Assistance Publique Hôpitaux de Marseille LES GROUPES SANGUINS Dr Bernard LASSALE Assistance Publique Hôpitaux de Marseille

2. Détermination des groupes sanguins 3. Autres examens de laboratoire Sommaire 1. Généralités 1. 2. Détermination des groupes sanguins 2. Naturellement , le plan de notre exposé comporte ces 2 grands volets: - présentation de la coordination existante d ’une part - réflexion autour d ’une vigilance élargie à l ’ensemble des disciplines d ’autre part 3. Autres examens de laboratoire 3.

Rappels en Immunologie : notion d’antigène Généralités Rappels en Immunologie : notion d’antigène L’Antigène : entité biologique capable d’être reconnue et identifiée comme étrangère par le système immunitaire d’un organisme, de manière spécifique, en vue de son élimination. L’Immunogénicité : capacité d’un antigène à induire la fabrication d’anticorps dirigés contre lui. Plus un antigène est immunogène, plus le risque d’apparition d’anticorps est élevé.

Rappels en Immunologie : notion d’anticorps Généralités Rappels en Immunologie : notion d’anticorps L’Anticorps : - Présent dans le sérum, produit par les lymphocytes B, - Synthétisé en réponse à l’introduction d’un Antigène inconnu de l’organisme receveur - Capable de se lier spécifiquement à l’antigène. 5 types d’anticorps : Immunoglobulines G (70%), A (15%), M (10%), D (1%) et E (traces).

Rappels en Immunologie : notion d’anticorps Généralités Rappels en Immunologie : notion d’anticorps L’Anticorps : Naturels : existant en l’absence de stimulation antigènique, Immuns : induit par une stimulation d’un antigène étranger (transfusion, vaccination, infection, …) Allo-anticorps : réponse à une stimulation d’un Ag étranger Auto-anticorps : dérèglement du système immunitaire et production d’anticorps contre ses propres antigènes.

29 systèmes de groupes sanguins sont décrits Généralités L’Immuno Hématologie 29 systèmes de groupes sanguins sont décrits Groupes sanguins spécifiques des éléments figurés du sang : - des GR : Rhésus, Kell, Duffy, Kidd, MNS, P... - des Plaquettes : HPA - des Granuleux : PNA Groupes sanguins présents sur les cellules de l’organisme : - ABO - HLA

Généralités L’Immuno Hématologie

L’Immuno-Hématologie étudie : Généralités L’Immuno Hématologie L’Immuno-Hématologie étudie : - les Antigènes portés par les éléments figurés du sang, spécifiques du groupe sanguin. Ils sont induits génétiquement et sont immunogènes (transfusion ou grossesse). - les Anticorps, de type Ig G ou Ig M, peuvent être produits et engendreront des conflits immunologiques.

Généralités L’Immuno Hématologie L’existence des systèmes de groupes sanguins implique la reconnaissance et le respect de la compatibilité entre le donneur et le receveur La membrane du GR porte une mosaïque d’Antigènes Les anticorps agglutinent les hématies et peuvent activer le complément expliquant l’importance de certaines réactions.

Généralités L’Immuno Hématologie

2. Détermination des groupes sanguins 3. Autres examens de laboratoire Sommaire 1. Généralités 1. 2. Détermination des groupes sanguins 2. Naturellement , le plan de notre exposé comporte ces 2 grands volets: - présentation de la coordination existante d ’une part - réflexion autour d ’une vigilance élargie à l ’ensemble des disciplines d ’autre part 3. Autres examens de laboratoire 3.

Découvert par LANDSTEINER en 1900 G.S ABO Le système ABO Découvert par LANDSTEINER en 1900 3 gènes allèles permettent la synthèse d’enzymes spécifiques : A, B ou “ni A - ni B” (O) Les gènes A et B sont co-dominants et le gène O est récessif 4 phénotypes possibles : O, A, B et AB Les antigènes du système ABO se retrouvent à la surface de nombreux tissus (respect pour les greffes)

