Thérapie Génique, aspects techniques

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1 Thérapie Génique, aspects techniques
Pages Thérapie génique Les vecteurs Les vecteurs viraux Les vecteurs non-viraux Les méthodes physiques

2 Thérapie Génique, aspects techniques
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3 Les vecteurs viraux Page 35 = virus transformés → infection, se reproduire gène thérapeutique. 2 groupes: Rétrovirus ARN Adénovirus ADN

4 Les vecteurs viraux Rétrovirus Adénovirus

5 Thérapie Génique, aspects techniques
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6 Les vecteurs non-viraux
Page 36-37 2 groupes ADN plasmidique (ADN nu) Liposomes = vecteurs synthétiques ADN complexé à des lipides cationiques ADN condensé par des polymères cationiques

7 Les vecteurs non-viraux
Page 37 Avantages: ↓ immunogénicité → Administrations répétées Pas de limite théorique pour la taille du gène thérapeutique.

8 Les vecteurs non-viraux
Page 36 L’ADN nu: Plasmides c gène thérapeutique → tissu cible → cellules ?

9 Les vecteurs non-viraux
Page 37 L’ADN nu: Avantages: Facilité et faible coût de production, de stockage et de contrôle-qualité Faible immunogénicité

10 Les vecteurs non-viraux
Page 37 L’ADN nu: Inconvénients: Très courte durée d’expression dans les tissus. Transduction inefficace in vitro et in vivo Spécificité !!!

11 Les vecteurs non-viraux
Page 37 L’ADN nu: Traitements: Problèmes cardiovasculaires (angiogenèse) Vaccin (portion d’un gène d’un parasite (malaria))

12 Les vecteurs non-viraux
Page 37 Les liposomes: C ADN (négatif) complexé à des lipides ou des polymères (positif)

13 Les vecteurs non-viraux
Protéines virales Les liposomes Endocytose

14 Les vecteurs non-viraux
Page 37 Les liposomes: Avantages: Facilité de production, de stockage et de contrôle-qualité Faible immunogénicité Transfection efficace in vitro Pas d’effets secondaires !!!

15 Les vecteurs non-viraux
Page 37 Les liposomes: Inconvénients: Faible taux d’insertion de l’ADN thérapeutique Transfection inefficace in vivo Très courte durée d’expression

16 Thérapie Génique, aspects techniques
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17 Les méthodes physiques
Page 37 L’électroporation: ADN plasmidique → tissu cible Membrane cellulaire poreuse 2 plaques d’acier = électrodes Impulsions électriques répétées

18 Les méthodes physiques
Page 38 L’électroporation:

19 Les méthodes physiques
Page 37 L’électroporation: Avantage: Transduction améliorée in vitro dans les Ȼ de la peau et tumorales chez la souris.

20 Les méthodes physiques
Page 37 L’électroporation: Inconvénients: Cellules non viables à l’issue de cette méthode Un seul essai clinique

21 Thérapie Génique Rétrospective - applications:
Page 38 Rétrospective - applications: 1990: immunodéficience congénitale (ADA) → leucémie chez certains patients. 1999: DICS-X (« enfants bulles ») → succès.

22 Thérapie génique DICS-X

23 Thérapie génique DICS-X Elaboration de vecteurs efficaces et sûrs

24 Thérapie Génique Administration ex vivo ou in vitro d’un vecteur
Page 34 Administration ex vivo ou in vitro d’un vecteur Utilisée pour les Ȼ faciles à prélever Ȼ sanguines DICS-X

25 Thérapie Génique Administration in situ d’un vecteur
Page 34 / 38 Administration in situ d’un vecteur Au sein du tissu cible directement Mucoviscidose (aérosol → bronches) Tumeur du cerveau Dystrophie musculaire (muscle) Gangrène sénile