Etude de la régulation dans le système immunitaire associé à l’intestin à travers l’étude de la tolérance orale et des colites inflammatoires expérimentales

300 m2 HOMEOSTASIE ~150 g/24H protéines Pathogènes 1014 bactéries commensales 300 m2 Réponse immune contrôlée /tolérance Réponse immune proinflammatoire Protection LOCALE Protection SYSTEMIQUE HOMEOSTASIE

lymphoïdes /m intestin secrétions digestives Cellules dendritiques Immunité adaptative Immunité innée 1012 cellules lymphoïdes /m intestin Macrophages Polynucléaires barrière épithéliale mucus secrétions digestives péristaltisme Cellules dendritiques HOMEOSTASIE

Système lymphoide associé à l’intestin site effecteur : plasmocytes IgA T cells matures site inductif tissu lymphoïde organisé plaques de Peyer Ganglion mésentérique sang Bone Canal thoracique

300 m2 HOMEOSTASIE ~150 g/24H protéines Pathogènes 1014 bactéries commensales 300 m2 Réponse immune proinflammatoire Réponse immune contrôlée /tolérance Protection LOCALE Protection SYSTEMIQUE HOMEOSTASIE

Différentes voies d’absorption des protéines Lumière intestinale 1. Plaques de Peyer Cellules M Digestion des protéines: totale ou partielle Membrane basale 2. Enterocytes 1. Cellules M (PP) 3. Cellule Dendritique Lamina propria APC T CD4+ 2. Entérocytes (transcytose, exosomes?) 3. Cellules dendritiques ?

et peuvent stimuler in vitro la prolifération de LT TCR-OVA Chez la souris, 1 heure après administration orale d’OVA, les cellules dendritiques du chorion et des plaques de Peyer sont chargées en peptides immunogènes et peuvent stimuler in vitro la prolifération de LT TCR-OVA T anti-OVA CD4+ DO11.10 Chirdo et al Eur J Immunol 2005 35:1831

(Peptides, acides aminés) 2. Entérocytes Chambres d’Ussing Intest. Antigène intact Act. enzymatique (HRP) ou ELISA Métabolites ag (Peptides, acides aminés) Antigène radiomarqué 3H S M* Duodenum humain+ b-lactoglobuline/HRP PD mV R (Ohms/cm2) = PD / Isc Isc metabolites 3H-peptide S* M* 3H-peptide radio-HPLC

Voies d’endocytose des antigènes luminaux TJs Ag Intacte <10 % Voie directe IEC Peptides 40% Voie lysosomale Acides aminés 50% flux total: 3 µg/h.cm²  0.3 µg/h.cm² ag intact Les antigènes sont captés au niveau de la membrane apicale par endocytose non spécifique et partiellement dégradés dans l’entérocyte (endosomes-lysosome) avant d’être libérés au pôle basal de la cellule. Pas de diffusion paracellulaire en condition physiologique

Rôle des exosomes épithéliaux dans l’information du SI intestinal Cellules épithéliales Lumière intestinale Enterocyte Ganglion mésentérique T CD4+ Exosomes CD Exosomes (MHCII/peptides) versus peptide libre: présentation antigénique 1000 fois plus efficace Rôle des exosomes épithéliaux dans l’information du SI intestinal Cellule Antigènes Milieu extracellulaire Lysosome MIICs Endosomes précoces Endocytose tardifs Exosomes CMH II Exocytose Vésicules membranaires de 40-90 nm diamètre Cellules immunitaires

Pathologies digestives et entrée d’antigènes Lysosomal degradation médiée par récepteur Exemple de l’allergie : rôle de CD23 dans l’absorption de protéines alimentaires (allergènes) Expression anormale CD23 (FceRII) complexe CD23/allergène Allergène CD23 S S . . . . . . . Cl- Lysosomal degradation . . . . . . . . . . . . . (Perdue M et al) . . . . . . . . . . . . . . . S . . S Médiateurs degradation >97% Transport « protégé » d’allergène intact Activation des mastocytes

