Thérapie Génique Principe: - Produire une protéine manquante Page 32 Principe: Introduire dans une cellule cible un gène d’intérêt thérapeutique: - Produire une protéine manquante (cellule déficiente c allèle mutant) - Surexpression d’une protéine - Produire un signal → mort cellulaire (cellule infectée ou cancéreuse)

Thérapie Génique

Thérapie Génique Principe: Comment? - Produire une protéine manquante Page 32 Principe: Introduire dans une cellule cible un gène d’intérêt thérapeutique: - Produire une protéine manquante (cellule déficiente c allèle mutant) - Surexpression d’une protéine - Produire un signal → mort cellulaire (cellule infectée ou cancéreuse) Comment?

Thérapie Génique Comment ? = « taxis géniques » = « transporteurs » Page 32 Comment ? En construisant des vecteurs de transfert de gènes = « taxis géniques » = « transporteurs »

Thérapie génique Traitement de quelles maladies ? Page 32 Traitement de quelles maladies ? Maladies héréditaires monogéniques L’hémophilie Myopathies Autres maladies ?

Thérapie génique Traitement de quelles maladies ? Page 32 Traitement de quelles maladies ? Maladies héréditaires monogéniques L’hémophilie Myopathies Autres maladies ? Maladies acquises

Thérapie génique Traitement de quelles maladies ? Page 32 Traitement de quelles maladies ? Maladies héréditaires monogéniques L’hémophilie Myopathies Autres maladies ? Maladies acquises - cancers - maladie de Parkinson

Thérapie Génique Les étapes (4): Page 32 Les étapes (4): Isoler et cloner le gène d’intérêt thérapeutique Réaliser un vecteur

Thérapie Génique Réaliser un vecteur: Etape A: Page 32 Réaliser un vecteur: Etape A: Création d’une lignée cellulaire d’encapsidation

Thérapie Génique Page 33 A: Réalisation d’une lignée cellulaire d’encapsidation: Pol = gène codant pour la synthèse d’enzymes (transcriptase inverse) Gag = gène codant pour les protéines de la capside Env = gène codant pour la synthèse des protéines de l’enveloppe

Thérapie Génique Réaliser un vecteur: Etape A: Page 33 Réaliser un vecteur: Etape A: Création d’une lignée cellulaire d’encapsidation Etape B: Modifications des virus → non pathogènes = sécurisés

Thérapie Génique B: modifications des virus: On leur enlève les gènes nécessaires à leur réplication: Pol = gène codant pour la synthèse d’enzymes (transcriptase inverse) Gag = gène codant pour les protéines de la capside Env = gène codant pour la synthèse des protéines de l’enveloppe

Thérapie Génique B: modifications des virus: Page 33 B: modifications des virus: Remplacer gènes pol, gag et env par le gène thérapeutique → génome rétroviral (ARN) est désarmé

Thérapie Génique Réaliser un vecteur: Etape A: Page 33 Réaliser un vecteur: Etape A: Création d’une lignée cellulaire d’encapsidation Etape B: Modifications des virus → non pathogènes = sécurisés Etape C: Infection Ȼ d’encapsidation avec le virus modifié

Thérapie Génique Virus recombinants non pathogènes = VECTEUR Page 33 Infection Ȼ d’encapsidation avec le virus modifié : Virus recombinants non pathogènes = VECTEUR

Thérapie Génique Les étapes (4): Page 33 Les étapes (4): Isoler et cloner le gène d’intérêt thérapeutique Réaliser un vecteur Administration d’un VECTEUR (protocole)

Thérapie Génique Page 34 Administration du VECTEUR: 3 protocoles

Prélèvement de Ȼ défectueuses Thérapie Génique Page 34 Administration du VECTEUR: 3 protocoles Organisme Prélèvement de Ȼ défectueuses In vitro = ex vivo Sang

Thérapie Génique Administration ex vivo ou in vitro d’un vecteur Page 34 Administration ex vivo ou in vitro d’un vecteur Utilisée pour les Ȼ faciles à prélever Ȼ sanguines

Thérapie Génique Administration du VECTEUR: 3 protocoles In situ Sang Page 34 Administration du VECTEUR: 3 protocoles In situ Organisme Sang Organes

Thérapie Génique Administration in situ d’un vecteur Page 34 Administration in situ d’un vecteur Au sein du tissu cible directement Mucoviscidose (aérosol → bronches) Tumeur du cerveau Dystrophie musculaire (muscle) Gangrène sénile

Thérapie Génique Administration du VECTEUR: 3 protocoles Page 34 Administration du VECTEUR: 3 protocoles In vivo = direct Organisme Sang Organes

Thérapie Génique Administration in vivo d’un vecteur Page 34 Administration in vivo d’un vecteur Circulation sanguine → cellules cibles pas de tests concluants

Thérapie Génique Les étapes (4): Page 34 Les étapes (4): Isoler et cloner le gène d’intérêt thérapeutique Réaliser un vecteur Administration d’un VECTEUR (protocole) Vérifier l’intensité et la durée de l’expression du gène thérapeutique + éventuels effets 2°

Thérapie Génique Aujourd’hui Page 34 Aujourd’hui La thérapie génique est toujours expérimentale

Thérapie génique Elaboration de vecteurs efficaces et sûrs