LA RECHERCHE D’ANTICORPS ANTI-ERYTHROCYTAIRES J. Gargouri, CRTS – Sfax

INTRODUCTION Intérêt du sang et de ses dérivés en médecine : Sauvegarde de vie : "sang source de vie", Amélioration de la qualité de vie, Action pour le bien être social, Autorisation d’actes et gestes de soins intensifs/ transplantations et greffes. Risques multiples +++

SECURITE IMMUNO-HEMATOLOGIQUE Objectifs : Eviter la rencontre Ag-Ac chez le receveur, Prévenir toute immunisation aux Ag érythrocytaires. Moyens : GS ABO et Rh, Phénotypage, RAI, Test de compatibilité au laboratoire, EULM, Fiche transfusionnelle.

DEUX APPROCHES DE PREVENTION DES AC ANTI-ERYTHROCYTAIRES 1/- l’approche européenne choisit la RAI avant toute transfusion. recherche d’Ac dans le sérum du patient au moyen d’un panel. permet de préciser le type d’anticorps choisir les phénotypes des CGR à distribuer. n’évite pas l’immunisation.

DEUX APPROCHES DE PREVENTION DES AC ANTI-ERYTHROCYTAIRES 2/- l’approche anglo-saxone* privilégie le test de compatibilité au laboratoire avant toute distribution de CGR. recherche d’Ac personnalisée. la seule réponse est : poche compatible ou pas incapable de préciser le type d’anticorps en cas d’incompatibilité. n’évite pas l’immunisation. * Cas de la Tunisie.

REALISATION DES RAI 4 exigences : Un bon panel. Un éventail de techniques. Une bonne technique de Coombs indirect. Le bon moment.

UN BON PANEL permettant de mettre en évidence les Ac les plus dangereux : choix de la composition antigénique +++ plusieurs pays ont défini les Ag qui doivent en faire partie (circulaire 49/05). plusieurs types de panels : dépistage : 2-4 hématies comportant les Ag suivants : D, C, c, E, e, K, k, Fya, Fyb, Jka, Jkb, Lea, Leb, M, N, S, s, P1, Lua, Lub. réponse : présence ou absence d’Ac contre les Ag décrits.

UN BON PANEL

UN BON PANEL permettant de mettre en évidence les Ac les plus dangereux : choix de la composition antigénique +++ plusieurs pays ont défini les Ag qui doivent en faire partie (circulaire 49/05). plusieurs types de panels : dépistage identification : - 10 hématies ou plus. - mêmes Ag. - donne la spécificité de l’Ac. - validation statistique !!!

UN BON PANEL

UN BON PANEL permettant de mettre en évidence les Ac les plus dangereux : choix de la composition antigénique +++ plusieurs pays ont défini les Ag qui doivent en faire partie (circulaire 49/05). plusieurs types de panels : dépistage  identification  autres panels : "Référence", Rhésus, Public négatif, Privé.

UN BON PANEL

UN EVENTAIL DE TECHNIQUES plusieurs techniques. compte tenu des « comportements » des différents Ac susceptibles d’être mis en évidence : Saline 22° ou 4° → surtout Ac naturels : anti-Lewis, anti-P1, anti-Lua, anti-M, anti-N, anti-H Technique enzymatique à 37° (papaine, broméline, ficine,…) : anti-Rh (D,C, c, E, e), anti-K, certains anti-P1, anti-Lewis,… Coombs indirect : Ac des systèmes immunogènes. Coombs indirect BFI ou LISS Coombs sur hématies traitées par enzymes (Coombs trypsiné) Coombs trypsiné en BFI Techniques automatiques : auto-analyseur

UN EVENTAIL DE TECHNIQUES quelle association utiliser pour la meilleure sensibilité aux Ac ? Coombs indirect - technique enzymatique. support de la réaction : tube, microplaque, techniques automatiques, gel filtration. gel filtration  Coombs indirect sans perte de sensibilité. avantages de rapidité et de coût. intérêt médico-légal (archivage !!!).

