Sémiologie : hématologie biologique 1- hémogramme normal Pr Philippe NGUYEN Dr Sylvie DALIPHARD Dr Baptiste GAILLARD Année 2009-10

Définition de l’hémogramme Numération des cellules sanguines circulantes Blood cell count Méthode automatisée Valeurs de référence : distinguer le normal du pathologique L’un des examens biologiques les plus prescrits en médecine.

HEMOGRAMME Nécessité d’un Anticoagulant utilisé : Les cellules doivent rester en suspension L’anticoagulant : l’EDTA, chélateur calcique Rigidifie les membranes, favorise l’agglutination des plaquettes Prélèvement à jeun (optimal) : Mais réalisable chez le sujet non à jeun (opacité) : Le bébé, L’urgence, Le patient en réanimation (alimentation parentérale par lipides)

HEMOGRAMME Méthode automatisée : Méthode « manuelle » : A partir du sang total EDTA Quantitatif +++ Fiabilité de la mesure, reproductibilité (coefficients de variation des mesures) Contrôles de qualité Méthode « manuelle » : Sang total EDTA : étalement du sang sur lame (frottis) Coloration standard Lecture au microscope Qualitatif +++

Exemple : Intrument Beckmann-Coulter : mesure d’impédance Mono PNE PNN GR Plq GB Ly

EDTA/ Coloration MGG Bord du frottis GR Agrégat plaquettaire

Beckman Coulter

Prélèvement sur citrate même patient Beckman Coulter

Paramètres érythrocytaires La numération érythrocytaire a peu de valeur diagnostique (1012/L ou Téra/L) L’hémoglobine (g/L) reflète la capacité d’oxygénation et définit la notion d’anémie L’hématocrite (L/L) est le rapport du volume érythrocytaire sur le volume sanguin total

Paramètres érythrocytaires Le volume globulaire moyen (VGM) est un paramètre constant chez l’individu (hors pathologie) : érythropoïèse physiologique (« normale ») VGM = 90 fL (femto = 10-15) Morphologie : hématies normocytaires

Paramètres érythrocytaires TCMH : teneur corpusculaire en hémoglobine : 29 ± 2 pg (pico = 10-12) CCMH : concentration corpusculaire moyenne en hémoglobine : 31 à 36 % Ne peut être supérieur à 36 % Morphologie : hématies normochromes

VALEURS NORMALES DE L’HEMOGRAMME CHEZ L’ADULTE (1) Numération (réalisée sur automate Coulter*) : Homme Femme Leucocytes (Giga/L ou 109/L) 4,0 – 10 Hémoglobine (g/L) 130 – 170 120 - 160 Volume globulaire moyen (fL) 85 – 95 85 - 95 TGMH (teneur globulaire moyenne en hémoglobine) (pg) 29 – 34 CCMH (concentration corpusculaire moyenne en hémoglobine) (% ou g/dL) 31 – 36 Plaquettes (Giga/L) 150 – 400 150 - 400 GR/Hématocrite/variations selon l’âge : se reporter aux recommandations de l’ANAES

Paramètres de renouvellement érythrocytaire Réticulocytes : ARN (coloration spécifique) 20 à 120 Giga/L « normorégénération » hémolyse physiologique Erythroblastes circulants Absents physiologiquement

0-1 mois 1 mois 2 mois 4 mois 6 mois 9 mois 12 mois HEMOGRAMME ANAES 1998 Valeurs usuelles de l’hémogramme chez les enfants de –1 an (1) : 0-1 mois 1 mois 2 mois 4 mois 6 mois 9 mois 12 mois Hb (g/dL) 16,6+0,11 13,9 11,2 12,2 12,6 12,7 12,7 Limite inf. 13,4 10,7 9,4 10,3 11,1 11,4 11,3 VGM (µ3) 105,3+0,6 101,3 94,8 86,7 76,3+0,6 77,7 77,5 Limite inf. 88 91 84 76 68 70 71

VALEURS NORMALES DE L’HEMOGRAMME CHEZ L’ADULTE (2) Formule leucocytaire (réalisée sur automate Coulter*) : (Giga/L) Homme Femme Granulocytes neutrophiles 2,5 – 7,5 2,0 – 7,5 Lymphocytes 1,0 – 4,0 Monocytes 0,2 – 1,0 Granulocytes éosinophiles < 0,5 Granulocytes basophiles < 0,2 Pas de valeur diagnostique de l’expression en %

HEMOGRAMME ANAES 1998 0-1 mois 6 mois 12 mois Valeurs usuelles de l’hémogramme chez les enfants de –1 an (2) : 0-1 mois 6 mois 12 mois Neutrophiles 4 500 3 800 3 500 (106/L ou Cellules/µL) 1 000-9 500 1 000-8 500 1 500-8 500 Lymphocytes 5 500 7 300 7 000 Cellules/µL) 2 000-17 000 4 000-13 500 4 000-10 500

VARIATIONS DES VALEURS DE L’HEMOGRAMME Exercice physique : -  des leucocytes (repos 20 minutes) - démargination des PNN Altitude : - 3 000 / 4 000 m - en permanence -  polyglobulie Exceptionnel en France métropolitaine

VARIATIONS DES VALEURS DE L’HEMOGRAMME 1. En fonction de l’ethnie : - Sujet Noir . diminution modérée de l’hémoglobine - 1 g/dL ou 10 g/L sans modifications des constantes érythrocytaires ou du taux de réticulocytes . neutropénie peu importante isolée (> 0.5 109/L) 2. Femme enceinte : - Diminution du taux d’hémoglobine/hémodilution - Hyperleucocytose : PN (7.109/L) - Diminution modérée du taux de plaquettes 3. Consommation d’alcool « buveurs sociaux » - VGM reste dans les valeurs de référence 4. Tabac - Augmentation du taux de polynucléaires neutrophiles

Difficultés d’interprétation de l’hémogramme Difficultés d’interprétation de la numération érythrocytaire, de la concentration d’hémoglobine et de l’hématocrite en cas d’hémodilution Fausse anémie (hémodilution) Thrombo-agglutination sur EDTA Citrate

Satellitisme plaquettes aux PNN

HEMOGRAMME Facteurs de variations pré-analytiques : Liés au prélèvement Garrot Matériel de prélèvement Liés à l’échantillon Conservation : température ambiante, 6 h (optimal < 3 h) Transport Anticoagulant thromboagglutination EDTA Hémolyse Hémoglobine (sous réserve) Micro-caillots plaquettes Liés au patient Hyperlipémie Hb CCMH TGMH Erythroblastes leucocytes NB : constance du VGM/identité patient sur un délai court