BTS DIETETIQUE 1 TD DE BIOCHIMIE TD 5 : LES AMINOACIDES

Exercice 1 : Vrai ou faux Spectre d’absorbance des acides aminés aromatiques

Exercice 1 : Vrai ou faux Etats de la glycine pH Forme cationique A+ pHi pH H3O+ H2O H3O+ H2O Forme cationique A+ Zwitterion A Forme anionique A–

pH [A+] = [A] [A] = [A–] A+ A A– Forme cationique Zwitterion 50 100 [A+] = [A] [A] = [A–] A+ A A– pHi pH H3O+ H3O+ H2O H2O H3O+ H3O+ H2O H2O Forme cationique Zwitterion Forme anionique A+ A A–

pKa = pH de demi-ionisation des fonctions ionisables % forme pH = pKa1 pH = pKa2 [A+] = [A] [A] = [A–] 50 100 A+ A A– pHi pH pKa = pH de demi-ionisation des fonctions ionisables Si pH = pKa1  [COOH] = [COOH] Si pH = pKa2  [NH2] = [NH3+]

Exercice 4 : Electrophorèse Zone de dépôt Papier – + Tampon pH = 6 DÉPOT Cathode Anode G +

Exercice 6 : Analyse peptide Acides aminés HYDROLYSE TOTALE Ct Nt Détermination Nt et Ct Protéine Oxydation S–S DENATURATION

LIBERATION DE TOUS LES AA Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode de Sanger (au FDNB) H2N COOH FDNB HN COOH DNP HCl LIBERATION DE TOUS LES AA HN DNP SEUL AA Nt EST MARQUE

Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode d’Edman H2N COOH PITC PITC PTC PITC PITC PITC PITC PITC

Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode d’Edman H2N COOH PITC PITC PITC PITC PITC PITC

Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode d’Edman H2N H2N COOH PITC PITC PITC PITC PITC PITC

Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode d’Edman H2N H2N COOH PITC PITC PITC PITC PITC

Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode d’Edman H2N H2N H2N COOH PITC PITC PITC PITC PITC

Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode d’Edman H2N H2N H2N COOH PITC PITC PITC PITC

Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Méthode d’Edman DETECTEUR H2N H2N H2N H2N COOH MÉTHODE RÉCURRENTE PITC PERMET LE SÉQUENÇAGE PITC PITC PITC

Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Aminopeptidase DETECTEUR H2N COOH

Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Aminopeptidase DETECTEUR H2N H2N COOH

Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Aminopeptidase DETECTEUR H2N H2N H2N COOH

Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de N-terminal Aminopeptidase DETECTEUR H2N H2N H2N H2N COOH METHODE RECURENTE LENTE AVEC CERTAINS AA

Exercice 6 : Séquence Mise en évidence de C-terminal Carboxypeptidase Dégradation de la protéine par le Ct

Exercice 6 : Analyse peptide Acides aminés HYDROLYSE TOTALE Ct Nt Détermination Nt et Ct Protéine Oxydation S–S SEQUENCAGE DENATURATION TRYPSINE CHIMOTRYPSINE Arg ou Lys Phe, Tyr, Trp