Cas cliniques SAMPIL Blocage Embryonnaire Dr Frédéric LAMAZOU Hôpital Antoine Béclère Clinique Pierre Cherest Dr. Frida ENTEZAMI Unité AMP Eylau-La Muette

Mme Et Mr M. 23 ans ATCD 0 G0P0 Infertilité primaire depuis 38 mois Cycles : 26j Bilan J3 FSH : 6,1 LH: 5,5 E2: 45 AMH: 1,67 CFA: 19 fibrome intersticiel latéral droit de 27,2 x 25 x 26,7 mm sans effet de masse sur la cavité. Mur de sécurité entre le fibrome et la cavité de 7,4 mm 31 ans ATCD: Syphilis traitée Bilan V: 1,0 N: 69 M/ml Mob tot: 55% FT: 10% TMS: 6 750 000

Mme et Mr M. Prise en charge IIU 1: FSH 75 UI/j J3 + cetro: 3 follicules matures E2 838 LH 1,6 Pro 0,4 : NSMI : 2,31  0 Grossesse IIU 2: FSH 50 UI/J J4 + cetro: 2 follicules matures E2 531 LH 1,8 Prog 0,2: NSMI 19,92  0 Grossesse IIU 3: FSH 50 UI/J J3 + cetro: 2 follicules matures + 1 intermédiaire E2 445 LH 6,3 Prog 0,5 NSMI 2,5  0 grossesse  Passage en FIV + ICSI: Protocole DT 0,1 long MNP 225UI/J

J Stim 1 6 8 11 Oestradiol 23 0,1 0,4 775 1,3 0,4 1484 1,8 0,4 5639 2,7 0,7 LH Progest 14 13 x 2 11 8 x 3 19 17 16 15 x 2 Ovaire droit 26 17 16 x 2 15 x 4 14 x 2 11 14 12 11 10 x 5 Ovaire gauche Endom 12,6 16,5

Mme M et Mr M. Quelle décision prenez-vous? Annulation pour risque d’OHSS Déclenchement + transfert J2/J3 Déclenchement + transfert J5 Déclenchement + freeze all J5

J Stim 1 6 8 11 Oestradiol 23 0,1 0,4 775 1,3 0,4 1484 1,8 0,4 5639 2,7 0,7 LH Progest Déclenchement + Freeze all J5 innohep 3500 semaines Cabergoline 14 13 x 2 11 8 x 3 19 17 16 15 x 2 Ovaire droit 26 17 16 x 2 15 x 4 14 x 2 11 14 12 11 10 x 5 Ovaire gauche Endom 12,6 16,5

Mme M et Mr M. ICSI 1: 14 ovocytes 4 matures (3 immatures, 7 AT) Sperme: V 1,8 N 17,6 M/ml Mob a+b 30% 4 2PN à J1 J3: 812/ 712/ 423 / 223 J5 tous les embryons sont bloqués  Pas de congélation

Mme et MR M. Pourquoi les embryons ont bloqués? Qualité ovocytaire? Qualité spermatique ?

Trouble shooting au laboratoire Conditions de culture? Indicateurs bio (Tx fécondation, Blocage zygote, Fragmentation embryonnaire, Tx blastualtion) Cas isolé? Matériel (Equipements, Milieux) Métrologie Environnement Opérateur Embryon? Morphologie, fragmentation, cinétique de développement Ovocytes? Cohorte, maturité, dysmorphie, vacuoles, cytoplasme Sperme? Paramètres du jour, tératospermie, qualité du noyau

Mme et Mr M. Faites vous des explorations supplémentaires? Test pré-IMSI? Nouveau bilan J3? Autre?

Mme M. et Mr M. Que faites vous? Reprise DT 0,1 long (même protocole) Menopur 225 (même dose)? Reprise DT 0,1 long (même protocole) Menopur 150? Reprise DT 0,1 long FSHr 150 UI ou 225 UI? Reprise Antagoniste FSHr 125-150 UI ? Reprise Antagoniste FSHr 225 UI? Reprise Antagoniste Menopur 150 UI? Reprise Antagoniste Menopur 225 UI? Arrêt de la prise en charge?

