Étude de micro-organismes : Bactéries, levures, protistes
1. Suivi de la croissance d’une population de Levures Comptage des levures La grille accueille un volume de 0,81µL, chaque case a un volume de 0,01µL. Une lame KOVA
Levure 1 case = 0,01µL Après agitation, prélever une goutte de la suspension de levure, la déposer dans l’espace destiné à cet effet. Au microscope (grossissement x 100), compter les levures présentes dans plusieurs carrés. Calculer le nombre moyen de levures par carré. Pour les levures chevauchant deux carrés, on ne compte que celles disposées sur les côtés inférieurs et droits des carrés afin de ne pas les dénombrer deux fois. Ramener ce résultat au nombre de levures par µL ou mL en tenant compte du volume d’une case de la cellule utilisée.
nombre de cellules concentration (g/L) 8,1 0,1 14,6 0,2 0,3 22,4 0,4 39,3 0,5 49,4 0,6 70,0 0,7 68,8 0,8 80,7 0,9 89,5 1
Suivi de la croissance d'une population de levure par colorimétrie Transmittance = I/IO Absorbance = -logT La relation de Beer-Lambert décrit que, à une longueur d’onde λ donnée, l’absorbance d’une solution est proportionnelle à la concentration des espèces de la solution, et à la longueur du trajet optique (distance sur laquelle la lumière traverse la solution).
2. Diversité des microorganismes Cellules de levure Saccharomyces cerevisiae Microscope optique, état frais, x 1000 Schéma d’une cellule de Levure La Levure, Saccharomyces cerevisiae, est un eucaryote unicellulaire.
Manipuler en conditions stériles L’anse PASTEUR ou oëse ou fil ni-chrome La pipette Pasteur
Coloration rose Coloration bleu foncé
Observation des micro-organismes d'une « infusion » de débris végétaux Extrémité antérieure Vacuole pulsatile ectoplasme cils cuticule trichocyste Endoplasme (organites de la nutrition) cinétie vestibule macronucléus membranelle micronucléus péristome Cytostome = bouche gastriole Région des cytoproctes Vacuole pulsatile Vacuole digestive Une paramécie (longueur 500µm) Extrémité postérieure
Divers autres ciliés Stylonichie Colpode Vorticelle
Un rhizopode, une amibe