Entrée d’antigènes médiée par récepteurs +/- pathologies digestives B. Corthésy M Heyman R. Blumberg Plaques de Peyer enterocytes enterocytes Maladie coeliaque antigène CD71 S antigène S S sIgA sIgA S IgG . Récepteur ? . . . . . FcRn . Activation CD des PP Rôle physiologique? Lysosomal degradation . . . Rôle physiologique ? . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . S . . S dégradation >97% Transport « protégé » d’antigène intact Captation par les CD? Captation par les CD?

et peuvent stimuler in vitro la prolifération de LT TCR-OVA Chez la souris, 1 heure après administration orale d’OVA, les cellules dendritiques du chorion et des plaques de Peyer sont chargées en peptides immunogènes et peuvent stimuler in vitro la prolifération de LT TCR-OVA T anti-OVA CD4+ DO11.10 Chirdo et al Eur J Immunol 2005 35:1831

Les antigènes protéiques peuvent être captés par différents mécanismes par les CD intestinales du chorion Et des plaques de Peyer En situation normale, s’établit une tolérance immunitaire active

TOLERANCE ORALE : Historique 1970- 80: Tolérance orale vis-à-vis de larges doses de BSA,OVA,GR 1909 – 11: : Besredka puis Wells lait, œuf p.o.: prévention choc anaphylactique 1946- : Chase haptène (DNCB) p.o.: prévention hypersensibilité de contact 1990 : - Induction de tolérance dans des modèles expérimentaux de maladies autoimmunes et de rejet de greffe - Applications thérapeutiques (H. Weiner) ????

Réponses T périphériques TOLERANCE ORALE : DEFINITION ? Tolérance systémique Réponses T périphériques AC sériques (IgG/IgE) Inhibition des réponses T et B en périphérie Allergies 2-7% nourrissons 2% adultes Ag po Ag par voie systémique Tolérance locale ?? Inhibition des réponses T intramuqueuses proinflammatoires Maladie coeliaque 1/100 -1/300

Tolérance orale (Weiner HL, 2005 Immunol Rev) Administration orale d’antigènes GALT Faible dose (0,5-5 mg) Forte dose (50 mg) Déviation immune TH1 vs TH2 ? Induction de cellules T régulatrices Th3 (TGF), Tr1 (IL10), Treg ?(CD25+ CTLA4+… FoxP3+) LT CD8 (TGF, …)?, LIE T ?? Délétion (apoptose) Anergie Th1 > Th2 « SUPPRESSION » TRANSFERABLE ANERGIE/DELETION CLONALE

+++ MISE EN EVIDENCE EXPERIMENTALE DE LT REGULATEURS DANS LA TOLERANCE ORALE SYSTEMIQUE TT oral TT intrapéritonéal MBP+ CFA Encéphalomyélite autoimmune O +++ Ag contrôle MBP 0,5mg po X5 O ou Lymphocytes T régulateurs CD4 (ou CD8) O ou

NATURE DES LT REGULATEURS AU COURS DE LA TOLERANCE ORALE TT intrapéritonéal MBP+ CFA EAE TH1 IFN, TNF MBP po 0,5mg X5 +++ TH2 IL4/IL10 TGF ± IL4 / ± IL10 TH3 Chen et al Science 1994

« EFFET PROTECTEUR BYSTANDER » TT intrapéritonéal EAE MBP+ CFA MBP po 0,5mg X5 TGF +IL4/+IL10 TH3 PLP+ CFA TGF +IL4/+IL10 Chen et al Science 1994

Treg CD4+ CD25+ CTLA4… FoxP3 « anergiques » Treg « naturelles » Treg CD4+ CD25+ CTLA4… FoxP3 « anergiques » Treg « induites » 10% des CD4 sont CD25+ Contrôle des réponses autoimmunes et des réponses immunes souris/homme