J Stim 1 6 8 11 Oestradiol 678 2,5 0,4 1707 1,6 0,2 4181 2,7 0,7 LH Progest 12 x 2 11 10 x 5 9 x 2 15 12 x4 11 10 x 5 Ovaire droit 26 16 15 x 4 14 x 4 11 13 x 3 12 11 x 2 9 Ovaire gauche Endom 10,5 17,1

Mme M et Mr M. Quelle décision prenez-vous? Annulation pour risque d’OHSS Déclenchement + transfert J2/J3 Déclenchement + transfert J5 Déclenchement + freeze all J5

Mme M et Mr M. ICSI 1bis: 22 ovocytes 8 matures (10 immatures, 4 AT) Sperme: V 1,8 N 22,4 M/ml Mob a+b 50% 6 2PN à J1 J2 : 411  transféré J3: 811/ 821/ 711  vitrifiés

Mme M et Mr M. ICSI 2: 22 ovocytes 8 matures Sperme: V 1,8 N 22,4 M/ml Mob a+b 50% 6 2PN à J1 J2 : 411  transféré J3: 811/ 821/ 711  vitrifiés  0 grossesse

Mme M. et Mr M. TEC en cycle naturel SET  Grossesse évolutive

Mme I. et Mr C. 34 ans Tabac : occasionnel Médicaux : Lymphome de Hodgkin il y a 14 ans protocole ABVD Hypothyroïdie sous levothyrox   Chirurgicaux : Naevus Dents de sagesse Gynécologiques : Aménorrhée 9 mois après la chimio/radioT Cycles : 30j Ménométrorragies : Dysménorrhée : + Dyspareunie : 0 Endométriose :  0 Familiaux : 0 Obstétricaux : G0P0 Infertilité primaire depuis 2 ans et demi 35 ans Tabac : sevré depuis 3 ans Médicaux : 0 Chirurgicaux : ortho Urologiques : 7 interventions epispadias dans l’enfance et ectopie testiculaire (14 ans la dernière intervention) Familiaux : 0

Mme I. et Mr C. Bilan J3 6 IIU  0 grossesse FSH 7,2 LH 3,4 E2 20 AMH 2,62 CFA 14 6 IIU  0 grossesse Passage en FIV Protocole DT 0,1 long MNP 300UI/j Mr FT 14% TMS 27,67

J Stim 1 6 8 11 Oestradiol 388 0,6 0,5 1226 1,2 0,1 1945 1,5 0,5 LH Progest 15 13 x 2 12 x 2 11 10 18 17 16 15 14 11 Ovaire droit 26 18 15 12 11 x2 12 11 8 7 Ovaire gauche Endom 8,9 8,7

Mme I. et Mr C. ICSI 1 12 ovocytes 3 matures (5 immatures, 4 ZPV) 3 2PN à J1 3 embryons non évolutifs à J3 (bloqués à 3 cellules)

Mme I. et Mr C. Faites vous des explorations supplémentaires? Test pré-IMSI? Nouveau bilan J3? Autre?

Mme I. et Mr C. Que faites vous? Reprise DT 0,1 long (même protocole) Menopur 300 (même dose)? Reprise DT 0,1 long (même protocole) Pergoveris 300? Reprise DT 0,1 long FSHr 300 UI? Reprise Antagoniste FSHr 300UI? Reprise Antagoniste Menopur 300 UI? Arrêt de la prise en charge?

Mme I. et Mr C. Reprise en antagoniste Pergo 300UI/j

J Stim 1 6 8 10 13 Oestradiol 370 1,8 0,3 685 1,6 0,4 1333 1,4 0,5 3093 1,1 1,4 LH Progest 15 11 x 2 10 x 3 18 16 14 13 12 24 18 x 2 17 x 2 15 Ovaire droit 26 22 20 18 15 x 2 14 12 17 x 2 14 12 11 14 12 11 10 Ovaire gauche Endom 7,8 7,8 8,4

Mme I. et Mr C. ICSI 1 bis 8 ovocytes 8 matures 8 2PN à J1 J2 DET: 411 412 6 autres embryons bloquent à J3

Mme I. et Mr C. ICSI 1 bis 8 ovocytes 8 matures 8 2PN à J1 J2 DET: 411 412 6 autres embryons bloquent à J3  Grossesse biochimique 487UI

Mme I. et Mr C. Que faites vous? Reprise DT 0,1 long (même protocole) Menopur 300? Reprise DT 0,1 long (même protocole) Pergoveris 300? Reprise DT 0,1 long FSHr 300 UI? Reprise Antagoniste FSHr 300UI? Reprise Antagoniste Menopur 300 UI? Arrêt de la prise en charge?

