Diagnostic biologique d’une leptospirose

La leptospirose La leptospirose a une expression clinique variable, de la forme bénigne pseudo-grippale à l'atteinte multiviscérale sévère avec hyperthermie, atteinte hépatique, rénale et syndrome hémorragique, nécessitant une prise en charge en réanimation. Formes cliniques fréquemment observées: atteinte neuro-méningée, atteinte pulmonaire.

Diagnostic biologique Culture avec le milieu de Ellinghausen-Mac Cullough-Johnson-Harris (29°C-2 mois). Amplification génique: sang (10 premiers jours), LCR (J5-J15), urines (J15-J25). Nombreuses cibles (rrs, lipL32, hap1). Sérodiagnostic: Macroagglutination (TR): VPP 33%, VPN 95%, Fx-neg 45% ELISA: Ag non standardisé, sensibilité médiocre Micro-agglutination lyse  CNR

Critères de positivité d’une leptospirose Tableau clinique évocateur + un des critères biologiques suivants : - isolement d'une souche pathogène de leptospire; - détection d'ADN de leptospire dans un produit biologique; - existence d'un titre supérieur à 100 en MAT vis-à-vis d'un ou plusieurs antigènes pathogènes et une augmentation du titre d’un facteur 4 entre deux sérums précoce et tardif.

Activité du CNR Leptospire Sérologie (ELISA avec antigène « maison »): > 4.500/an MAT - 20 antigènes - intérêt dans la surveillance épidémiologique - détermination des sérogroupes infectants

Répartition des actes pour 2012 (métropole+ DOM-TOM) NABM - Leptospirose Chapitre 6 - Microbiologie – sous-chapitre 6-03 -Actes isolés - examens divers bactériologie : la rubrique spirochètes est supprimée, notamment les actes 0246, 0247,0248 et 0249. Répartition des actes pour 2012 (métropole+ DOM-TOM) Actes 0246 (ex. microscopique) 662 Actes 0247 (culture) 103 Actes 0248 (inocul. animal) 2 Actes 0249 (sérotypage/souche) 8

Répartition des actes pour 2012 NABM - Leptospirose Chapitre 7 Immunologie – sous-chapitre 6-04 sérologie bactérienne: la rubrique Leptospirose est supprimée, notamment les actes 1245 et 1312. Réserver le test par micro-agglutination (MAT) (positif à partir du 8ème - 10ème jour de la maladie) au CNR. Répartition des actes pour 2012 (métropole+ DROM) Actes 1245 (sérodiagnostic) 3.394 actes Actes 1312 (micro-agglutination lyse) 2.234 actes

Chapitre 19 Microbiologie médicale par pathologie Leptospirose Des renseignements cliniques et chronologiques (date de début de la maladie; date du prélèvement) sont indispensables pour la réalisation et l’interprétation de l’examen . Privilégier la recherche par amplification génique en temps réel, avant toute antibiothérapie, selon une chronologie bien précise : - dans le sang : dans les 10 premiers jours, - dans le LCR : entre le 5ème et le 15ème jour, - dans les urines : entre le 15ème et le 25ème jour. En cas d’amplification génique en temps réel non disponible, négative ou non adaptée à la période, il convient d’entreprendre une recherche sérologique à partir du 7ème jour.

Chapitre 19 Microbiologie médicale par pathologie Acte XXXX Détection de l’ADN du genre Leptospira par amplification génique en temps réel. Prélèvements : sang, LCR et urines, avant toute antibiothérapie, selon la chronologie précisée plus haut Une seule cotation de l’acte XXXX par patient. Acte YYYY Recherche des IgM de Leptospira par EIA. A réaliser uniquement en phase immune (détection des IgM 7 jours après le début des signes cliniques pendant 2-3 mois).