METHODE DE DIAGNOSTIC D’UNE MALADIE GENETIQUE RAKOTOMANANA Jenny Larissa Interne des Hôpitaux 4 ème semestre USFR NEURLOGIE FACULTE D MEDECINE UNIVERSITE D’ANTANANARIVO COURS DU 01/04/15 1

CIBLES : internes de médecine général, interne de spécialité PRE-RECQUIS : terminologie en génétique OBJECTIF: citer les méthodes diagnostiques des maladies génétiques 2

PLAN INTRODUCTION DIAGNOSTIC – EPIDEMIO-CLINIQUE – PARACLINIQUES CONCLUSION 3

INTRODUCTION Anomalie d’un ou plusieurs gène Anomalie en nombre des chromosomes Sujet d’actualité 4

INTRODUCTION CATEGORIE DE MALADIE GENETIQUE – Chromosomique ( Trisomie 21, syndrome de Turner) – Monogénique/ Mendéliennne Dominante (Huntington, … ) Récessive (mucoviscidose,… ) Liée à X ( maladie de Kennedy, …) – Mitochondriale – Empreinte parentale – Polygénique/ multifactorielle / complexe ( Strümpell-Lorein, …) 5

INTRODUCTION TYPE DE TEST – Prédictif (pré-symptomatique, familiale) – Dépistage porteur (prénuptiale: couple en bonne santé + famille malade) – Test diagnostique (présence symptôme) Prénatal Du nouveau-né Empreinte génétique (crime, test de paternité, mort) 6

INTRODUCTION PRELEVEMENT – Prénatal Amniocenthèse Prélèvement des villosités choriales – Post-natal Sang+++, sperme, larme,… cheveux,… 7

EPIDEMIO-CLINIQUE ARBRE GENEALOGIQUE 8

PARACLINIQUES Maladie chromosomique – Caryotype conventionnelle 9 Trisomie 21

PARACLINIQUES Monogénique – Caryotype moléculaire (1000X plus) 10 Obésité: trouble de comportement alimentaire

PARACLINIQUES Mitochondriale 11 MétaboliqueAcidose lactique HistologieFibre rouge déchiqueté (ragged red fibers RRF) ImmunologieAnticorps contre des sous-unités de succinate déshydrogénase, cytochrome oxydase Spectroscopie par résonance magnétique Rapport Pi/Pcr augmenté (phosphate inorganique/ phosphacréatine) Polarographie (étude de la consommation d’O2 par les mitochondries) Oxydation NADH ↓, oxydation des substrats produisant de FADH2 (succinate) normale = déficit complexe I Oxydation NADH normale, oxydation des substrats produisant de FADH2 (succinate) ↓ = déficit complexe II Perturbation de tous les substrats = déficit complexe III, IV, V Spectrophotométrie (étude de l’activité des complexes de la chaîne respiratoire) Déficit de la phosphorylation oxydative

PARACLINIQUES Génétique ( PCR ou séquençage ou expansion: délétion, duplication, région répétée) En rapport avec le génome mitochon drial Réduction de l’ADN mitochondrial Perte multiple de l’ADNmt Perte sporadique de l’ADNmt Anomalie ponctuelle: ARNtLys au nucléotide 8344 ARNtLeu au nucléotide 3243 ATPase 6 au nucléotide

PARACLINIQUES Génétique ( PCR ou séquençage ou expansion: délétion, duplication, région répétée) En rapport avec le génome nucléaire Déficit en Complexe I Complexe IV Complexe II ↓consom mation d’O2 13

PARACLINIQUES Multifactorielle/ Polygénique/ Complexe – Arbre généalogique+++ – Caryotype moléculaire familiale 14

PARACLINIQUES Empreinte génétique/ Parentale 99,9% des nucléotides = tout individu 0,1% ( ) = propre à chaque individu – PCR (amplification des polymérases) 15

CONCLUSION CHOIX: catégorie de la maladie, spécificité du test, fiabilité de l’ interprétation – PCR – Caryotype conventionnelle – Caryotype moléculaire (puce ADN)+++ – Séquençage – Expansion: délétion, duplication, région répétée 16

CONCLUSION 17 CONSENTEMENT+++ INTERDIT CHEZ LES MINEURS sauf si intervention préventive et thérapeutique d’urgence

MERCI DE VOTRE ATTENTION 18 merci de votre aimable attention