TRANSFUSION Groupes sanguins érythrocytaires

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1 TRANSFUSION Groupes sanguins érythrocytaires
(système ABO, système RH et système KELL Les examens en immuno-hématologie

2 1900 Landsteiner découvre le 1er système des groupes sanguins : le système ABO
1940 valide le système Rhésus 1952 Dausset met en évidence le système HLA des GB

3 Les groupes sanguins érythrocytaires
Les groupes sanguins érythrocytaires sont déterminés pas des antigènes présents (ou non) à la surface des globules rouges Certains antigènes sont situés dans la Mb lipidique (Rhésus), d’autres dans les glycolipides sur la face externe de la Mb du GR (ABO)

4 Les groupes sanguins érythrocytaires
Génétiquement induits et déterminés indépendants les uns des autres Antigènes allotypiques cad caractères propres à un groupe d’individus dans une espèce donnée 29 systèmes de groupes sanguins liés au globule rouge Le plus connu et le plus ancien : le système ABO, le plus important du fait de son implication en transfusion sanguine et pour la transplantation d’organe

5 Système Numéro Symbole Localisation du gène
Gène(s) Localisation du gène ABO 001 9q34.2 MNS 002 GYPA, GYPB, GYPE 4q28.2-q31.1 P 003 P1 22q11.2-qter Rh 004 RH RHD, RHCE 1q36.13-q34.3 Lutheran 005 LU 19q13.2 Kell 006 KEL 7q33 Lewis 007 LE FUT3 19q13.3 Duffy 008 FY DARC 1q22-q23 Kidd 009 JK SLC14A1 18q11-q12 Diego 010 DI SLC4A1 17q21-q22 Yt 011 YT ACHE 7q22.1 Xg 012 XG Xp22.32 Scianna 013 SC 1p34 Dombrock 014 DO 12p12.3 Colton 015 CO AQP1 7p14 Landsteiner Wiener 016 LW 19p13.3 Chido Rodger 017 CH/RG C4A, C4B 6p21.3 H 018 FUT1 Kx 019 XK Xp21.1 Gerbich 020 GE GYPC 2q14-q21 Cromer 021 CROM DAF 1q32 Knops 022 KN CR1 Indian 023 IN CD44 11p13 OK 024 CD147 RAPH 025 MER2 11p15.5 JMH 026 - I 027 GLOB 028 GIL 029 RHAG 030

6 Tableau de concordance entre nomenclature internationale (ISBT) et nomenclature utilisée en France (Fischer et Race) Antigènes N° 1 2 3 4 5 6 7 8 01 ABO A B A,B A1 02 MNS M N S s U 03 P1 04 RH D C E c e ce Ce Cw 05 LU Lua Lub 06 KEL K k Kpa Kpb 07 LE Lea Leb 08 FY Fya Fyb Fy3 09 JK Jka Jkb Jk3

7 Le système ABO Le système ABO présente deux caractéristiques qui sont à l’origine des méthodes de groupage et expliquent son rôle important en transfusion et lors des transplantations : La présence ou l’absence des antigènes A et/ou B à la surface des GR La présence ou l’absence des anticorps naturels anti-A et/ou anti-B dans le plasma correspondants aux antigènes absents sur les GR

8 Les antigènes du système ABO

9 Les antigènes du système ABO
Groupe sanguin Antigènes membranaires Anticorps sériques Fréquence en France A anti-B 45% B anti-A 9% O H anti-A et anti-B 43% AB A et B aucun 3%

10 Répartition des Ag ABH dans l’organisme
à la surface des GR, PN, lymphocytes, monocytes et des plaquettes présents sur de nombreuses cellules de l’organisme (cellules épithéliales, endothélium vasculaire, secrétions salivaires, cellules rénales) à l’exception de l’os, des neurones et de la cornée

11 Les anticorps naturels,réguliers
Naturels : Présents dans le plasma d’un sujet en dehors de toute stimulation antigénique reconnue (transfusion ou grossesse) Sont dirigés contre les antigènes que le sujet ne possèdent pas sur leur GR Réguliers : existent constamment chez les individus ne possédant pas l’antigène correspondant Apparaissent chez l’enfant entre 0 et 6 mois (suite à l’hétéro immunisation par les bactéries de la flore intestinale) Intérêt primordial en transfusion sanguine en raison du risque d’incident dès la 1ère transfusion incompatible

12 Les anticorps immuns, irréguliers
N’existent pas à l’état naturel Apparaissent à la suite d’une immunisation préalable : grossesse ABO incompatible

13 Détermination du groupe ABO
Le groupage ABO repose sur deux épreuves qui doivent être concordantes : Epreuve globulaire dite de Beth-Vincent consiste à rechercher par une technique d’agglutination les antigènes présents sur les hématies GR à tester (antigènes à déterminer) + sérums tests connus (anticorps monoclonaux anti-A et anti-B)

