Plan du cours INTRODUCTION 1. Introduction HEMATOLOGIE 2. Hémogramme 3. Erythrocytes 4. Leucocytes HEMOSTASE 5. Hémostase BIOCHIMIE 6. Glucose 7. Lipides et cétones 8. Protéines 9. Equilibre hydrique et électrolytique 10. Minéraux 11. Hormones 12. Foie 13. Tractus gastro-intestinal (et pancréas) 14. Appareil urinaire 15. Muscles

8. Protéines 8.1

8.1. Généralités 8.2. Paramètres mesurés 8.3.Dysprotéinémies 8.4. Inflammation 8.5. Algorithmes 8.2

8.1. Généralités Protéines plasmatiques: catégories et fonctions La plupart des protéines plasmatiques sont synthétisées dans le foie, excepté les immunoglobulines qui sont synthétisées par les lymphocytes B (plasmocytes) dans différents tissus dont les organes lymphoïdes. 8.3

8.1. Généralités 8.2. Paramètres mesurés 8.3.Dysprotéinémies 8.4. Inflammation 8.5. Algorithmes 8.4

8.2. Paramètres mesurés 8.2.1. Protéines totales, albumine et globulines 1. Protéines totales -Méthode du biuret (colorimétrique; voir 2ème bac) automate pour la biochimie (g/L) -Alternative, réfractomètre (au cabinet) 2. Albumine Méthode colorimétrique automate pour la biochimie (g/L) 3. Globulines Globulines (g/L) = Protéines totales (g/L) – Albumine (g/L) 4. Rapport Albumine/Globulines A/G (%) 8.5

8.2.2. Electrophorèse des protéines sériques (EPS) 8.2.2.1. Méthode Rappel cours 2ème bachelier Tube sec! Les échantillons de sérum dilués sont déposés sur un gel d’agarose Électrophorèse réalisée à un pH de 8,7 (Protéines toutes chargées négativement à ce pH; migrent en fonction de leur taille et de leur forme) 8.6

- + DO    Coloration (Acide bleu) et décoloration du gel albumine (50 %) γ-globulines    Densitométrie (= spectrophotométrie; lecture de l’absorbance du gel en mouvement, 595 nm) α- et β-globulines Electrophorégramme 8.7

Protéines de transport + Enzymes + α-, β- et γ-globulines α-GLOBULINES Protéines de transport + Enzymes + Protéines de la phase aigue (augmentent quand inflammation) -α1-antitrypsine, orosomucoïde, haptoglobine, céruloplasmine, α2-macroglobuline, sérum amyloïde A… β-GLOBULINES Protéines de transport + enzymes -Protéine C réactive (CRP), transferrine, fibrinogène (si plasma plutôt que sérum)… Immunoglobulines (Ig)M (10% des Ig) PONT β-γ IgA (5% des Ig) et IgE (0,2% des Ig) γ-GLOBULINES IgG (85% des Ig) 8.8

8.2.2.2. Variations entre les espèces 8.9

8.2.2.3. Exemple de résultat (CT sain) 8.10

Si tubes avec anticoagulants Fibrinogène de trouve dans la fraction β2 8.2.2.4. Précautions L’échantillon ne peut pas être hémolysé! Si tubes avec anticoagulants Fibrinogène de trouve dans la fraction β2 Bovins (ß1) Chiens (α2) 8.11

Autres protéines de la phase aigue: peu fiable, rarement utilisé 8.2.3. Protéines individuelles Les protéines plasmatiques peuvent être dosées individuellement par des méthodes colorimétriques ou immunologiques Exemple: fibrinogène Autres protéines de la phase aigue: peu fiable, rarement utilisé 8.12

