DETECTION DES FOYERS DE VERTICILLIUM DAHLIAE AGENT CAUSAL DE LA VERTICILLIOSE DE L’OLIVIER DANS LES REGIONS DE MEKNES / FES/ TAOUNATE DARAI Soumia 1, DIOURI Mohammed 2, AMIRI Said 3. 1 université Moulay Ismail, Faculté des Sciences de Meknès. 2 Département de biologie, laboratoire de Biotechnologie Végétale, Faculté des Sciences de Meknès. 3 Département de Protection des Plantes et de l’Environnement, laboratoire de Phytopathologie, Ecole Nationale d’Agriculture de Meknès DARAI Soumia 1, DIOURI Mohammed 2, AMIRI Said 3. 1 université Moulay Ismail, Faculté des Sciences de Meknès. 2 Département de biologie, laboratoire de Biotechnologie Végétale, Faculté des Sciences de Meknès. 3 Département de Protection des Plantes et de l’Environnement, laboratoire de Phytopathologie, Ecole Nationale d’Agriculture de Meknès Introduction la verticilliose est causée par Verticillium dahliae Kleb, qui représente actuellement l’un des principaux facteurs limitant la survie de l’olivier (olea europea L.). L’objectif du travail est l’isolement de Verticillium dahliae dans les régions de Meknès, Fès et Taounate, puis la confirmation moléculaire de l’identité des isolats échantillonnés. Introduction la verticilliose est causée par Verticillium dahliae Kleb, qui représente actuellement l’un des principaux facteurs limitant la survie de l’olivier (olea europea L.). L’objectif du travail est l’isolement de Verticillium dahliae dans les régions de Meknès, Fès et Taounate, puis la confirmation moléculaire de l’identité des isolats échantillonnés. Matériels &méthodes Prélèvement des branches d’olivier symptomatiques.(photo 1) Les isolements ont été réalisés sur milieu sélectif (Ausher et al 1967) et sur milieu PDA. La caractérisation moléculaire est assurée par la PCR conventionnelle (programme OEPP2007 modifié) Les amorces utilisées sont: -Na1/Na2 pour la confirmation du genre Verticillium. -P19/P22 pour la caractérisation de l’espèce V.dahliae Matériels &méthodes Prélèvement des branches d’olivier symptomatiques.(photo 1) Les isolements ont été réalisés sur milieu sélectif (Ausher et al 1967) et sur milieu PDA. La caractérisation moléculaire est assurée par la PCR conventionnelle (programme OEPP2007 modifié) Les amorces utilisées sont: -Na1/Na2 pour la confirmation du genre Verticillium. -P19/P22 pour la caractérisation de l’espèce V.dahliae Pour le couple d’amorce Na1/Na2, un échantillon est considéré positif s’il produit une bande ayant un poids moléculaire de 452pd (Rodriguez et al 2009).(fig 1) L’ échantillon qui fixe le couple d’amorce P19/P22 montrera une bande de taille 580pb caractéristique de l’espèce V.dahliae (OEPP 2007). (fig 2) Pour le couple d’amorce Na1/Na2, un échantillon est considéré positif s’il produit une bande ayant un poids moléculaire de 452pd (Rodriguez et al 2009).(fig 1) L’ échantillon qui fixe le couple d’amorce P19/P22 montrera une bande de taille 580pb caractéristique de l’espèce V.dahliae (OEPP 2007). (fig 2) Résultats Sur milieu PDA et à 24°C, le thalle est formé d’un mycélium dense, plus ou moins cotonneux. Après 7 jours de culture, le thalle devient noir en raison d’une abondante production de microsclérotes. (Photo 2) Les observations microscopiques ont montré la présence des conidiophores portant des phialides verticillées et à leur extrémité des conidies plus ou moins arrondies, et la présence des microsclérotes en amas. (Photo 3) Résultats Sur milieu PDA et à 24°C, le thalle est formé d’un mycélium dense, plus ou moins cotonneux. Après 7 jours de culture, le thalle devient noir en raison d’une abondante production de microsclérotes. (Photo 2) Les observations microscopiques ont montré la présence des conidiophores portant des phialides verticillées et à leur extrémité des conidies plus ou moins arrondies, et la présence des microsclérotes en amas. (Photo 3) DARAI SOUMIA / Tel : ; L’Amélioration de la Production Agricoles les mars 2011 à la FST de Settat. L’Amélioration de la Production Agricoles les mars 2011 à la FST de Settat. Photo 1Photo 3Photo 2 Clichés DARAI Soumia et al., 2010 T C MP Ta M H2O T C MP Ta M Fig 1Fig 2 T: Taoujtate C:Chlihate Ta:Taounate M: ElMhaya MP: 100bp DNA Ladder 452pb 580pb