Pasteurellaceae : Pasteurella Haemophilus dimanche 26 mars 2017

1. Morphologie - Culture - Espèces aspect microscopique (Gram - MEB) Coccobacilles Gram - Immobiles caractères oxydase type respiratoire dimanche 26 mars 2017

Différentes Pasteurellaceae Genre Pasteurella (espèce principale multocida) Genre Haemophilus influenzae parainfluenzae ducreyii Etc… (Actinobacillus) dimanche 26 mars 2017 4

2. Habitat Habitat des Pasteurellaceae Ce sont des parasites des muqueuses animales y compris humaines Exemple pour Haemophilus : dimanche 26 mars 2017

3. pouvoir pathogène Pouvoir pathogène des Haemophilus influenzae On a longtemps cru que H. influenzae était l’agent de la ……………… Cette bactérie est : Agent de surinfection après une infection virale de ……………………… avec ……………………………… Agent de métastases septique et en particulier de ……………………… (sérovar b) dimanche 26 mars 2017 6 6

3. pouvoir pathogène Pouvoir pathogène de Haemophilus ducreyii C’est l’agent d’une IST, le CHANCRE MOU. (ulcération d’une muqueuse en particulier sur le pénis, sans induration, provoquant des démangeaisons, souvent inapparente chez la femme et guérissant spontanément) Son % d’homologie DNA/DNA avec les autres Haemophilus est de 4%… Il sera donc déclassé un jour ! Culture quasiment impossible… dimanche 26 mars 2017 7 7

3. pouvoir pathogène Pouvoir pathogène de Pasteurella Pasteurella est responsable du choléra des poules… Et de nombreuses infections cutanées liées à des MORSURES D’ANIMAUX dimanche 26 mars 2017 8 8

4. Isolement Gélose au sang ORDINAIRE Pasteurella : culture sur GO Haemophilus : pas de culture sur GO Gélose au sang FRAIS Pasteurella : culture sur GS frais Haemophilus : culture très difficile sur GS frais Gélose au sang CUIT = Gélose au sang frais chauffée à 80°C (teinte chocolat) http://www.microbe-edu.org/ dimanche 26 mars 2017

4. Isolement Différence entre Gélose au sang FRAIS et sang CUIT NAD : quasiment absent dans la gélose au sang frais car : NAD hydrolase plasmatique élimine le NAD (mais un peu de NAD peut provenir des hématies selon leur origine. Toujours absent dans les milieux AUTOCLAVÉS. HÉMINE : ce coenzyme provient de l’hémoglobine et n’est donc présent que dans les hématies. Absent dans les milieux sans sang… dimanche 26 mars 2017 10 10

4. Isolement La gélose CHOCOLAT et la gélose CHOCOLAT ENRICHIE (= + Polyvitex) Gélose CHOCOLAT = gélose riche (type Columbia) + hémoglobine autoclavée. Elle contient donc : ……………………… Polyvitex® (biomérieux) : additif stérilisé par filtration contenant : glucose fer III acides aminés (Cys, Gln) bases azotées (A, G) coenzymes (NAD, thiamine…) Gélose CHOCOLAT ENRICHIE Elle contient donc : ………………………………………… dimanche 26 mars 2017 11 11

5. Identification 5.1. Besoins en facteurs de croissance a. Méthodes des disques On dispose : d’une gélose Columbia de disques contenant du NAD (facteur V) de l’hémine (facteur X) ou du mélange des deux dimanche 26 mars 2017

5. Identification Méthodes des disques X+V dimanche 26 mars 2017 13 NAD (V) X+V Hémine X dimanche 26 mars 2017 13 13

5. Identification Méthodes des disques X+V dimanche 26 mars 2017 14 NAD (V) X+V Hémine X dimanche 26 mars 2017 14 14

5. Identification Méthodes des disques X+V dimanche 26 mars 2017 15 NAD (V) X+V Hémine X dimanche 26 mars 2017 15 15

5. Identification Méthodes des disques X+V dimanche 26 mars 2017 16 NAD (V) X+V Hémine X dimanche 26 mars 2017 16 16

5. Identification Méthodes des disques X+V dimanche 26 mars 2017 17 NAD (V) X+V Hémine X dimanche 26 mars 2017 17 17

5. Identification Méthodes des disques dimanche 26 mars 2017 18 18

5. Identification 5.1. Besoins en facteurs de croissance b. Méthodes des boîtes On dispose : d’une gélose Columbia d’une gélose Columbia + polyvitex d’une gélose Chocolat d’une gélose Chocolat + polyvitex (ou au sang cuit, gélose qui peut être le réisolement de la souche) dimanche 26 mars 2017 19 19

5. Identification 5.1. Besoins en facteurs de croissance b. Méthodes des boîtes dimanche 26 mars 2017 20 20

Culture parasite de Haemophilus influenzae 5. Identification 5.1. Besoins en facteurs de croissance c. Syntrophie contaminant Gélose chocolat sans PV Culture parasite de Haemophilus influenzae dimanche 26 mars 2017 21 21

5. Identification 5.1. Besoins en facteurs de croissance c. Syntrophie On dispose : d’une gélose Columbia et/ou d’une gélose Chocolat d’une souche excrétrice de NAD (Staphylococcus aureus ou Enterococcus faecalis) dimanche 26 mars 2017 22 22

5. Identification 5.1. Besoins en facteurs de croissance c. Syntrophie dimanche 26 mars 2017 23 23

5. Identification 5.1. Besoins en facteurs de croissance c. Syntrophie dimanche 26 mars 2017 24 24

5. Identification 5.2. galerie biochimique : galerie API NH Haemophilus : galerie API NH Pasteurella : galerie API 20E dimanche 26 mars 2017

6. Traitement et antibiogramme Antibiothérapie Antibiogramme : Quel milieu ? Recherche de la bétalactamase CONSTITUTIVE dimanche 26 mars 2017

7. Prophylaxie Vaccination des nouveaux-nés Les méningites à Haemophilus influenzae b surviennent essentiellement chez les nouveaux-nés. l’Ag capsulaire b est polyosidique les enfants de moins de 2 ans ne fabriquent pas efficacement d’Ig contre les polyosides… le vaccin moderne a donc rendu immunogène le polyoside en le fixant sur une protéine, la protéine choisie est déjà injectée au nourrisson dans un autre vaccin dimanche 26 mars 2017

7. Prophylaxie Vaccin = Polyoside capsulaire b fixé covalament sur Anatoxine diphtérique dimanche 26 mars 2017 28 28

Merci de votre attention !!!! Réalisé par Jean-Noël Joffin Mars 2010 Au laboratoire de SAINT BRICE ! Critiques : jnjoffin@wanadoo.fr dimanche 26 mars 2017