Transfert in vivo In vitro Inhibent DTH Zhang et al J. Immunol. 2001 167: 4245 souris Tg OVA TCR 20mg/ml OVA LT CD4+CD25+ anti-OVA Transfert in vivo OVA 20mg /jour 14 In vitro Ne répondent pas à OVA (anergiques) Inhibent réponse des CD4+ CD25- à OVA Ont un effet inhibiteur bystander (BSA) Après immunisation parentérale fote +CFA augmentation rapide et transitoire ne correspondant pas à des régulatrices. Ressebment aux effets d’n eimmunis périphérique IV à faible dose cf khorsnut JI Souris BalbC OVA100 ug-CFA Jour1 Inhibent DTH

souris Tg OVA TCR PBS Anti-CD3 20mg/ml OVA CD4+CD25- IFNg IL2 TGFb+/- CD4+CD25- IFNg++ IL2++ CD4+CD25 + Comparaison des sécrétions de cytokines par les CD4+CD25+ et CD4+CD25-provenant de souris Tg ova stimulées par anti-CD3+ après ou non feeding par OVA IL10 TGFb++

Tolérance systémique versus tolérance locale ??

FOXP3 ??? PRODUCTION IN SITU DE CYTOKINES 6 À 48H APRES ADMINISTRATION ORALE D’OVALBUMINE CHEZ UNE SOURIS TRANSGENIQUE TCR-ANTI-OVA FOXP3 ??? Gonella et al J. Immunol. 1999 160: 4708

REGULATION INTRAMUQUEUSE HEL per os Inhibiteur de Cox2 Souris transgéniques portant un récepteur T anti-HEL PGE2 dans le chorion intestinal IL10 Intestin normal IL12, TNF Prolifération T Atrophie villositaire Newberry RD et al Nature Medicine 1999 8:900

Maladie coeliaque : entéropathie induite par un antigène alimentaire Facteurs environnementaux gluten = prolamines des céréales (blé, orge et seigle) inflammation Atrophie villositaire Facteurs génétiques HLA-DQ2 ou DQ8 Transformation maligne

Induction de la tolérance orale Site(s) ?? Mécanisme?

Système lymphoide associé à l’intestin site effecteur : plasmocytes IgA T cells matures site inductif tissu lymphoïde organisé plaques de Peyer Ganglion mésentérique sang Bone Canal thoracique

Suivi in vivo de la réponse à l’OVA Souris BALB/C gavage OVA 24 h LT CD4+naïfs TCR anti-OVA DO11.10 24 h, 48 h 72h I.V marqués au CFSE MLN PP rate Caractérisation phénotypique et fonctionelle des cellules portant le TCR anti-OVA (AC anti-TCR) F Hauet-Broere et al Eur J Immunol 2003, 33: 2801-10

Cinétique et localisation de la prolifération des LT CD4+ OVA spécifiques in vivo Sol saline Rate PP MLN 24 h 48 h 72h Division LT CD4+ spéc. OVA ds T.lymphoïdes drainant l’intestin Division tardive (après 72 h) LT CD4+ ds T.lymphoïdes périphériques Aucune Division LT CD4+ (tissus?) CONCLUSION : Prolifération des LT OVA spécifiques dans les PP précède celle des MLN

Caractérisation phénotypique des LT spécifiques de l’OVA lors de l’induction de la tolérance orale MLN Pas de division des LT tg OVA (100= expression basale du marqueur) 1 division des LT tg OVA CD 69: marqueur d’activation précoce CD 44: marqueur d’activation

Caractérisation phénotypique des L.T spécifiques de l’OVA Lors de l’induction de la tolérance orale MLN (idem pour PP, Rate) 47: recrutement au niveau de la muq. intestinale Surexpression de 47 dès la 1ère division Surexpression de CTL4 à la 7ème division (tardif)

augmentation de l’intensité de CD25 Caractérisation phénotypique des L.T spécifiques de l’OVA Lors de l’induction de la tolérance orale CD25 Hi augmentation de l’intensité de CD25 division in vivo mais proportion reste ~10% des CD4 Stimulation de T reg naturelles?

