Recherche de l’origine de la contamination du patient

Perfusion liquide avec analgésique Nettoyage de la cicatrice Contexte Le patient victime de l’infection était hospitalisé pour une intervention chirurgicale. Durant cette hospitalisation il a reçu chaque jour différents soins et traitements : Perfusion liquide avec analgésique Nettoyage de la cicatrice Cathéter contaminé ? Liquide de perfusion contaminé ? Eau physiologique pour le nettoyage contaminée ? Compresses contaminées ?

1. Recherche de contaminants dans les compresses

Materiels sur le poste de travail Sachets de compresses à tester Gélose en boite contact

1.1. Ouvrir un sachet de compresse. 1.2. Appliquer sur la compresse, une gélose « contact » en boite de Pétri. Exercer une pression douce et laisser en contact environ 10 secondes. Attention : l’ouverture des tubes et des géloses est réalisée en asepsie autour du bec Bunsen

1. 3. Refermer la boite « contact » 1.3. Refermer la boite « contact ». S’aider éventuellement d’une pince pour décoller la compresse. 1.4. Ecrire sur la tranche de la boite “Boite 1” et le numéro de votre paillasse. Incuber 24h à 37°C.

2. Recherche de contaminants dans l’eau physiologique stérile

Materiels sur le poste de travail Eau physiologique à tester Gélose Pipette stérile Rateau pour étalement

2.1. Ouvrir le tube d’eau physiologique noté « PW », puis avec une pipette stérile, prélever environ 0,5 mL 2.2. Déposer 2 à 3 gouttes sur la surface d’une gélose nutritive en boite de Pétri notée « G1 ». Attention : l’ouverture des tubes et des géloses est réalisée en asepsie autour du bec Bunsen

2.3. A l’aide d’un râteau stérile, étaler les gouttes de liquide à la surface de la gélose Etaler sur toute la surface de la gélose. Ne appuyez pas trop fort pour éviter d'endommager la gélose 2.4. Refermer le couvercle de la boite de Pétri. Ecrire sur la tranche de la boite « Boite 2 » et le numéro de votre paillasse. Incuber 24h à 37°C.

3. Recherche de contaminants dans le catheter

Materiels sur le poste de travail Ecouvillon Gélose Pince inox Catheter à tester

3.1. Saisir le catheter avec une pince stérile, à environ 1 cm de l’extrémité. 3.2. Avec un écouvillon stérile, frotter l’intérieur du catheter près de son extrémité Attention : l’ouverture des tubes et des géloses est réalisée en asepsie autour du bec Bunsen

3.3. Avec l’écouvillon, réaliser un étalement à la surface d’une gélose nutritive en boite de Pétri notée « G2 ». Réaliser des stries serrées Etaler sur toute la surface de la gélose. Ne appuyez pas trop fort pour éviter d'endommager la gélose. 3.4. Refermer le couvercle de la boite de Pétri. Ecrire sur la tranche de la boite « Boite 3 » et le numéro de votre paillasse. Incuber 24h à 37°C

4. Recherche de contaminants dans le liquide de perfusion

Materiels sur le poste de travail Système de filtration sous pression Filtre pour bactéries (préinstallé sur le système) Liquide de perfusion à tester Gélose (en boite de 55mm)

Principe de la détection bactérienne par filtration sur membrane

Filtre pour bactérie: vue de la face supérieur 4.1. Sur le système de filtration sous pression préinstallé, vérifier la présence d’un filtre pour bactéries Filtre pour bactérie: vue de la face supérieur 4.2. Verser le contenu du tube de solution de perfusion noté « D » sur le filtre Eviter de mettre des gouttes sur les parois Attention : la manipulation est réalisée en asepsie autour du bec Bunsen

4.3. Mettre en service la filtration sous pression, jusqu’à filtrer la totalité du liquide Après la filtration, arrêter l’eau pour stopper l’aspiration

4.4. Démonter la partie haute du système de filtration, de façon à accéder au filtre 4.5. Avec une pince stérile, récupérer le filtre et le déposer immédiatement sur une petite gélose nutritive de 55 mm.

Après dépôt, appliquer une légère pression avec la pince pour permettre une bonne adhésion du filtre sur la gélose. 4.6. Refermer le couvercle. Ecrire sur la tranche de la boite « Boite 4 » et le numéro de votre paillasse. Incuber 24h à 37°C.

Quelle est l’origine probable de la contamination ? 5. Lecture des résultats Le deuxième jour, après incubation, observer la surface des différentes géloses à la recherche de colonies bactériennes. Quelle est l’origine probable de la contamination ?