Lycée Professionnel Pierre DORIOLE, LA COLORATION DE GRAM Lycée Professionnel Pierre DORIOLE, LA ROCHELLE

SITUATIONS PROFESSIONNELLES « Aide soignante dans un centre hospitalier, vous assurez les soins d’hygiène de Mme Durand, 88 ans, hospitalisée dans le service de gériatrie. Mme Durand a de la fièvre, ses urines ont été prélevées et envoyées au laboratoire de bactériologie pour identifier le ou les germes responsables d’une éventuelle infection. Vous expliquez à une élève de BEP Carrières Sanitaires et Sociales en stage dans le service, en quoi consiste une coloration de Gram et l’intérêt de cette coloration. » « Agent Technique d’Alimentation dans une entreprise agro-alimentaire, vous assurez l’hygiène des produits et des matériels. Des prélèvements réguliers sont effectués et envoyés à un laboratoire d’analyse pour vérifier l’absence de biocontaminations. Vous expliquez à une élève de BEP Bioservices en stage dans votre structure, en quoi consiste une coloration de Gram et l’intérêt de cette coloration. » SITUATIONS PROFESSIONNELLES Diapositive suivante , cliquer 

La coloration de Gram : Dans quels buts ? Pour identifier et classer les bactéries selon deux critères : - Leur affinité pour les colorants : bactéries gram + et gram - - Leur forme La coloration de Gram : Dans quels buts ? Pour mettre en évidence et identifier le ou les germes bactériens responsables d’une infection/contamination L’identification permet d’ orienter ou de confirmer un diagnostic de contamination, afin d’adapter au mieux un traitement efficace  

La coloration de GRam : Comment ?

LA REALISATION D'UN FROTTIS EXPERIENCE LA REALISATION D'UN FROTTIS DE YAOURT

Cette opération se réalise dans la zone stérile d’un bec bunsen Anse de platine stérilisée par chauffage au rouge à la flamme du bec bunsen  

avec l’anse de platine refroidie Prélèvement de l’échantillon Prélever une goutte de yaourt avec l’anse de platine refroidie  

Etalement à l’anse de platine: L’étalement doit être aussi mince que possible Bac à coloration Porte Lame Si l’échantillon est épais: le diluer dans une goutte d’eau stérile Lame propre et dégraissée Déposer la goutte de yaourt dans la goutte d’eau avec un mouvement de rotation  

Stériliser l’anse de platine À la flamme du bec bunsen  

Séchage du frottis Laisser sécher la lame en la maintenant dans l’air chaud de la veilleuse du bec bunsen Eteindre le bec bunsen !  

Recouvrir la lame d’alcool à 95° Fixation du frottis à l’alcool Alcool Recouvrir la lame d’alcool à 95° pendant 5 minutes Egoutter la lame Laisser évaporer l’alcool résiduel.  

2ème possibilité: Fixation du frottis par la chaleur Passer rapidement la face de la lame, frottis séché sur le dessus, en écrasant la flamme 3 fois  