14 Réaction d’agglutination
Formation d’un réseau

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16 Absence d’agglutination

17 Interprétation difficile :
Double population avec le sérum test anti-A - Patient A transfusé en O - Patient ayant subi une allogreffe de moelle (A/O ou O/A)

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19 Détermination du groupe ABO
Epreuve sérique dite de Simonin Consiste à identifier les anticorps naturels réguliers dirigés contre les antigènes absents Plasma à tester (anticorps naturels) + GR tests connus Le groupe ne sera définitif qu’à la suite de 2 déterminations réalisées à partir de 2 prélèvements sanguins différents

20 Groupage ABO O _ +++ A B AB BETH VINCENT anti-A anti-B SIMONIN
GR A GR B O _ +++ A B AB

21 Règles de compatibilité ABO
POUR LES GLOBULES ROUGES SYSTEME ABO A identité A compatibilité Ac anti-B AB AB O O compatibilité donneur universel Ac anti-A Ac anti-B pas d'Ac receveur universel Ac anti-A B identité B

22 Règles de compatibilité ABO
POUR LE PLASMA A O AB B

23 Le système RH (Rhésus) Système complexe de groupe sanguin
On compte 52 antigènes appartenant à ce système En pratique courante seuls 5 sont à connaître : D, C, c, E, e La présence de l’antigène D défini le groupe Rhésus positif (85%) son absence le groupe Rhésus négatif Le phénotype Rhésus est déterminé par la présence ou l’absence des 5 antigènes : D, C/c, E/e

24 Le système Rhésus comprend 52 antigènes situés sur la membrane du GR

25 Les antigènes ANTIGENES Fréquence en France D (RH1) 85% C (RH2) 70%
E (RH3) 30% c (RH4) 80% e (RH5) 98%

26 Phénotype Rhésus (RH) du receveur (fréquence en France)
Phénotype Rhésus (RH) du CGR à transfuser par ordre prioritaire D+C+E-c+e+ (RH : 1, 2, -3, 4, 5) (0,34) D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5) D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5) D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5) (0,20) D+C-E+c+e+ (RH : 1, -2, 3, 4, 5) (0,12) D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5) D+C+E+c+e+ (RH : 1, 2, 3, 4, 5) D+C+E+c-e+ (RH : 1, 2, 3, -4, 5) (0,04) (0,02) (0,01) (0,15)

27 Les Anticorps du système Rhésus
Toujours acquis, secondaires à une allo-immunisation, lors d’une transfusion ou d’une grossesse Probabilité d’apparition fonction de l’immunogénicité L’antigène Rh standard (D) est le plus immunogène puis dans l’ordre E, c et e de classe IgG, hémolysants, capables de traverser le placenta, responsables de la symptomatologie présentée par un nouveau-né Rhésus + né de mère Rhésus - : maladie hémolytique du nouveau-né

28 Règles de compatibilité Rhésus
POUR LES GLOBULES ROUGES Rh - Rh + = Ag D+

29 Les autres systèmes érythrocytaires
Importance transfusionnelle car certains de leurs antigènes sont fortement immunisants Système KELL: l’Antigène K est un puissant immunogène pour les sujets K- (91% de la population K-) Système Duffy : antigène Fya et Fyb Système MNS : antigène S et s Système Kidd : antigène Jka et JKb

30 Les autres systèmes érythrocytaires
L’absence d’un Antigène dans l ’un de ces systèmes ne s’accompagne pas d’anticorps naturels, comme dans le système ABO, mais une transfusion ou une grossesse peuvent provoquer la formation d’anticorps immuns (allo-immunisation) responsables ultérieurement d’accidents transfusionnels ou de MHNN

31 Les examens immunohématologiques
Groupage ABO RH1 (RhD) Phénotypage RH et Kell Phénotypage étendu Recherche d’anticorps irréguliers (RAI) Epreuve de compatibilité au laboratoire Tests de Coombs

32  Exigences relatives aux échantillons : Qualité et quantité :
Type d’analyse Nombre de ml sur anticoagulant Nombre de ml sur tube sec ou anticoagulant Groupe ABO.RH1 et phénotype RH.KEL1 5 RAI chez l’adulte ABO.RH1 et RH.K et RAI chez l’adulte RAI chez le nouveau-né ABO.RH1 et RH.K et RAI chez le nouveau-né Titrage et dosage pondéral anti-RH1 15 Test de Kleihauer Bilan de réaction transfusionnelle Bilan de maladie hémolytique du nouveau-né AHAI : TCD–Elution–Hémolysine–AF-RAI 10 Test de Coombs Direct (TCD) Identification du patient : Nom patronymique / Nom marital / Prénom(s) / Date de naissance / Sexe.  Exigences relatives aux documents accompagnateurs : Etablissement de soins : service demandeur / ligne téléphonique directe Prescripteur : nom, signature du médecin prescripteur, date de prescription Préleveur : nom et qualité du préleveur, signature, date et heure du prélèvement Identification du patient : nom patronymique, nom marital, sexe et date de naissance Nature des analyses demandées Renseignements cliniques éventuels Si une transfusion est envisagée, date et heure prévues, niveau d’urgence.

