymique élevée et de proportions de lymphocytes T CD4 naifs préservées avec ou sans suppression de la réplication virale → Résultat remarquable compte tenu des caractéristiques des sujets IMMIP médiane 17 ans après l’infection, nadir %CD4 = 8% (5-11) Puberté : début involution du thymus → Equilibre virologique/immunologique « pédiatrique », déjà observé via l’absence d’association ADN VIH-nombreCD4 (Avettand-Fenoel, JID, 2012) → Un bémol : Chez les sujets avec suppression de la réplication virale, le % de RTE est négativement corrélée à la durée d’immunosuppression sévère → Une inconnue : combien de temps cette activité thymique élevée va-t-elle durer? → Work in progress : impact des autres mécanismes immunologiques (activation, homéostasie…) F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre

F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Remerciements INSERM U1018 Y. Benmebarek N. Bouallag-Bonnet J. Lechenadec J. Warszawski ANRS M. Trumeau L. Marchand Sites hospitaliers ANRS-CO-10 S. Blanche, F. Veber, M.C. Mourey A. Chacé, M. Bonnard C. Dollfus, G. Vaudre G. Firtion, N. Boudjoudi M. Levine, A. Faye, C. Poder, S. Leveillé A. May J.P.Viard, A. Maignan C. Floch-Tudal S. Lemerle V. Jeantils, S. Tassi Laboratoire de virologie-EA3620 U. René Descartes V. Avettand-Fenoel C. Rouzioux Institut Pasteur de Paris UPIPV puis EPVO F. Buseyne C. Clairet P. Louche T. Montange Y. Rivière URIR C. Didier D. Scott-Algara Support financier ANRS Fondation AREVA F. Buseyne 05/04/2013 Le Kremlin-Bicêtre Acknowledgments The present work was supported by the « Agence Nationale de la Recherche sur le SIDA et les Hépatites » and the « Fondation AREVA ». We thank all patients who agreed to participate in this study. Institution and investigators of the ANRS-EP38-IMMIP study were : Pédiatrie-néonatologie Hôpital Louis Mourier, Colombes (Floch-Tudal Corinne) ; Gynécologie-Obstétrique, Groupe Hospitalier Cochin Tarnier-Port-Royal (Firtion Ghislaine) ; Pédiatrie-Centre Hospitalier Intercommunal, Créteil (Lemerle Sophie) ; Pédiatrie-Centre Hospitalier Intercommunal, Villeneuve Saint-Georges (Chace Anne) ; Immuno-Hématologie Pédiatrique, Groupe Hospitalier Necker (Blanche Stéphane, Veber Florence) ; Pédiatrie-Centre Hospitalier Sud-Francilien, Evry (May Adrien) ; Maladies Infectieuses Hôpital Jean Verdier, Bondy (Jeantils Vincent) ; Onco-Hématologie Pédiatrique Hôpital Trousseau (Dollfus Catherine) ; Pédiatrie-Hôpital Robert Debré (Levine Martine, Faye Albert) ; Immunologie clinique adulte-Groupe Hospitalier Necker (Viard Jean-Paul). We are grateful to Sandrine Leveillé ( Hôpital Robert Debré), Geneviève Vaudre (Hôpital Trousseau), Sylvie (Hôpital Jean Verdier), Nora Boudjoudi (Hôpital Port Royal) and Marie-Christine Mourey (Hôpital Necker). K.M. Kean, a native English speaker, has verified the English language of the text.