HYGIENE ET SECURITE, ORGANISATION AU LABORATOIRE DE MICROBIOLOGIE

RISQUE BIOLOGIQUE 3 grands risques au laboratoire: RISQUE CHIMIQUE RISQUE PHYSIQUE

LE RISQUE BIOLOGIQUE Tout local présentant ce risque doit être signalé par le pictogramme suivant (conformément à l'arrêté du 4/11/1993 sur l'affichage , paru au J.O. du 17/12/1994) Seul le personnel autorisé peut pénétrer dans ce type de local.

Les risques d’origine biologique au laboratoire CONTAMINATION DES PERSONNES CONTAMINATION DES LOCAUX DISSEMINATION MICROORGANISMES CONTAMINATION DES MATERIELS

Nature du danger des produits chimique LE RISQUE CHIMIQUE Nature du danger des produits chimique

Tableau alimentation électrique LE RISQUE PHYSIQUE flamme gaz électricité explosion Incendie brûlures électrocution Vannes gaz Tableau alimentation électrique Extincteur et Douche

ORGANISATION: fiches techniques

Fiche PPB 1: Règles de base Respecter les bonnes pratiques de laboratoire   consignes fiche PBP justifications AVANT D’ENTREE DANS LA SALLE Jeter chewing-gum ou autre aliment en cours de consommation Déposer les vêtements de ville dans le vestiaire, ou à l’écart des zones à risque (éteindre téléphone portable) Attacher les cheveux longs vers l’arrière Oter le bijoux des doigts et poignets Eviter contamination digestive Eviter contamination de l’environnement Eviter risque inflammation et contamination du produit manipulé Eviter le risque de contamination du produit

AVANT LE DEBUT DE LA MANIPULAT° Fermer les portes et les fenêtres   AVANT LE DEBUT DE LA MANIPULAT° Fermer les portes et les fenêtres Mettre une blouse en coton, couvrant avant bras et genoux, fermée (blouse réservée au laboratoire) Protéger les blessures non cicatrisées par un pansement ou un gant si blessure importante Nettoyer et désinfecter la paillasse N° 1 Se laver les mains à l’aide d’un désinfectant N° 2 Lire le protocole et réfléchir à l’organisation du TP Eviter les courants d’air et l’extinction de la flamme du bec Eviter le risque inflammable, elle peut être javellisée et laver à 90°C Eviter contamination manipulateur élimination des microorganismes élimination des microorganismes sur la peau Eviter les déplacements inutiles

Avoir des gestes mesurés et contrôlés Se déplacer le moins possible   PENDANT LA MANIPULAT° Avoir des gestes mesurés et contrôlés Se déplacer le moins possible  Avoir une poste de travail bien organisé Marquer les produits, tubes… N°3 Ne jamais pipeter à la bouche Ne jamais rien porter à la bouche (doigts, stylo, aliments, boisson, chewing-gum..) Limiter l’usage d’objets coupant piquant Ne pas toucher les objets personnels, Ne pas serrer la main des Visiteurs Toujours travailler dans la zone stérile du bec bunsen Ne pas parler en manipulant Eviter les courants d’air et la formation d’aérosols Eviter les confusions et les accidents Eviter la contamination digestive Eviter la contamination cutanéo-muqueuse Eviter la contamination à l’extérieur du laboratoire Eviter contamination du produit manipulé

Stérilisé convenablement le matériel non jetable contaminé N°4   APRES MANIPULAT° Stérilisé convenablement le matériel non jetable contaminé N°4 Eliminer convenablement les matériels et produits contaminés jetable Nettoyer et désinfecté la paillasse Ranger la blouse à l’écart des vêtements de ville Se laver les mains Eviter les contaminations Eviter Contamination des autres usagers de la salle Eviter Contamination des autres usagers de la salle Eviter la dissémination des microorganismes à l’extérieur du laboratoire   Eliminer les microorganismes

  EN CAS D’ACCIDENT Savoir réagir en cas d’accident N°5

Les interdits au laboratoire

Fiche PPB 2: Entretien de la paillasse Nettoyage et désinfection lorsqu'il n'y a pas de contamination apparente  Ils peuvent être réalisés par passage sur la paillasse d'un produit détergent désinfectant en suivant les indications du fabricant (certains allient rapidité et efficacité). Le 3 en 1 utilisé est un produit : - Détergent : agent nettoyant qui assure l’élimination des souillures visibles - Désinfectant : agent antimicrobien qui assure l’élimination des souillures microbiennes - Désodorisant