Acquisition d’une activité suppressive? Transfert de tolérance Gavage OVA/PBS OVA/Adjuvant, s.c Souris BALB/C 48 h 24 h rate, G.M, PP Souris Tg DO11.10 TCR OVA (LT activés par le gavage) 5 j I.V LT CD4+ DO11.10 KJ1-26 (5.104 à 5.105 C/ml ) 80% pureté Rappel OVA 24h Mesure de l’œdème auriculaire, DTH

3.Acquisition d’une activité suppressive? Tolérance orale induite chez les souris ayant reçu les KJ1-26+ d’un donneur recevant de l’OVA. Les cellules suppressives sont détectées dans les MLN et PP Hyp:Existence d’une fraction de LT CD4+ spécifiques devenus des cellules Treg?

3.Acquisition d’une activité suppressive? MLN Pool de LT CD4+ FACs Isolement de LT OVA KJ1-26+ se : CD25+ et CD25- Induction de tolérance orale par les LT OVA KJ1-26+ CD25+ et CD25-

Caractérisation phénotypique des L.T spécifiques de l’OVA Lors de l’induction de la tolérance orale gavage OVA/ BSA 5 jours Souris SCID DO11.10 (LT CD4+ portant exclusivement un TCR anti-OVA et donc ne contenant pas de LT reg FoxP3 à l’état naïf) Permet de démontrer l’induction de cellules T reg « induites » par l’antigène dans les gg mésentériques Coombes, J. L. et al. J. Exp. Med. 2007;204:1757-1764

Contrôle réponses ag exogènes Autoimmunité, allergies alimentaires Les LT régulateurs CD4+CD25+ FoxP3 Treg naturelles Treg induites Contrôle réponses ag exogènes Modified from Sakaguchi, 2003 Autoimmunité, allergies alimentaires

Induction de la tolérance orale Site(s) ?? Mécanisme? Rôle des cellules dendritiques intestinales

1 heure après administration orale d’OVA, les cellules dendritiques du chorion et des plaques de Peyer sont chargées en peptides immunogènes et peuvent stimuler in vitro la prolifération de LT TCR-OVA T anti-OVA CD4+ DO11.10 Chirdo et al Eur J Immunol 2005 35:1831

Effet tolérogène des CD isolées du chorion Mesure DTH, IFN Gavage OVA Isolement CD à 1H Inj coussinet plantaire J10 10µgOVA/CFA coussinet plantaire opposé J21 100µg OVA agrégée Chirdo et al Eur J Immunol 2005 35:1831

Induction tolérance orale: rôle des CD intestinales Venant du chorion ou des PP et migrant dans les GG Mésentériques plaques de Peyer ??? (ablation PP, souris sans PP) Contrôle réponses locales Phase effectrice Inhibition réponses périphériques Ganglion Mésentérique +++ Migration CD (CD103+?tolérogènes?) sang Bone Canal thoracique

Oral tolerance originates in the intestinal immune system and relies on antigen carriage by dendritic cells (in MLN) Blocage migration lymphos : pas d’effet Sur l’induction de la tolérance orale Ablation G. mésentériques : blocage tolérance orale T. Worbs et al. J. Exp. Med 2006, 203:519

Chez souris CCR7-/- ou CCR7ligands-/- absence de tolérance orale corrélée avec rétention des CD CD11c+ CD103+ dans le chorion Transfer 107 CFSE-labeled OTII cells Gavage 100 mg J1 Pas de prolifération LT CD4 OVA dans GM des CCR7(L)-/- chez CCR7-/- Rétention des CD CD11c CD103+ dans la LP Pas de migration dans Gmes Pas de suppression DTH chez CCR7-/- T. Worbs et al. J. Exp. Med 2006; 203:519

