Biochimie séminale, recherche d ’anticorps antispermatozoïdes et autres examens...

Examens complémentaires en spermiologie Utilité: préciser la (les) causes des anomalies constatées au spermogramme. Aider à définir les possibilités thérapeutiques Rappel: interrogatoire: antécédents personnels, familiaux; profession; mode de vie; examen clinique: général, testicules, déférents.

Examens courants test de sélection-survie recherche d ’anticorps anti-spermatozoïdes recherche de leucocytes spermoculture

Test de sélection-survie Sur gradient de densité Par migration ascendante Indications: AMP envisagée Résultats: nombre de spermatozoïdes mobiles sélectionnés % spermatozoïdes mobiles survie: % spermatozoïdes mobiles après 24 h.

Test de sélection-survie Informations apportées: pratiques: choix des techniques d ’AMP diagnostiques: aptitude des spermatozoïdes à migrer et à la survie

Biochimie séminale Fructose (vésicules séminales) Citrate (prostate) Zinc (prostate) Phosphatases acides (prostate) Carnitine (épididyme) Alpha 1-4 glucosidase (épididyme)

Biochimie séminale Valeurs normales: Fructose: > 20 mmol / éjaculat Citrate : > 60 mmol / éjaculat Zinc : > 3 mmol / éjaculat Phosphatases acides : > 1230 UI / éjaculat Carnitine : > 650 mmol / éjaculat Alpha 1-4 glucosidase: > 60 mU / éjaculat

Biochimie séminale Indications: Volume faible Azoospermie Asthénozoospermie secondaire

Biochimie séminale Informations apportées: Obstruction Agénésie des déférents, des vésicules séminales Pathologie prostatique, vésiculaire Atteinte de la fonction épididymaire

Recherche d ’anticorps anti-spermatozoïdes Rappel: les spermatozoïdes sont auto-immunogènes: Apparition tardive des antigènes propres aux spermatozoïdes au cours du développement; Séquestration (barrière hémato-testiculaire) Rupture de l ’état de tolérance immune: Réabsorption anormale des spermatozoïdes en cas d ’obstruction ou d ’inflammation réponse croisée contre des antigènes bactériens? Défaillance de l ’homéostasie immunitaire?

Conséquences de la fixation d ’anticorps sur les spermatozoïdes auto-agglutination pénétration et progression dans le mucus cervical diminuées; mobilité sur place. fixation à la zone pellucide diminuée. Les conséquences dépendent: du % de spermatozoïdes porteurs d ’AC de la classe et de la localisation des AC

Détection des AC anti-spermatozoïdes AC fixés : 2 principales techniques MAR test: agglutination mixte spermatozoïdes-particules latex sur sperme entier IgG -IgA ou spécifique. Test imunobilles: sur spermatozoïdes lavés IgG ou Ig A

Détection des AC anti-spermatozoïdes Anticorps libres: Sérum Liquide séminal Principe: incubation de spermatozoïdes témoins lavés avec le sérum ou le LS à étudier, puis test IB. Dilutions croissantes; on retient la dernière dilution pour laquelle au moins 50% des spermatozoïdes ont des AC fixés

Autres examens courants Spermoculture bactériologie standard chlamydiae mycoplasmes recherche de leucocytes peroxydase elastase (immunocytochimie)

Examens moins courants Analyse du mouvement spermatique Microscopie électronique Tests de qualité nucléaire maturité nucléaire: bleu d ’aniline résistance à la dénaturation: acridine orange apoptose- fragmentation ADN Adduits Tests fonctionnels: fixation à la ZP capacitation