Identification d’entérobactérie sur microgalerie

Présentation au sujet: "Identification d’entérobactérie sur microgalerie"— Transcription de la présentation:

1 Identification d’entérobactérie sur microgalerie
Cupule Microplaque de 96 puits

2 Préparation de la microplaque
Introduire à l’aide d’une micropipette, d’une pipette graduée stérile de 1 mL ou d’une pipette Pasteur 200 µL (soit 4 gouttes) des différents milieux dans les cupules, à proximité du bec bunsen (dans la zone de stérilité).

3 Microgalerie avant ensemencement
aa Cupules d’identification pour une souche Composés carbonés

4 Ensemencer avec l’öse ou avec la pipette Pasteur stérile, chaque série de cupules avec la même souche bactérienne. Ici 3 souches différentes peuvent être étudiées en même temps.

5 Microgalerie après culture de 24 heures à 37°C
Pour identifier l’ensemble des caractères biochimiques de ces différentes souches, il est nécessaire de pratiquer des tests complémentaires pour mettre en évidence: La NR La production d’indole La TDA La fermentation du glucose par la voie du butane diol

6 + - - - + + + + + + + - + + - - + - + + - +
Lecture de la 1ère partie de la plaque ONPG ADH LDC ODC CIT H2S + - - - + + + +/- + + + +/- MAN INO SOR RHA SAC MEL + - + + - - + - + + - +

7 - - + - - - + - Lecture de la 2nde partie de la plaque
TDA IND VP GEL GLU 1 gtte FeCl3 1 gtte naphtol et NaOH 1 gtte Kovacs - - + - Identifier la souche par la méthode d’élimination successive. Comparer avec l’identification numérique donnée dans la livre API 20E. 1 gtte Nit 1 et Nit 2 AMY BNit - - + -

8 + + + + Identification des différentes espèces d’Enterobacteriaceae
Klebsiella pneumoniae + Serratia marcesens + Salmonella gallinarum

9 + Citrobacter freundii E coli + + + Klebsiella pneumoniae

10 Lecture des microplaques
Proteus vulagaris Salmonella spp Salmonella gallinarum

11 Proteus mirabilis Providencia Stuartii Salmonella spp