Induction par les CD CD103+>> CD103- Induction tolérance orale: conversion préférentielle des LT CD4+ en LT CD4+ reg FoxP3 dans le GALT par les CD intestinales plaques de Peyer Contrôle réponses locales Phase effectrice (Inhibition réponses périphériques) Ganglion Mésentérique +++ Induction par les CD CD103+>> CD103- de LT CD4+ FoxP3+ reg sang Y. Belkaid et al RJ Noelle et al F Powrie et al J. Exp. Med 07/2007 SG Kang et al JI 2007 Cheroutre et al Science 07/2007 Bone

induction de LT reg spécifiques de l’OVA par les CD intestinales CD103+ in vitro: LT de SCID DO11.10 (CD4 TCR antiOVA) + CD CD103+/CD103- +OVA (0.2µg/ml) % CD103+ parmi les CD CD11c high Induction de LT FoxP3 (anti-OVA) Par les CD 103+ Coombes, J. L. et al. J. Exp. Med. 2007;204:1757-1764

dépend en partie de leur production de TGFbeta (chez la souris) L’induction de LT reg spécifiques de l’OVA par les CD intestinales CD103+ dépend en partie de leur production de TGFbeta (chez la souris) Induction in vitro LTFoxP3 par CD CD103+ +OVA Bloquée par AC anti–TGFb CD CD103+ produisent plus *TGFb latent *activateur plasminogène (activateur TGFbeta) Addition TGF-b exogène Augmente l’effet inducteur des CD CD103+ mais peu l’effet des CD CD103- Coombes, J. L. et al. J. Exp. Med. 2007;204:1757-1764

Ganglions mésentériques Récepteurs Homing Intestinal LT matures effecteurs Plasmocytes IgA Plaques de Peyer TECK/CCL25 Endothélium Blastes IgA Blastes T MadCAM1 Ganglions mésentériques Canal thoracique intégrine 47/ CCR9 Récepteurs Homing Intestinal PP-DC MLN-DC CD103 + (intégrine E) Ac. Rétinoique

dépend de leur production d’acide rétinoïque L’induction de LT reg spécifiques de l’OVA par les CD intestinales CD103+ dépend de leur production d’acide rétinoïque L’acide rétinoique (+TGFb) permet aux CD CD103- d’induire les T reg FoxP3 Transforme des CD spléniques… Chez l’homme l’acide rétinoique semble induire les LT reg FoxP3 En l’absence de TGFb Les CD CD103+ expriment l’enzyme qui transforme la vitA en acide rétinoïque Coombes, J. L. et al. J. Exp. Med. 2007;204:1757-1764

Induction tolérance orale: conversion préférentielle des LT CD4+ en LT CD4+ reg FoxP3 dans le GALT par les CD intestinales plaques de Peyer Contrôle réponses locales Phase effectrice (Inhibition réponses périphériques) Ganglion Mésentérique +++ Induction par les CD CD103+>> CD103- De LT CD4+ FoxP3+ reg avec récepteurs de homing intestinal Acide rétinoïque et TGFbeta (souris) sang Y. Belkaid et al RJ Noelle et al F Powrie et al J. Exp. Med 07/2007 SG Kang et al JI 2007 Cheroutre et al Science 07/2007 Bone

En situation basale, les entérocytes conditionnent les CD résidentes en CD tolérogènes (CD103+) Iliev, I. D. et al. J. Exp. Med. 2007;204:2253-2257 Vitamine A Acide rétinoïque? B.Commensales? Flore et allergie alimentaire?

Role proinflammatoire des CD CD103- CD CD103-produisent plus de cytokines proinflammatoires que les CD CD103+ en réponse aux « signaux dangers » IL-23 CD CD103-expriment plus Les TLR et T-bet T-bet

Importance des LT FoxP3 dans la tolérance orale Chez l’homme? -IPEX: allergies alimentaires -Maladie coeliaque ???

