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TP8 : Mise en évidence de la Respiration cellulaire

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Présentation au sujet: "TP8 : Mise en évidence de la Respiration cellulaire"— Transcription de la présentation:

1 TP8 : Mise en évidence de la Respiration cellulaire

2 1. Equation de la respiration 1) Rappeler quelles sont les cellules pratiquant la respiration Les cellules possédant des mitochondries : cellules eucaryotes. Et quelques bactéries… 2) Rappeler léquation de la respiration, et sa localisation. CO 2 + H 2 O6C 6 H 12 O 6 + O 2 66 Dans les mitochondries. Doc 11 p73 Membrane intérieure Membrane extérieure crête Matrice

3 Photo dune mitochondrie au microscope électronique Membrane externe Membrane interne Crête Matrice

4 1. Equation de la respiration 1) Rappeler quelles sont les cellules pratiquant la respiration Les cellules possédant des mitochondries : cellules eucaryotes. Et quelques bactéries… 2) Rappeler léquation de la respiration, et sa localisation. CO 2 + H 2 O6C 6 H 12 O 6 + O 2 66 Dans les mitochondries. Doc 11 p73 3) Cette équation est une oxydoréduction. Séparez les deux couples oxydant/réducteur de cette équation. C 6 H 12 O 6 / CO 2 O2O2 / H 2 O CO 2 + H 2 O6C 6 H 12 O 6 + O 2 66 ** 12 6 H 2 O +

5 2. Respiration de mitochondries isolées On utilisera deux substrats différents : une solution de pyruvate (ou acide pyruvique : C 3 H 4 O 3 ) et une solution de glucose ( …………….) C 6 H 12 O 6 1) Daprès le document 10 p72, indiquez la réaction chimique qui permet de fabriquer le pyruvate ainsi que sa localisation ? Dans le cytoplasme : Glucose + 2 ADP + 2Pi + 2 R2 Pyruvate + 2 ATP + 2RH 2 C 6 H 12 O 6 + 2ADP + 2Pi + 2R2C 3 H 4 O ATP + 2RH 2 La glycolyse 2) Quel est le problème auquel on tente de répondre au cours de cette expérience ? La respiration a-t-elle besoin de glucose ou de pyruvate?

6 2. Respiration de mitochondries isolées 4. Justifier les étapes du protocole de la préparation des mitochondries. - Utiliser un mortier et de la verrerie sortie du congélateur - Découper en petits morceaux un bout de chou-fleur dans un mortier - Ajouter 10 ml de solution tampon P (pH 7,4) -Broyer à l'aide du pilon (sans sable) pendant 1 min. - Ajouter 20ml de la même solution tampon - Broyer à nouveau 30s. - Filtrer sur 4 à 5 épaisseurs de gaze en pressant (dans un entonnoir), récupérer dans un bécher Eviter la destruction des mitochondries par les enzymes qui ne sont actives quà des température 15° Obtenir des petits morceaux de chou fleur plus facilement broyable. PH qui conservera les mitochondries intactes. Détruire les cellules végétales du chou fleur Récupérer une solution de tampon contenant les mitochondries et retenir par le filtre tous les déchets végétaux (parois, membranes…)

7 2. Respiration de mitochondries isolées 5. Analyser les résultats de votre expérience Graphique présentant le taux de O 2 et de CO 2 en fonction du temps dans une solution de mitochondrie Injection glucoseInjection pyruvate Taux de O 2 Taux de CO 2

8 3) A laide du document 12 p73 représentant les deux phases de la respiration, indiquez les deux équations correspondantes à une oxydation dune part et à une réduction dautre part. 3. Les deux phases de la respiration. C 3 H 4 O 3 + ADP + Pi + R CO 2 + RH 2 + ATP 3 3H 2 O Cycle de Krebs : Phosphorylation oxydative : O 2 + RH 2 + ADP + PiH 2 O + R + ATP ½ n nn Oxydation du pyruvate en CO 2 Dans la matrice : Par la chaîne respiratoire : Réduction du O 2 en H 2 O La chaîne respiratoire transporte les e - de RH 2 à O 2. 4) Estimer pour finir le nombre total de molécules dATP formées pour une molécule de glucose consommée. Par la glycolyse (transformation du glucose en pyruvate) :2 ATP Par le cycle de Krebs (transformation du pyruvate en CO 2 ) : 2 ATP Par la phosphorylation oxydative (transformation du O 2 en H 2 O) : 26 ATP28


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