UNE BONNE TECHNIQUE DE COOMBS INDIRECT Concentration globulaire. Lavage des GR. Propreté de la verrerie. Précision de la technique Qualité de l’antiglobuline +++ un anti-Fya nécessite une bonne activité anti-IgG. bon nombre d’anti-Lea nécessite une bonne activité anti-C3d. En pratique : - Dépistage bonne antiglobuline polyvalente valide, conforme, soigneusement manipulée et correctement conservée. - Identification, surtout en cas de mélange d’Ac antiglobulines spécifiques.

LE BON MOMENT surtout chez le polytransfusé. en raison de la cinétique des Ac et de leur éventuelle absorption par les hématies transfusées en cas de transfusions répétées sur une période limitée.

SCHEMA DU BON MOMENT

LE BON MOMENT Meilleur schéma RAI avant toute transfusion Ac naturels, anti-publics, immuns (grossesse +++) Et 7 à 21 jours après la dernière d’une série +++

LIMITES DE LA RAI Ac anti-privés Liée à la constitution même du panel Ne constitue pas un réel danger pour le receveur Intérêt du test de compatibilité Certains demandent l’association des deux tests : RAI et test de compatibilité au laboratoire surcroît de coût sans beaucoup d’intérêt pour la sécurité immuno-hématologique des patients.

APPLICATION PRATIQUE RAI - Sécurité des receveurs - Mettre en évidence la présence éventuelle d’Ac anti- érythrocytes chez les femmes enceinte ou accouchées. En Tunisie - RAI indiquée avant les transfusions de CGR. - Seul le test de compatibilité est obligatoire (circulaire 49/05).

EXPERIENCE DU CRTS DE SFAX Evolution technique Nombre total de RAI, RAI positives et techniques utilisées 2000 - 2008 Année Nombre total RAI RAI + Technique Dépistage Identification 2000 252340 40 Tube (liss + papaine) Carte en gel liss 2001 2910 32 2002 3230 39 Microplaque (liss + papaine) 2003 3689 43 2004 4121 27 2005 4283 69 Carte en gel liss + microplaque papaine 2006 4126 91 2007 3534 55 2008 3474 56 Total 31890 452 D>E>K>C>Leb>Lea>Fya>S>Jka et HLA>c>M>P>e, public et k

EXPERIENCE DU CRTS DE SFAX 1/- Aplasies médullaires : 172 patients (102 hommes et 70 femmes). Entre janvier 1994 et septembre Quinze patients (8,72%) : 9 allo, soit 5,23% et 6 auto, soit 3,49%.

EXPERIENCE DU CRTS DE SFAX 2/- Drépanocytose : 54 patients drépanocytaires Entre Mars 1990 et Septembre 2009 Quatorze patients immunisés (25,92%) : 8 allo, 5 auto et 1 auto et allo.

EXPERIENCE DU CRTS DE SFAX 3/- SLP ou SMP : 404 patients. Entre Janvier 2000 et Août 2009. Dix sept patients (4,2 %) avaient une At.I et/ou une Al.I Quinze patients (3,72%) avaient un TCD positif lors du suivi (13 TCD IgG et 2 TCD IgG + C’).

EXPERIENCE DU CRTS DE SFAX 4/- THROMBOPATHIES CONSTITUTIONNELLES/ 28 parmi les 34 patients répertoriés. Entre 1994 et 2009. Sept patients (25%) ont développé une immunisation : 6 patients (21%) 9 alloanticorps un seul patient une autoimmunisation avec un TCD positif type IgG.

EXPERIENCE DU CRTS DE SFAX 5/- RAI CHEZ LES DONNEURS DE SANG 12 797 DDS Entre le 1er Mars et 31 Août 2009 Allo anticorps 3 DDS féminin, soit 0,02%, (0,17% des femmes). Auto anticorps de type IgM (agglutinines froides) 4 cas (0,03%).

EXPERIENCE DU CRTS DE SFAX 6/- ALLO-IMMUNISATION ET GROSSESSE 2093 femmes enceintes. Taux d’immunisation croissant avec le nombre de gestations : 1,08% pour les primigestes (Ac autres que l’anti-D) à 7,71% pour 4 gestations et plus.

CONCLUSION