Prédésinfection après contamination accidentelle A chaque fois que du matériel biologique infectieux ou potentiellement infectieux est renversé accidentellement sur la paillasse : Délimiter la zone contaminée. Mettre des gants à usage unique. Absorber le maximum à l'aide d'un papier absorbant éliminé ensuite avec les déchets à risque infectieux. Verser un agent tensioactif en évitant les projections. Essuyer de l'extérieur vers l'intérieur à l'aide d'un papier absorbant éliminé ensuite avec les déchets infectieux. Verser de l'eau de Javel à 3 degrés chlorométriques en recouvrant largement la zone contaminée. Laisser agir 10 à 15 minutes. Essuyer de l'extérieur vers l'intérieur à l'aide d'un papier absorbant éliminé ensuite avec les déchets à risque infectieux comme les gants. Pratiquer ensuite un cycle complet de nettoyage - désinfection de la paillasse.

Fiche PPB 3 : Lavage des mains La finalité du lavage est d'éliminer la flore transitaire (flore cutanée) Il est à réaliser : - après lavage de la paillasse et avant toutes manipulations au laboratoire de microbiologie - à la fin du travail de manipulation - lorsqu'on éternue ou qu'on se mouche - en cas de contact avec le produit analysé - et à la sortie du laboratoire - après avoir enlever les gants

1 - Après avoir retroussé les manches, mouiller les mains 2 - Recueillir une dose de savon liquide

3 - Se savonner 30 secondes environ en insistant sur les espaces interdigitaux, le dos des mains et les poignets 4 - Rincer abondamment

5 - Essuyer les mains avec un essuie-mains jetable 6 - Fermer le robinet avec l'essuie-mains (s’il n’est pas à commande à pied) est l’éliminé dans une poubelle ouverte ou à commande à pédale

ATTENTION ! Ø Au cours du lavage, l'utilisation de brosse à ongles est à exclure car elle est responsable de la formation d'excoriations favorisant la pénétration de contaminants. Ø Pas d'antiseptique, ni de désinfectant pour se laver les mains sauf en cas de contamination accidentelle !!! Ø Pas de mélange de différents produits. 

Fiche PPB 4 : Organisation de la paillasse au laboratoire de microbiologie (dispositif pour droitier) Sa disposition sera toujours la même, de façon à ce que le manipulateur:   · travaille assis, en ayant tout le matériel nécessaire accessible sans avoir besoin de se déplacer · manipule sans que rien ne s'interpose entre lui et la flamme · ne croise jamais les bras pour accéder à un objet   On évitera tout ce qui est inutile (livre, stylo…) dans la zone de travail car tout matériel souillé devra être stérilisé à l'autoclave avant de sortir du laboratoire.

Portoirs de tubes Bocal d’eau de javel Boîtes de Pétri Bec bunsen Lame Poubelle sèche Bocal d’eau de javel Boîtes de Pétri Bec bunsen Portoir des instruments à main : ensemenceurs, pipettes Pasteur, fer à luter, poire, pinces, etc… Lame

· au centre : Le bec Bunsen est en position centrale à 20 cm du bord de la paillasse. · à gauche du bec Bunsen: le ou les portoirs à tubes (tubes à essais stériles, milieux de culture, solutions, eau distillée, eau physiologique, tubes à hémolyse, etc.), les milieux en boîte de pétri, les lames propres... ils seront saisis uniquement à l'aide de la main gauche. · à droite du bec Bunsen: les instruments utilisés pour prélever, ensemencer, effectuer des tests ... (éventuellement rassemblés dans un récipient du type verre à pied). ils seront saisis uniquement à l'aide de la main droite. · derrière le bec bunsen: un peu sur la droite, le bocal d’eau de Javel (à decaz 3 en 1) qui doit se trouver à la limite de la zone stérile, et une poubelle sèche.   Si le manipulateur est gaucher, la position des objets est inversée par rapport au bec Bunsen qui est le centre du poste de travail.

Fiche PPB 5 : Gestion des déchets   Panier tubes NON contaminés Poubelle ordinaire Panier tubes contaminés Poubelle à autoclaver, incinérer Soupière Bocal eau Javel ou 3 en 1 Etat frais x Grands tubes ensemencés Tubes à hémolyse contaminés Boîtes de pétri ensemencées Mini-galerie usagée Tests sur lame (ox, cat, agglu,..) Grands tubes non ensemencés Lames fixées

Fiche PPB 6 : Conduite à tenir en cas d'accident  Rester calme  Donner immédiatement les premiers soins  Appeler ou faire appeler les services de soin et d'urgence  Compléter par un suivi  Déclarer l'accident de travail dans les 24 heures  Traiter les surfaces et les matériels contaminés

THE END…