Société Algérienne D’Hématologie et de Transfusion Sanguine

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1 Société Algérienne D’Hématologie et de Transfusion Sanguine
XIIème congrès national de la SAHTS 01 au 03 Octobre 2015 Profil phénotypique des Leucémies Aigues Lymphoblastiques (LAL) dans la région de Blida S. Oukid, S. Taoussi, F. Lamraoui, N. Hendaoui, K.M. Benlabiod, N. Rekab, Y.M. Bouchakor, H. Brahimi, C. Boucherit, M. Mezroud, C. Guezlane, M.T. Abad. Service Hématologie, EHS ELCC CAC Blida. Université de Blida I, Algérie

2 L’objectif de notre étude est d’évaluer la répartition
des LAL B et T chez l’adulte et l’enfant à Blida et de la comparer aux données de la littérature.

3 Introduction La cytométrie en flux est le seul examen fiable qui permet : D’affirmer la nature lymphoïde d'une prolifération blastique. De classer en LAL B ou T et en sous classes. De différencier les LAL des autres leucémies aigues myéloïdes notamment la LAM0.

4 Introduction De janvier 2007 à décembre 2014, nous avons réalisé 425
typages de Leucémies Aigues par cytométrie en flux. Leucémies Aigues Lymphoblastiques : 180 cas (42,4%).   

5 - Lignée lymphocytaire B : CyCD79, CD19, cyCD22.
Méthodes d’étude Les marqueurs considérés comme les plus spécifiques pour déterminer l’appartenance d’une cellule à une lignée cellulaire: - Lignée lymphocytaire B : CyCD79, CD19, cyCD22. - Lignée lymphocytaire T : CyCD3. - Lignée myéloïde : MPO, CD13, CD33, CD117. - Lignée plaquettaire : CD41, CD42, CD61. - Lignée érythrocytaire : Glycophorine A, CD36.

6 . Score EGIL Lignée B Lignée T Lignée myéloïde 2 CyCD22, CD79, µ Cy CD3, TCR MPO 1 CD19,CD10, CD20 CD2,CD5,CD8,CD10 CD13,CD33,CD117,CD65 0,5 Tdt, CD24 TdT,CD7,CD1a CD14, CD15, CD64 Il faut au moins un score de 02 dans une lignée pour affirmer l'appartenance des cellules à cette lignée

7 Méthodes d’étude LAL T + - _ +/-
Classification selon le score EGIL pour déterminer les sous classes B, T LAL B LAL T                                      cyCD79a, CD22,CD19 CD10 u cyto Ig s B - I (Pro-B) + - B - II (B commune) _ B - III (Pré-B) B - IV (B mature) +/- cyCD3 CD1a CD7 CD3+/CD1a- CD2/CD5/CD8 T - I (Pro-T) + - T - II (Pré-T) T - III (T corticale) T - IV (T mature)

8 CMF : Matériels et méthodes d’étude
1- Prélèvements pour CMF * Sang * Moelle 2- Filtration de la MO. 3- Numération. 4- Dilution. 5- Préparation des échantillons : FITC, PE, PerCP Cy5.5, APC. 6- Acquisition. 7- Analyse : -FSC/SSC. -Détermination de la zone négative. -Gating sur la région blastiques et sur la CD45. -Analyse des différents fluorochromes : positivité et intensité.

9 Résultats

10 Résultats : 180 cas Enfants : 60 cas (33,4%) Adultes : 120 cas (66,6%)
* Filles : 30 cas. * Garçons : 30 cas. * Sex ratio : 1. Moyenne d’âge : 7,7 ans (05 mois-15 ans). . Adultes : 120 cas (66,6%) * Femmes : 37 cas. * Hommes : 83 cas. * Sex ratio (H/F) : 2,24. Moyenne d’âge : 31,6 ans ( ).

11 Résultats Tableaux cliniques : * Un syndrome anémique : 83,9%.
* Un syndrome tumoral : 74,8%. * Un syndrome hémorragique : 37,5%. * Un syndrome infectieux : 33,5%. Une hyperleucocytose : 113 cas (62,7%) : * Moyenne : GB : /µl (10 080 – 700 000).

12 Etude cytologique LA 20 (33,4%) 37 (30,8%) 57 ( 31,6%) LAL 40 (66,6%)
. Enfants Adultes Total LA 20 (33,4%) 37 (30,8%) 57 ( 31,6%) LAL 40 (66,6%) 83 (69,2%) 123 (68,4%)

13 CMF : 1- Prélèvements pour CMF * Sang : 48 cas (26,6%).
* Moelle : 132 cas (73,4%). 2- Numération moyenne : /µl (2400 – ).

14 Résultats de la CMF selon les critères de l’EGIL :
LAL B : 87 cas (48,4%). LAL T : 83 cas (46,2%). LA indifférenciées : 03 cas (1,6%). Non concluant : 07 cas (3,8%). Enfants Adultes Total LAL B 33 (56,8%) 54 (48,3%) 87 (51,2%) LAL T 25 (43,2%) 58 (51,7%) 83 (48,8%) 58 (34%) 112 (66%) 170

15 Immunophénotypage des LAL de l’adulte
112/120 cas

16 LAL B : 54 cas. LAL adultes 112 cas LAL T : 58 cas.

17 Immunophénotypage des LAL de l’enfant
58/60 cas

18 LAL B : 33 cas. LAL enfants 58 cas LAL T : 25 cas.

19 Fréquence des différents marqueurs dans LAL B (%)
Marqueurs aberrants les plus fréquemment exprimé : CD33, CD13, CD117 et CD3.