Maladie coeliaque : entéropathie induite par un antigène alimentaire Facteurs environnementaux gluten = prolamines des céréales (blé, orge et seigle) inflammation Atrophie villositaire Facteurs génétiques HLA-DQ2 ou DQ8 Transformation maligne

BenAhmed et al Gastroenterology 2007 Adaptive response gliadin Innate response peptide 31-49 IL-15 33 mer IEL ? MHC Ia MHC Ib NKR APC LT reg FoxP3 ? APC IFN-g _ DQ2/8 IL-15 _ CD4+ effector Tcell TGF- (Smad3) BenAhmed et al Gastroenterology 2007

300 m2 HOMEOSTASIE ~150 g/24H protéines Pathogènes 1014 bactéries commensales 300 m2 Réponse immune contrôlée /tolérance Réponse immune proinflammatoire Protection LOCALE Protection SYSTEMIQUE HOMEOSTASIE

Les bactéries commensales peuvent entrer dans le système immunitaire associées à l’intestin Reinecker Science 2005 Rescigno NatImmunol 2001 McPherson Science 2004

2- Initiation de la réponse immune adaptative MacPherson Science 2004 1- Elimination rapide des bactéries commensales par les cellules phagocytaires de l’hôte dans les PP et GMes 2- Initiation de la réponse immune adaptative

1- LT proinflammatoires TH1>TH2 Immunité adaptative et Homéostasie intestinale LymphocytesT IgA 1- LT proinflammatoires TH1>TH2 TH17 2-LT régulateurs Tr1? TH3? CD4+CD25+FoxP3 TGF/IL-10

1- LT proinflammatoires TH1 La colonisation bactérienne induit simultanément dans l’iléon 1- LT proinflammatoires TH1 2-LT régulateurs ax cv

TH17 IL6,TGF +/-IL-23

MODELES EXPERIMENTAUX DE COLITES INFLAMMATOIRES Altérations de la barrière épithéliale Inactivation E-cadhérine /kératine-8/Mdr-1 Intestinal trefoil peptide destruction chimique épithélium: DSS Modifications du système immunitaire Stimulation excessive des LT effecteurs stat4tg/TNFARE/Gi2-/-/IL7Tg/….. Injection IR TNBS/ Oxazolone Défaut de régulation KO: IL2/IL2R, IL10, TGF Absence de LT régulateurs (IPEX, modèles murins) Modèles spontanés: C3H/HeJBIR mice

COLITES INFLAMMATOIRES EXPERIMENTALES = MODELES DE REGULATION DE LA REPONSE IMMUNE INTESTINALE A LA FLORE INTESTINALE déclenchées par la présence d ’une flore intestinale et/ou associées à une rupture de la tolérance vis-à-vis de la flore Lymphocytes T pathogènes proinflammatoires TH1>TH2/TH17 TH1 dirigés contre la flore caecale Activation d’une cascade de signalisation Impliquant en particulier la voie NFkB Lymphocytes régulateurs protecteurs

PAS DE COLITE COLITE ++++ cytokines délétères LT CD4+ CD45RB high + LT CD4+ CD45RB low LT CD4+ CD45RB high i.v. i.v. Souris SCID Souris SCID/ H PAS DE COLITE LT régulateurs CD25+ CTLA4+FoxP3 présents dans les Gg mes (LP?) Effets bloqués par : Anti-TGF,anti-CTLA4 Médiés par T reg TGF- -/- Si T effectrices répondent au TGF  COLITE ++++ LT délétères (TH1, TH17?) TH1 spécifiques de la flore cytokines délétères IFN, TNF, IL17? d’après F. Powrie

LT régulateurs CD25+ CTLA4+ (FoxP3??) migrant dans l’intestin LT CD4+ CD45RB low Souris 129VEv/Rag-/- Infection orale H Hepaticus Souris SCID PAS DE COLITE LT régulateurs CD25+ CTLA4+ (FoxP3??) migrant dans l’intestin Spécificité ? T reg naturelles COLITE par ACTVATION IMMUNITE INNEE IL-23 >>> IL-12 Relais IL-17 d’après F. Powrie