Les Antigènes Génétiquement induits = identité propre à l’hématie G.S ABO Les Antigènes Génétiquement induits = identité propre à l’hématie Deux Antigènes de nature glucidique : - A (N acetyl glucosamine) - B (galactose) L’enzyme spécifique permet d’accrocher le sucre A et/ou B à la substance H de la membrane des GR Par convention le groupe ABO est défini par les Antigènes présents sur le Globule Rouge

G.S ABO

G.S ABO Les Anticorps Présents dans le sérum après contact avec la flore intestinale = Apparition chez le nouveau-né entre 3 et 6 mois Toujours présents = Réguliers De classe Immunoglobuline M Agglutination à température ambiante

Groupe O : Absence d’Ag A et d’Ag B Globule Rouge Anticorps anti-A 45 % Anticorps anti-B

Groupe A Antigène A Globule Rouge Anticorps anti-B 42 %

Groupe B Antigène B Globule Rouge Anticorps anti-A 10 %

Absence d’anticorps anti - A et anti - B Groupe AB Antigène B Antigène A Globule Rouge Absence d’anticorps anti - A et anti - B 3 %

Tableau Récapitulatif G.S Tableau Récapitulatif Groupes Antigènes Anticorps A A anti-B B B anti-A O - anti-A, anti-B AB A et B -

Si un sujet de groupe A reçoit des Globules Rouges de groupe B Les anticorps naturels anti - B du receveur vont attaquer les GR de groupe B transfusés Si un sujet de groupe B reçoit des Globules Rouges de groupe A Les anticorps naturels anti - A du receveur vont attaquer les GR de groupe A transfusés

Détermination du groupe ABO Détermination du Groupe ABO standard G.S Détermination du groupe ABO Détermination du Groupe ABO standard Recherche des antigènes : Epreuve globulaire (Beth Vincent) détecte les Antigènes A et/ou B par des anticorps spécifiques Recherche des anticorps : Epreuve sérique (Simonin) détecte les anticorps circulants par la mise en présence de GR A et/ou B Nécessité absolue de concordance entre ces deux épreuves Effectuée par 2 techniciens et 2 lots de réactifs différents

Règles à respecter pour valider le groupe ABO G.S Détermination du groupe ABO Règles à respecter pour valider le groupe ABO - 2 déterminations sur 2 prélèvements sanguins différents - effectués si possible par 2 personnes différentes - résultat définitif du groupe si 2 déterminations identiques

Les règles de compatibilité ABO pour les CGR et Plaquettes G.S Les règles de compatibilité ABO pour les CGR et Plaquettes A O AB B

Les règles de compatibilité ABO pour les Plasmas G.S Les règles de compatibilité ABO pour les Plasmas A O AB B

Découvert par Landsteiner et Wiener en 1940 G.S Système RHESUS Découvert par Landsteiner et Wiener en 1940 L’antigène “ D ” : - présent = Rhésus positif « D » (85 %) - absent = Rhésus négatif « dd » (15 %) Les anticorps anti Rhésus proviennent d’une immunisation par Transfusion ou Grossesse (pas d’anticorps naturel).

Système RHESUS Se retrouve uniquement sur les GR G.S Système RHESUS Système RHESUS Se retrouve uniquement sur les GR 5 antigènes principaux : D , C , E , c , e Immunogènes et responsables d’anticorps irréguliers +++ 50 autres antigènes connus Cw, Cx, … Nouvelle nomenclature internationale : RH1 (D), RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c), RH5 (e)

Détermination du Phénotype RHESUS G.S Système RHESUS Détermination du Phénotype RHESUS Recherche des 5 antigènes : D, C , E , c , e 2 techniciens différents et 2 lots de réactifs différents 2 déterminations sur 2 prélèvements sanguins différents Effectués si possible par 2 personnes différentes Résultat définitif si les 2 déterminations sont identiques

Importance en Transfusion G.S Système RHESUS Importance en Transfusion Respecter systématiquement le D Respecter les autres antigènes C, E , c, e : * obligatoire pour : - les receveurs avec RAI positive, - les polytransfusés : thalassémiques, drépanocytaires, … - femmes jusqu’à la fin de la période de procréation * recommandée pour : - les enfants - l’urgence vitale

Importance en Transfusion G.S Système KELL Importance en Transfusion Système immunogène = anticorps fréquents Antigène principal : Kell = “K” - présent chez 9 % : sujets K + - absent chez 91 % : sujets K – ou kk Respecter systématiquement l’absence de K en transfusion Détermination identique et concomitante à celle du RHESUS

Important en Transfusion G.S Autres systèmes Important en Transfusion - Système Duffy (Fy a et Fy b) - Système Kidd (Jk a et Jk b) - Système MNS - Système Lewis ….