33 Les examens immunohématologiques
Groupage ABO RH1 correspond à la détermination du groupe ABO indissociable de la recherche du Rhésus standard D le groupage est considéré comme définitif si les résultats sont concordants sur deux déterminations sur 2 prélèvements différents Contexte pré-transfusionnel avéré ou potentiel et contexte périnatal La transmission électronique des résultats est la règle pour la délivrance des PSL

34 Phénotype Rhésus Kell Recherche grâce à l’utilisation de sérums tests anti-C, anti-E, anti-c, anti-e et anti-K la présence ou l’absence à la surface des hématies des 5 antigènes suivants : C (RH2), E (RH3), c (RH4), e (RH5) et K (KEL1) Contexte prétransfusionnel avéré ou potentiel Contexte pré et périnatal Validation de l’identification d’anticorps anti-érythrocytaires

35 Phénotype étendu Recherche de la présence ou l’absence des antigènes : Jka, Jkb (système Kidd), Fya, Fyb (système Duffy), S, s (système MNS) Champ d’application : - patient présentant un anticorps irrégulier dans l’un des systèmes concernés - à titre préventif chez patients devant recevoir des transfusions itératives - patients en instance de greffe

36 Recherche d’Anticorps Irréguliers (RAI)
NB : Les anticorps immuns sont décelables avec un maximum de probabilité du 7ème au 15ème jour après la transfusion Examen consistant à dépister et identifier les anticorps dirigés contre les antigènes érythrocytaires autres que A et B dans le sérum à étudier grâce à une gamme d’hématies tests Délai de réalisation de 45 mn à plusieurs heures Validité 72H

37 Recherche d’Anticorps Irréguliers (RAI)
Champ d’application : Obligatoire chez tout patient susceptible d’être transfusé Contexte de greffe ou de transplantation Contexte pré ou périnatal Chez le patient transfusé itératif en bonne place au cours des séries de transfusion Chez le patient transfusé dans le cadre du suivi post-transfusionnel (dans un délai de 1 mois après le dernier épisode transfusionnel)

38 CAT en cas d’urgence hémorragique
Urgence vitale immédiate : distribution sans délai Prélèvement 2 déterminations groupe + RAI pas de groupe ni de RAI si non disponibles CGR O sans hémolysines Urgence vitale : délai de distribution inférieur à 30 minutes Prélèvement 2 déterminations groupe + RAI pas de RAI si non disponible nécessité de groupe ABO conforme Urgence « relative » : délai de distribution de heures Prélèvement 2 déterminations groupe + RAI nécessité de groupe et RAI conformes

39 CHOIX DES CGR EN URGENCE VITALE En fonction de D et Rhésus-Kell
Dans le cadre d’un dépôt d’urgence ayant en stock des CGR : O- (D-C-E-c+e+K-) non réservé à la transfusion isogroupe O+ (D+C+E-c-e+K-) non réservé à la transfusion isogroupe En fonction de D et Rhésus-Kell Patient CGR à transfuser D Rhésus Kell D non connu non connu O-D-C-E-c+e+K- D négatif connu ou non D positif O+D+C+E-c-e+K- connu : C+ connu : C-

40 Epreuve directe de compatibilité au laboratoire EDCL
Qualification biologique du don Consiste à tester le sérum du receveur vis-à-vis du CGR à transfuser (l’objectif étant de détecter certains Ac masqués par la présence d’autres Ac, ou des Ac rares) Validité 72H Champ d’application : Receveur présentant ou ayant présenté un ou plusieurs allo-anticorps anti-érythrocytaires Nouveau-né présentant un test de Coombs positif ou né de mère allo-immunisée

41 Test de Coombs Permet la mise en évidence de la sensibilisation in vivo des hématies humaines par des anticorps grâce à l’utilisation d’un réactif appelé antiglobuline humaine Champ d’application : Maladie hémolytique du nouveau-né Incident transfusionnel Anémie hémolytique autoimmune

42 + anti-gammaglobulines humaines
Recherche d'anticorps fixés sur les hématies Ac non spontanément agglutinables + anti-gammaglobulines humaines Hématies fœtales ayant fixé l'Ac complexe agglutinant