Induction de la tolérance aux bactéries Site(s) ?? Mécanisme? Rôle des cellules dendritiques intestinales

Induction tolérance flore: conversion de LT CD4+ en LT CD4+ reg FoxP3 dans le GALT par les CD intestinales plaques de Peyer Inhibition des réponses inflammatoires intramuqueuses à la flore Ganglion Mésentérique +++ Induction par les CD CD103+>> CD103- De LT CD4+ FoxP3+ reg Et inhibition de la génération de TH17 Acide rétinoïque et TGFbeta sang Bone Cheroutre et al Science 07/2007

de cytokines proinflammatoires que les CD CD103+ en réponse CD CD103-produisent plus de cytokines proinflammatoires que les CD CD103+ en réponse aux « signaux dangers » IL-23 CD CD103-expriment plus Les TLR et T-bet T-bet

INDUCTION RECIPROQUE DE LA DIFFERENCIATION TH17 et Treg PAR L’ACIDE RETINOIQUE LT anti-OVA+ OVA + MLN DC IL17+/- induit par inhibiteur Ac rétinoique +Spleen DC IL17++ bloqué par Ac rétinoique

INDUCTION RECIPROQUE DE LA DIFFERENCIATION TH17 et Treg PAR L’ACIDE RETINOIQUE LT anti-OVA+ OVA + MLN DC FoxP3++ (α4β7+CCR9+) bloqué par inhibiteur Ac rétinoique +Spleen DC FoxP3 ~0 induit par Ac rétinoique

TGFb et RA sont capables in vitro de transformer des LT CD4 en LT régulateurs (en présence d’anti-CD3) qui peuvent inhiber la colite induite par les CD45RB high non traitées Colite ++ Colite 0 T CD4+ +antiCD3 FoxP3 IL-17 Stimulation primaire + cytokines 2 jours de repos + IL2 Restimulation par anti-CD3

En situation basale, les entérocytes conditionnent les CD résidentes en CD tolérogènes (CD103+) Iliev, I. D. et al. J. Exp. Med. 2007;204:2253-2257 Vitamine A Acide rétinoïque? B.Commensales? Flore et allergie alimentaire?

1- LT proinflammatoires TH1>TH2 2-LT régulateurs CD4+FoxP3 Immunité adaptative et Homéostasie intestinale Signaux dangers /Récepteurs Immunité innée IL-12,23 IL-15 IL-1,IL-6 TLR, NOD? TGF, AR TGF IL10 1- LT proinflammatoires TH1>TH2 TH17 2-LT régulateurs CD4+FoxP3 TGF/IL-10

Rôle de LT régulateurs dans les maladies inflammatoires chez l’homme Syndrome IPEX : anomalie primitive des Treg (inflammation Grêle> colon Allergies alimentaires) Crohn et RCH : pas d’anomalie primitive documentée Anomalie de la barrière épithéliale: probable dans Crohn Anomalie de régulation des Macrophages /DC??? TH17 IL6,TGF +IL-23 IL-23, IL-17

300 m2 HOMEOSTASIE ~150 g/24H protéines Pathogènes 1014 bactéries commensales 300 m2 Réponse immune contrôlée /tolérance Réponse immune proinflammatoire Protection LOCALE Protection SYSTEMIQUE HOMEOSTASIE

Qq hypothèses dans la M. de Crohn selon W. Strober gènes autophagie

LT CD4+ CD45RB low venant d’une souris infectée par HH LT CD4 IL10-/- LT CD4+ CD45RB low venant d’une souris infectée par HH LT CD4+ de souris IL-10-/- Infectées par H. Hepaticus i.v. i.v. Souris Rag B6 Souris RAG.B6 PAS DE COLITE LT régulateurs CD25+ ou CD25- Spécifiques de HH, synthétisant de l’IL-10 Effets nécessitent IL-10 Pas TGFbeta + 0: pas de colite + HH: COLITE ++++ Production IFN Rôle IL17/IL23 d’après MC Kullberg