Principaux systèmes des GR G.S Principaux systèmes des GR En l’absence d’immunisation Antigènes Anticorps ABO A, B Présent Rh D, C, E, c, e (RH 1,2,3,4,5) Absent Kell K, k (KEL 1,2) Duffy Fya, Fyb (FY 1,2) Kidd Jka, Jkb (JK 1,2) MN S M, N, S, s (MNS 1,2,3,4)

2. Détermination des groupes sanguins 3. Autres examens de laboratoire Sommaire 1. Généralités 1. 2. Détermination des groupes sanguins 2. 3. Autres examens de laboratoire 3. Naturellement , le plan de notre exposé comporte ces 2 grands volets: - présentation de la coordination existante d ’une part - réflexion autour d ’une vigilance élargie à l ’ensemble des disciplines d ’autre part

Arrêté du 4 / 05 / 2002 relatif aux examens d’Immuno-Hématologie : Examens nécessaires avant transfusion Arrêté du 4 / 05 / 2002 relatif aux examens d’Immuno-Hématologie : Groupage ABO – D Phénotypage Rh (C, E, c, e) et Kell Recherche d’anticorps irréguliers (RAI)

La Recherche d’anticorps irréguliers (RAI) Examens La Recherche d’Anticorps Irréguliers La Recherche d’anticorps irréguliers (RAI) Principe : Détecte l’existence d’anticorps dirigés contre les groupes sanguins Mise en contact du sérum du patient avec des hématies tests de phénotypes connus pour Rhésus, Kell, Duffy, Kidd, MN, Ss … Cette recherche peut se dérouler en 2 étapes : Si le Dépistage est positif, réalisation d’une Identification d’anticorps

Les Anticorps Irréguliers apparaissent Examens La Recherche d’Anticorps Irréguliers Les Anticorps Irréguliers apparaissent après Transfusion et/ou Grossesse L’identification de l’anticorps nécessite la réalisation du phénotype étendu du patient et choisir le GRD ne portant pas l’antigène contre lequel est dirigé l’anticorps. Cas particulier : anti - E, anti - Lea chez la femme enceinte Validité : 72 heures

Phénotypage du patient dans le système DUFFY RAI Positive : Anticorps anti - Fy a Phénotypage du patient dans le système DUFFY Patient est Fy a + AUTO ANTICORPS Patient est Fy a - ALLO ANTICORPS

En pratique, la validité de la RAI peut être différente : Examens La Recherche d’Anticorps Irréguliers En pratique, la validité de la RAI peut être différente : 21 jours : Agence Française de Sécurité Sanitaire Produits de Santé (AFSSaPS) Nouveau-né RAI négative et Mère RAI négative RAI négative et pas de transfusion ni de grossesse depuis 6 mois 24 heures : (protocole APHM) Patient transfusé itératif, quelque soit le résultat de la RAI

Examens L’épreuve de compatibilité au laboratoire L’épreuve de compatibilité directe au laboratoire Consiste à mettre en présence le sérum du patient avec les hématies de la poche à transfuser. Est indiquée chez les patients présentant plusieurs anticorps (complément de la RAI). Validité : 72 heures

Délai de réalisation des examens d’I.H.R. Réalisation des examens Établissement Réalisation des examens NORD Sur site CONCEPTION EFS baille TIMONE SAINTE-MARGUERITE Prise en compte du site pour délai de réalisation des examens

Les délais de distribution peuvent être longs (examens + transport) Délai de réalisation des examens d’ IH . Examens Délai ABOD – RHK 1ère et 2ème détermination + RAI 1H Identification de la RAI Phénotypage du patient 30mn-2H * Épreuve de Compatibilité directe * Dépend de l’antigène recherché Patient ayant une RAI positive : Les délais de distribution peuvent être longs (examens + transport)