On recueille une dizaine d’échantillons dans des tubes Falcons ÉCHANTILLONAGE LAC ST-JOSEPH LAC ST-CHARLES On recueille une dizaine d’échantillons dans des tubes Falcons
Première méthode utilisée
INOCULATION Filtre millipore de 0.44 um Échantillon d’eau On filtre les échantillons à l’aide d’un système de filtration sous vide
INOCULATION On referme avec un bouchon de mousse (permet les échanges gazeux) On retire le filtre 0.44um après la filtration On insère dans un erlenmeyer contenant 50ml de milieu BG11* et/ou BG11o* Incubation sur une plaque agitatrice, avec une lampe fluorescente (12h/12h), à une température de 22°C
ISOLEMENT Lorsqu’il y a apparence de croissance* On retire le filtre On le place sur un Pétri BG11 Incubation sous une lampe fluorescente (12h/12h) à une température de 22°C *X - vert forêt : algues V - vert pomme : cyanobactéries
On attend qu’une croissance verte prenne le dessus ISOLEMENT On attend qu’une croissance verte prenne le dessus On prend une portion de croissance, et on procède à une striation en 3 étapes Ces deux méthodes d’isolement sont employés en tandem, pour évaluer celle qui fonctionnera le mieux On prend une portion de croissance, et on procède à l’isolement par phototactisme
Deuxième méthode utilisée
On transfert directement dans 50 ml de milieu BG11 INOCULATION On incube sur une plaque agitatrice, sous une lampe fluorescente (12h/12h), à une température de 22oC On prend 1ml du dessus de la colonne de Winogradsky (qui est susceptible de contenir des cyanobactéries) On transfert directement dans 50 ml de milieu BG11
ISOLEMENT On passe directement aux méthodes d’isolement sur milieu solide Lorsqu’on observe une croissance suffisante dans l’erlenmeyer (coloration verte)