L’analyse d’ADN et la génomique Pages 20- 21 Techniques de préparation d’échantillons homogènes d’ADN (copies) / ok Clonage d’un gène humain Celui-ci varie-t-il d’une personne à l’autre? Certains de ses allèles sont-ils liés à une maladie héréditaire? Où et quand est-il exprimé dans l’organisme? Quel est son emplacement dans le génome? Evolution COMMENT ?
Génomique CONNAÎTRE séquence nucléotidique du gène Page 21 CONNAÎTRE séquence nucléotidique du gène Individus même espèce Espèces différentes CONNAÎTRE séquence du génome Ensemble de gènes Interactions
Analyse des fragments de restriction (variations) Page 21 Idée Détecter indirectement certaines différences de séquences nucléotidiques au niveau de l’ADN.
Analyse des fragments de restriction (variations) Page 21 Principe Trier des fragments d’ADN (taille) résultant du découpage d’une longue molécule d’ADN par une enzyme de restriction.
Analyse des fragments de restriction (variations) Page 21 Déroulement: Echantillons de gènes clonés et purifiés
Analyse des fragments de restriction (variations) Page 21 Déroulement
Analyse des fragments de restriction (variations) Page 21 Déroulement
Analyse des fragments de restriction (variations) Page 22 Possibilité d’effectuer le même genre de comparaison sans effectuer de clonage génique Génome entier En combinant l’électrophorèse sur gel et l’hybridation des acides nucléiques
Buvardage de Southern Page 22
Etape n°1 (enzyme de restriction) Page 22
Etape n°2 (électrophorèse) Page 22
Etape n°3 (Southern) Page 22
Etape n°4 (hybridation) Page 22
Etape n°5 (autoradiagraphie) Page 22
Buvardage de Southern Applications Localiser une séquence d’ADN Page 23 Applications Localiser une séquence d’ADN Etudier l’ADN non codant (majeure partie du génome des Animaux et des Végétaux) Existe-t-il entre les séquences non codantes des différences analogues à celles qui existent entre les allèles des gènes?
Etude de l’ADN non codant Pages 22- 23 OUI, de nombreuses différences existent. Les séquences d’ADN des chromosomes homologues présentent des variantes. Ces variations = polymorphismes de taille des fragments de restriction ou PTFR Très abondants
Carte génétique