La présentation est en train de télécharger. S'il vous plaît, attendez

La présentation est en train de télécharger. S'il vous plaît, attendez

S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Techniques de base de la vitroculture Vitroculture et vitrométhodes.

Copies: 1
S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Techniques de base de la vitroculture Vitroculture et vitrométhodes.

Présentations similaires


Présentation au sujet: "S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Techniques de base de la vitroculture Vitroculture et vitrométhodes."— Transcription de la présentation:

1

2 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Techniques de base de la vitroculture Vitroculture et vitrométhodes

3 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Aspects techniques Organisation du laboratoire Préparation des milieux et stérilisation Repiquage en conditions stériles Chambre de culture Laverie

4 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales

5 Conditions de culture

6 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales

7 Stérilisation des explants Ethanol Hypochlorite de sodium ou calcium Peroxyde dhydrogène Nitrate dargent

8 Protocole de stérilisation des explants végétaux Choix de l échantillon 1/ Ethanol 10 s 2/ Ca(OCl) 2 7%, 10 mn 3/ 3 lavages H 2 O stérile Découpage de lexplant et mise en culture

9 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Milieu de culture Eau Agents solidifiants : – agar – phytagel : polymère dorigine bactérienne (acide glucuronique, rhamnose et glucose) translucide !! Interférences avec la kanamycine !! Conditions de culture

10 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Milieu de culture Source de carbone Conditions de culture ? In vitro, la majorité des cultures végétales sont hétérotrophes Choix de la source carbonée Saccharose glucose maltose Cas par cas : substances de croissance génotype

11 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Milieu de culture Éléments minéraux Macroéléments : N,P,K, Ca, Mg, S ex : rapport NO 3 - / NH 4 + Microéléments : autres oligoéléments Conditions de culture Utilisation de nitrate dargent comme antagoniste de léthylène

12 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Substances de croissance Auxines (dérivés du tryptophane) Cytokinines (dérivés de ladénine) Gibbérellines (diterpènoïdes)

13 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Substances de croissance Les auxines Conditions de culture Naturelle : Acide Indole Acétique = IAA N CH 2 CO 2 H H CH 2 CO 2 H Synthétiques : Acide Naphtalène Acétique 2,4-D (acide dichlorophenoxyacétique) OCH 2 CO 2 H Cl

14 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Mode de production des auxines Site de production: bourgeon apical Diffusion des hormones - dominance apicale - stimulation de la rhizogenèse Conditions de culture

15 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Au niveau cellulaire : elles stimulent lélongation Au niveau tissulaire : Elles stimulent la croissance racinaire pour de faibles concentrations (sauf le 2,4-D) Rôle des auxines Elles inhibent lélongation de la tige feuillée et le débourrement des bourgeons axillaires Conditions de culture

16 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Substances de croissance Les cytokinines – Naturelles Isoprénoïd CK (ex: zéatine) Aromatic CK (ex: BA) Conditions de culture Synthétiques Kinétine Benzyl AdénoPurine (BAP)

17 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Mode de production des cytokinines Site de production: Racines Transport vers les sites d action : - levée de dominance apicale - débourrement des bourgeons axillaires

18 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Au niveau cellulaire : elles stimulent la division cellulaire Au niveau tissulaire : En général, inhibition de la croissance dapex racinaires Activation du tissu embryonnaire apical de la tige feuillée Rôle des cytokinines

19 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Substances de croissance Gibbérellines (Acide gibbérellique) – Noyau ent-Kaurène (issu du geranyl-geranyl PP) Conditions de culture

20 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Gibbérellines (Acide gibbérellique) – Effets complexes : Stimulation croissance internodale, expansion des feuilles Inhibition de la croissance racinaire à la lumière Favorise au contraire la croissance racinaire à lobscurité

21 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Milieu de culture Éléments organiques divers Acides aminés (glycine, cystéine…) Vitamines (thiamine, acide nicotinique, acide folique…) Mélanges organiques complexes Antioxydants Conditions de culture

22 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Organogenèse et callogenèse in vitro Cellules indifférenciées Cellules différenciées (cultures dorganes)

23 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Callogenèse Cals de cellules indifférenciées à partir dorganes (feuille, racines…) Repiquage sur milieu frais régulièrement, croissance infinie Dérive génétique Utilisation pour réaliser des suspensions cellulaires ou de la régénération

24 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Comment obtenir un cal et des cellules indifférenciées ? Cellules indifférenciées Coupure callogenèse

25 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales callogenèse

26 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales callogenèse

27 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Organogenèse Régénération dorganes à partir dun cal Skoog et Miller (1957) [Auxine] [Cytokinine] Callogenèse Rhizogenèse Caulogenèse

28 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales organogenèse

29 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales organogenèse

30 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Milieu Solide Cal Suspension de cellules Voie directe en milieu liquide Obtention de suspensions cellulaires callogenèse

31 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales callogenèse

32 S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales callogenèse


Télécharger ppt "S 7 : Technologie et Biotechnologie Végétales Techniques de base de la vitroculture Vitroculture et vitrométhodes."

Présentations similaires


Annonces Google