Identification et caractérisation de facteurs de transcriptions appartenant à la famille des régulateurs de réponse de type B, impliqués dans la réponse à la sécheresse chez le peuplier par Inès DJEGHDIR Laboratoire de Biologie des Ligneux et des Grandes Cultures - UPRES EA 1207 LBLGC Directeur de Thèse: Dr. Sabine CARPIN, LBLGC Université d’Orléans Co-encadrement: Dr. Audrey OUDIN , BBV Université de Tours

Problématique de l’équipe d’accueil du LBLGC Equipe ARCHE 3 équipes dont l’équipe ARCHE: Arbres et Réponses aux Contraintes Hydriques et Environnementales Réponse des arbres aux contraintes environnementales: Différentes approches: Ecophysiologique Épigénétique Protéomique Signalisation Voie commune aux végétaux et aux levure: Phosphorelais Multiple peuplier sécheresse

Le phosphorelais multiple 3 partenaires: Récepteur ou Histidine-aspartate Kinase : HK Protéines de relais de phosphate ou Histidine Phosphotransfer protein : HPt Régulateurs de Réponse : RR N C H D HPt RR

Partenaires du phosphorelais multiple chez Populus sp. Cytokinines Contrainte osmotique 1 HK2 2 HK3 2 HK4 Paroi cellulaire N C H HK1 D N C H HK1 D N C H D N H C D Membrane plasmique 10 HPt 12 RR-B Enlever ckinines Décomposer phosphorelai en ajoutant les ref pour chacun des partenaires: hericourt et al 2013 HK1/HpT Bertheau et al 2012 RR et chefdor et al 2006 pour le HK1 Decrire le système et dire ce qui est connu…. Terminer sur les rr Noyau Chefdor et al., 2006, Bertheau et al., 2012, Héricourt et al., 2013

Partenaires du phosphorelais multiple chez Populus sp. Contrainte osmotique Paroi cellulaire N C H HK1 D N C H HK1 D Membrane plasmique P HPt HPt P P RR-B HPt Enlever ckinines Décomposer phosphorelai en ajoutant les ref pour chacun des partenaires: hericourt et al 2013 HK1/HpT Bertheau et al 2012 RR et chefdor et al 2006 pour le HK1 Decrire le système et dire ce qui est connu…. Terminer sur les rr Noyau Chefdor et al., 2006, Bertheau et al., 2012, Héricourt et al., 2013

Etat de l’Art au laboratoire Récepteur HK1: Protéine HK1 analogue de AHK1 d’Arabidopsis Récepteur HK1 isolé = osmosenseur Chefdor et al 2006

Etat de l’Art au laboratoire 3 HPt majoritaires impliquées dans l’osmosensing: HPt 2, 7 et 9 A gauche: après double hybride en levure, Activité béta gal mesurée pour HK1 CP face à chaque HPt (Hericourt et al 2013) A droite:

Etat de l’Art au laboratoire 8 RR-B isolés par double hyrbide et BiFC interagissent avec les 3 HPt précédentes:

Projet de recherche Objectifs : Identification des RR de type B spécifiquement impliqués dans la réponse à la contrainte hydrique Caractérisation de l’activité transcriptionnelle des RR de type B candidats Identification des partenaires des RR de type B pouvant constituer ensemble des complexes transcriptionnels

Projet de recherche Identification des RR de type B spécifiquement impliqués dans la réponse à la contrainte hydrique Technique: qPCR sur les 8 RR-B

Projet de recherche Caractérisation de l’activité transcriptionnelle des RR de type B candidats Technique: Gel retard ou EMSA 1 2

Projet de recherche Identification des partenaires des RR de type B pouvant constituer ensemble des complexes transcriptionnels Techniques: Double hybride après criblage de banque ou interaction ciblée 1 2