Mme I. et MR C. Reprise même protocole E2 Antagoniste Pergoveris 300UI/j

J Stim 1 6 8 10 11 Oestradiol 318 1,6 0,2 1005 1,6 0,5 1367 1,6 0,5 LH Progest 12 11 x 3 10 9 16 15 x 4 13 12 x 2 11 Ovaire droit 26 16 15 x 2 14 x 2 11 10 x 3 8 Ovaire gauche Endom 7,5 8,9 hcg

Mme I. et Mr C. ICSI 2: 14 ovo 7 matures (5 immatures, 2 ZPV) 3 2PN à J1 3 emb J2: 422/322/212  TET  0 grossesse

Mr I. et Mr C. 1 idée…?

Mme I. et Mr C. Mise sous DHEA 75 mg/j pendant 3 mois Reprise antagoniste Gonal F de J1 à J7 puis Pergoveris J8 à J11 Sans provames en phase lutéale le cycle précédent Double déclenchement décapeptyl 0,1 + ovitrelle Transfert à 2PN

J Stim 1 6 9 11 Oestradiol 226 0,5 0,2 1265 1,2 0,8 2841 1,4 1,2 LH Progest 16 15 14 13 x 4 12 11 x 2 20 18 16 x 3 14 13 x 3 11 Ovaire droit 26 19 17 x 2 16 13 12 16 x 2 13 x 2 Ovaire gauche Endom 7,8 8,0

Mme I. et Mr C. ICSI 3: 17 ovocytes 15 matures 12 2PN à J1 J1 TET 3 x 2PN Vitrification de 9 2PN

Mme I. et Mr C. ICSI 3: 17 ovocytes 15 matures 12 2PN à J1 J1 TET 3 x 2PN Vitrification de 9 2PN  Grossesse singleton évolutive

Etiologies possibles du blocage embryonnaire Ovocyte? Baisse de la qualité chez OPK et hyperstimulation Qualité de la cohorte Facteurs épigénétiques, métaboliques, aneuploidie, ROS Sperme? aneuploidie Conséquences de l’ICSI: allongement du cycle cellulaire, blocage à l’activation du génome embryonnaire ROS et compaction de la chromatine Embryon? Absence d’activation du génome embryonnaire à J3 Turnover métabolique ( Quiescent = viable) Aneuploidie Conditions de culture? pH, osmolarité, température Toxiques: VOC,… ROS (raccourcissement télomères, dysfonction mitochondriale)

Mme C et Mr M Femme: 34 ans, ATCD 0, BH J3 N, AMH 2.7, CFA 6+8, toxiques 0 Homme: 36 ans, ATCD 0, sperme: 5 M/ml, mob 10+5, 7% N, tabac 1 paquet/j, peintre en bâtiment Infertilité primaire => ICSI

Mme C et Mr M ICSI 1 Protocole long lutéal agoniste + déclenchement Ovitrelle 12 ovocytes dont 11 matures 7 2PN dont 4 blocage 2 T à J2 (423, 223) Pas de grossesse

Mme C et Mr M ICSI 2 Protocole antagoniste + déclenchement Ovitrelle 12 ovocytes dont 10 matures 8 2PN dont 3 blocage 2 T J3 (623, 723) Surnuméraires bloqués à partir de J3 Pas de grossesse

Mme C et Mr M Avant ICSI 3 : DCS 45% DFI 58% Hygiène de vie (arrêt du tabac et port de masque au travail) et traitement antioxydant pendant 6 mois Contrôle post traitement en pré ICSI DCS 12% DFI 7%

Mme C et Mr M ICSI 3 Protocole antagoniste + déclenchement Ovitrelle 10 ovocytes dont 10 matures 9 2PN sans blocage Qualité embryonnaire satisfaisante => CP 1 T J5 et 3 blastos vitrifiés Grossesse et accouchement!