Les Macrophages dans le système immunitaire Chloé, Lucas, Martial, Emmy, Emma Les Macrophages dans le système immunitaire
Observation Observation au microscope confocal d’une coupe de peau après blessure. Les lymphocytes T sont « colorés » en vert et les macrophages en rouge. D’après Reynders A.
Observation Coupe de peau contrôle Coupe échantillon Epiderme Epiderme D’après Reynders A.
Comment nous défendent les macrophages contre les bactéries ? Problématique Comment nous défendent les macrophages contre les bactéries ?
1 – Les Macrophages sécrètent naturellement Hypothèses 1 – Les Macrophages sécrètent naturellement du lysozyme. 2 – Les lysozymes sécrétés par les macrophages possèdent une activité antibactérienne.
Milieu des macrophages 1. Les macrophages sécrètent du lysozyme (si oui, en quelle quantité?) Expérience : Boite avec gel d’agarose + peptidoglycane Matériel : milieu de culture Milieu des macrophages Milieu I.E.C.6 Milieu témoin
1. Les macrophages sécrètent du lysozyme (si oui, en quelle quantité?) Expérience : Lysoplate assay Elle permet de mesurer la dégradation du peptidoglycane en gel d’agarose. Matériel : le milieu de culture Boîte 1 Boîte 2 Boîte 3 Boîte 4 Moyenne [Lysozyme] en µg/mL 0,00 0,39 0,6 0,4 0,50 0,78 1,35 1,1 1,2 0,95 1,15 1,56 1,45 1,4 1,39 3,125 1,8 1,6 1,75 1,69 6,25 2,1 2 1,95 2,01 12,5 2,3 2,2 2,25 Gamme étalon Diamètre mesure en centimètre [Lysozyme] en microgramme par millilitre
Les 2 types de bactéries GRAM + GRAM - Peptidoglycane Membrane plasmique Peptidoglycane Lipopolysaccharide ( LPS)
Courbe de l’Abs en fonction du temps Solution bactérienne + lysozyme 2. Le lysozyme sécrété par les macrophages est anti-bactérien Matériel : Spectrophotomètre connecté à un ordinateur – suivre les mesures en direct de la turbicité d’un liquide. Courbe de l’Abs en fonction du temps Solution bactérienne + lysozyme Solution bactérienne spectrophotomètre
2. Le lysozyme sécrété par les macrophages est anti-bactérien Expérience : Avec le Micrococcus Lysodeikticus ( Gram+) = Bactérie vivante
Conclusion Molécules de lysozymes Micrococcus Lysodeikticus (Gram + ) Macrophage Peptidoglycane Molécules de lysozymes