8.1. Généralités 8.2. Paramètres mesurés 8.3.Dysprotéinémies 8.4. Inflammation 8.5. Algorithmes 8.13

8.3. Dysprotéinémies A: ↑ G: ↑ A/G: = A: = ou ↓ G: ↑ A/G: ↓ 8.3.1. Hyperprotéinémies 8.3.1.1. Hyperalbuminémie + Hyperglobulinémie A: ↑ G: ↑ A/G: = Seule cause = déshydratation 8.3.1.2. Hyperglobulinémie sans hyperalbuminémie A: = ou ↓ G: ↑ A/G: ↓ Causes: Inflammation (associée ou non à une infection) Maladie à médiation immune (ex: lupus érythémateux disséminé) 8.14

Gammapathie monoclonale: -Augmentation d’une seule immunoglobuline En face d’une hyperglobulinémie sans hyperalbuminémie, réaliser une EPS Deux cas de figure: Gammapathie monoclonale: -Augmentation d’une seule immunoglobuline -Pic γ étroit Gammapathie polyclonale: -Augmentation d’une grande variété d’immunoglobulines -Pic γ large 8.15

CAUSES DE GAMMAPATHIES POLYCLONALES: Inflammations chroniques Exemples: -Péritonite infectieuse féline -Leishmaniose -Lupus érythémateux disséminé -… EHRLICHIOSE! CAUSES DE GAMMAPATHIES MONOCLONALES: Maladies lymphoprolifératives Exemples: -Myélome multiple -Lymphosarcome -… 8.16

Causes de gammapathies polyclonales et monoclonales (8.17)

Exemples d’EPS Myélome multiple (CN) Péritonite infectieuse féline Leishmaniose (CN) 8.18

A: ↓ G: ↓ A/G: = A: ↓ G: = A/G: ↓ 8.3.2. Hypoprotéinémies 8.3.2.1. Hypoalbuminémie et hypoglobulinémie Causes: -Hyperhydratation (fluides en i.v. ou polydypsie) -entéropathies exsudatives -Insuffisance hépatique -Hémorragie A: ↓ G: ↓ A/G: = 8.3.2.2. Hypoalbuminémie sans hypoglobulinémie Causes: -Apports insuffisants -Malabsorption -Maldigestion -Lactation -Inflammation aigues -Maladies rénales (glomérulonéphrite, amyloïdose…) A: ↓ G: = A/G: ↓ 8.19

A: = G: ↓ A/G: ↑ 8.3.2.3. Hypoglobulinémie sans hypoalbuminémie Causes: -Prise insuffisante de colostrum -Transfert insuffisant d’anticorps (placenta) -Immunodéficiences Exemple: VEAU Colostrum Pas de colostrum 8.20

8.3.3. Autres classifications des dysprotéinémies 8.3.3.1. Basée sur l’albuminémie (8.21)

8.3.3.2. Basée sur le rapport A/G (8.22)

8.1. Généralités 8.2. Paramètres mesurés 8.3.Dysprotéinémies 8.4. Inflammation 8.5. Algorithmes 8.23

8.4. Inflammation 8.4.1. Signes hématologiques et biochimiques de l’inflammation (résumé) Vitesse de sédimentation des GR: ↑ 2. Leucocytose: granulocytose (neutrophiles) si aigu et monocytose si chronique; BAND-neutrophiles et monocytes activés sur le frottis 3. EPS: globulines ↑, albumine ↓ 4. Protéines de la phase aigue (dosage individuel): ↑ selon les espèces Dosage peu fiable, rarement utilisé, excepté FIBRINOGENE 8.24

CAUSES d’HYPERFIBRINOGENEMIE -Inflammation 8.4.2. Fibrinogène CAUSES d’HYPERFIBRINOGENEMIE -Inflammation -déshydratation (hyperfibrinogénémie fausse) CAUSES d’HYPOFIBRINOGENEMIE -diminution de la production (insuffisance hépatique) -augmentation de la consommation (ex. CIVD) 8.25

8.1. Généralités 8.2. Paramètres mesurés 8.3.Dysprotéinémies 8.4. Inflammation 8.5. Algorithmes 8.26

8.5. Algorithmes (8.27)