Evaluation du CyFlow Counter avec les réactifs lyophilisés et du Pima CD4 en zone rurale Djibril WADE LBV-HALD-SENEGAL/IMT-BELGIQUE 6 ème Conférence Francophone.

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1 Evaluation du CyFlow Counter avec les réactifs lyophilisés et du Pima CD4 en zone rurale Djibril WADE LBV-HALD-SENEGAL/IMT-BELGIQUE 6 ème Conférence Francophone sur le VIH, Genève du 25 au 28 Mars 2012

2 Introduction  Numération LT CD4+ : paramètre indispensable suivi PvVIH  Cytométrie en flux : référence pour numération LT CD4+.  coût & exigences  utilisation en routine inappropriée dans pays à ressources limitées  FACSCount : technique référence  Techniques alternatives  Décentraliser suivi PvVIH  Dynabeads, Cytosphères, Guava EasyCD4, Apogee Auto40, Pointcare Now, gamme de Partec CyFlow Counter (CY-S-3022), Pima CD4, etc.

3 Evaluer le CyFlow Counter (CY-S- 3022) avec les réactifs lyophilisés (CD4 Easy Count kit-dry) Evaluer le Pima CD4 en zone rurale Objectifs

4  Cadre et population d’étude:  Région de Ziguinchor (CS Bignona; CS Silence et HR Ziguinchor), Septembre 2011  114 échantillons sang total : 102 VIH-1, 9 VIH-2 et 3 VIH-1+2  Numération des LT CD4+  CyFlow Counter, Pima CD4 et sur FACSCount avec différents opérateurs  CyFlow Counter : salle climatisée au niveau du labo CS Silence  Pima CD4 & FACSCount : salle sans air conditionné avec une température externe 33 - 37°C au niveau du labo HR Méthodologie 1

5  Précision : 10 préparations chacun  CD4 < 200 cellules/µl  CD4 = 300 - 500 cellules/µl  CD4 > 500 cellules/µl  Analyse statistique : logiciel MedCalc 10.0.2.0  Régression de Passing-Bablock  Concordance par Bland-Altman  Similarité de Scott (S = B x 100 / (A+B)/2 )  Sensibilité et spécificité aux seuils de 200 (±10%) et 350 (±10%) Méthodologie 2

6 Résultats: taux de lymphocytes T CD4+ MoyenneMinimumMaximum FACSCount (CD4/mm 3 ) 37811412 CyFlow Counter (CD4/mm 3 ) 33541221 Pima CD4 (CD4/mm 3 ) 35071403 CyFlow Counter < Pima CD4 < FACSCount (NS)

7 CD4 < 200CD4 = 300-500CD4 > 500Moyenne FACSCount (%CV) 5,25%5,95%4,02%5,0% CyFlow Counter (%CV) 9,83%4,07%4,03%6,0% Pima CD4 (%CV) 17,61%10,52%10,76%13,0% Résultats: Valeurs de précision (% CV) FACSCount et CyFlow Counter plus précis que Pima CD4

8 y = 14,5 + 0,83 x ρ c = 0,96ρ c = 0,97 y = 11,5 + 0,88 x Résultats: régression de Passing-Bablok CyFlow Counter & Pima CD4: bonne corrélation FACSCount

9 Résultats: concordance de Bland-Altman CyFlow Counter - FACSCount : B = - 43 CD4/µl (-167 à 81) Pima CD4 – FACSCount : B = - 28 CD4/µl (-148 à 91)

10 S = 97 % (7%) S = 99 % (12 %) Résultats: Similarité CyFlow Counter - FACSCount : S = 97 % (7%) Pima CD4 – FACSCount : S = 99 % (12%)

11 Seuil de 200 CD4/µlSeuil de 350 CD4 /µl CyFlow CounterPima CD4CyFlow CounterPima CD4 Kappa (κ)0,943 0,9470,858 Sensibilité (%)1009810095 Spécificité (%)96979490 Résultats: Agrément clinique

12  Fryland et al., 2006 CyFlow Counter CY-S-3021 / FACSCount: (Malawi)  Précision : CV = 6%  Bonne correlation : R = 0,92 ; y = 16,6 + 0,920 x  Bonne concordance : B = 8,7 cellules/µl  Zijenah et al, 2006 CyFlow Green / FACSCount (Zimbabwé);  Bonne corrélation : R = 0,995 ; y = 1.8 + 0.999 x  Bonne concordance : B = 9 cellules/µl Discussion 1

13  Diaw et al, 2011 : Pima CD4/FACSCount (Dakar)  bonne corrélation : y = 16,7 + 0,87 x ; ρc = 0,93  bonne concordance : B = - 78 cellules/µl  Similarité : S = 95 % (10%)  Sukapirom et al, 2011 : Pima CD4/FACSCount (Bangkok)  bonne corrélation : R² = 0,957; y = 20,7 + 0,85 x  bonne concordance : B = - 54 cellules/µl Discussion 2

14  CyFlow Counter (CY-S-3022) & Pima CD4  résultats fiables de numération LT CD4+ avec bonne corrélation & bonne concordance avec FACSCount  CyFlow Counter & Pima CD4  alternatives cytomètres standards décentralisation suivi PvVIH dans les zones rurales  CyFlow Counter + réactifs lyophilisés  sites effectuant beaucoup (15 à 50) CD4/jour  Pima CD4  sites éloignés effectuant <10 CD4/jour Conclusion

15  DGCD  LBV, Dakar, Sénégal Prof. Souleymane MBOUP et son équipe  Institut de Médecine Tropicale, Anvers, Belgique Prof. Luc KESTENS et son équipe  HR Ziguinchor : Dr Omar KANTE  CS Silence : Jean Philippe DIATTA  CS Bignona : Néné DIATTA Remerciements

16 MERCI DE VOTRE AIMABLE ATTENTION