20 Fréquence des différents marqueurs dans LAL T
Les trous phénotypiques : * CD2 : 33%. * CD5 : 14,5%. * CD7 : 4,7% .

21 Illustration

22 LAL Pré Pré B

23 LAL T mature

24 LAL Pro T

25 Comparaison des fréquences des différents sous type des LAL
Commentaires Comparaison des fréquences des différents sous type des LAL avec la littérature

26 Comparaison des fréquences des LAL B de l’enfant avec la littérature
Prédominance des LAL Pré B. Prédominance des LAL Pré Pré B dans la littérature. Comparaison à la série Bachir : p = Comparaison à la série Dakka : p = 0.44. Comparaison à la série tunisienne : p = 0.74. Référence Pro B % Pré Pré B% Pré B % B % Blida : 58 cas (56,8%) 5 19 25,8 Alger CPMC 83 cas (2) 10 30 7,5 Allemande Ludwig (4) 63 16 3 Bachir (Maroc) : 296 cas (6) LAL B enfants : 77,4% Marocaine (Rabat) : 118 cas LAL B enfants : 68% Dakka (Maroc) : 100 cas (222) (5) LAL B enfants : 63% Bellaoui (Maroc) : 100 cas (7) LAL B enfants : 38% Tunisienne : 30 cas (3) LAL B enfants : 53 %

27 Comparaison des fréquences des LAL B de l’adulte avec la littérature
Prédominance des LAL Pré B. Paradoxalement, les LAL Pro B et Pré Pré B sont peu nombreux. Prédominance des LAL Pré Pré B dans la littérature. Référence Pro B % Pré Pré B % Pré B % B % Blida 112 cas 2,6 15 19,7 6.2 Alger CPMC 83 cas (2) 7 23,3 2,7 23 Allemande Ludwig (4) 11 52 9 3

28 Comparaison des fréquences des LAL T avec la littérature
Référence L AL T % Enfants Adultes Blida 83 LAL T /170 cas 43,2 51,7 Alger CPMC 83 cas (2) 42,5 44 Allemande Ludwig (4) 13 24 Bellaoui (Maroc) : 100 cas (7) 63 Marocaine (Rabat) 118 cas 30 - Dakka (Maroc) : 100 cas (5) 37 Bachir (Maroc) : 279 cas (6) 21,15 Tunisienne : 30 cas (3) 26

29 Fréquences des LAL T dans le monde

30 Commentaires La difficulté de classement cytologique dans 31,6 % de cas, malgré la coloration cytochimique d’où la réelle nécessité de disposer d’un immunomarquage pour affirmer le type de leucose . Nous avons comparé les fréquences des LAL selon le type immunologique B ou T à celles la littérature, on note une fréquence élevée des LAL T dans les séries algériennes (notre étude et celle du CPMC : 83 cas : adulte : 44% et enfant : 42,5%) par rapport à l’étude Allemande (Ludwig) (l’enfant : 13% et l’adulte : 24%). (2-4). .

31 Commentaires La prédominance des LAL T dans notre série est comparable a celle observée en Égypte 48%, en Palestine 60% et au Japon 50% par opposition à leurs fréquences plus faibles en Europe ( France 20%, Angleterre 14%) et aux Etats Unis d'Amérique 14%. (1, 2, 3). Paradoxalement nous avons très peu de LAL communes (Pré Pré B) par rapport à la littérature.

32 Conclusion La cytométrie en flux a été d'un apport précieux pour le diagnostic de LAL; elle complète utilement les examens cytologiques et cytochimiques traditionnellement en vigueur dans notre laboratoire; elle a été souvent décisive dans l'affirmation du type de LA surtout en précisant le type B ou T et donc pour orienter la thérapeutique. Il faut signaler la fréquence élevée particulière des LAL T dans notre environnement, comparable à celle de la série Algérienne et des séries maghrébines.

33 Références 1- F. Bachir et al.
Immunophénotypage des leucémies aigues Lymphoblastique de l’enfant Hématologie, Oncologie pédiatrique, CHU Ibn Rochd Hôpital Casablanca, Maroc. Hématologie, vol. 17, supplément, Mars 2011. 2- Trabzi – Azeli Anissa. Application de l’immunophénotypage à la classification des leucémies aigues These pour le diplôme de docteur en science médicales Juillet 1999, Faculté de Médecine d’Alger . 3- S. Bouallegue. Etude cytogénétique des LAL de novo de l’enfant: à propos de 30 cas. Laboratoire d’hématologie biologie, CHU Sahloul, Souse, Tunisie. 4- Ludwig W. D ; Reiter. A, Loffler. H et al. Immunophenotypic Features of childhood and Adult Acute lymphoblastic Leukemia ( ALL) : Experience of the German Multicentre Trials ALL – BFM and GMALL Leukemia and lymphoma , 1994, Vol 13, Supp 1 : 71 – 76. 5- Nadia. Dakka. Profil immunologique des leucémies aiguës lymphoblastiques chez les enfants au Maroc : Corrélation avec les aspects biologiques, cliniques et pronostiques . These 2009. 6- Fatima Bachir. Characterization of Acute Lymphoblastic Leukemia Subtypes in Moroccan Children International Journal of Pediatrics ,2009. 7- H. BELLAOUI, M. KHATTAB, M. EL HANSALI et al. Etude du profil immunologique des leucémies aiguës lymphoblastiques de l’enfant au Maroc. Intérêt de l’étude de la coexpression du CD34 et CD10. Biologie & Santé vol. 3, n° 1, 2003.