Diagnostic d’une hémoglobine instable Patricia Aguilar Martinez CHU de Montpellier, France Congrès Tuniso-français Tunis, 6-7 sept 2007 Congrès Tunis Sept 2007

Hb instables: historique 1952 (Cathie): enfant, cyanose + splénomégalie 1960 (Dacie) : « anémie hémolytique congénitale non sphérocytaire » 1962 (Grimes) : « anémie congénitale à corps de Heinz » 1966 (Carrel) : Hb Köln (1ère Hb instable identifiée) 1967 (Dacie) (Sansone): Hb Hammersmith, Hb Genova 2007 : + d’une centaine de variants connus (« http/www.globin gene server ») Congrès Tunis Sept 2007

Hb instable: définition? Groupe d’hémoglobines anormales responsables d’anémie hémolytique et caractérisées par la présence de corps de Heinz rares Congrès Tunis Sept 2007

Tableaux cliniques Anémie hémolytique chronique (provoquée par stress oxydatif) Formes cliniques spéciales: avec cyanose (affinité pour l’oxygène) mimant une bêta-thalassémie hétérozygote (Hb très instable) asymptomatiques… (instabilité in vitro) Congrès Tunis Sept 2007

Cas n°1 Num: Hb: 5,8 g/dl GR: 1,9 106/mm3 VGM: 79.1 fl TCMH: 29,9 pg Pt: 129 000/mm3 GB: 2500/mm3 Jeune fille, 14 ans Urgences pédiatriques Pâleur, splénomégalie Étude de l’Hb Recherche de sphérocytose héréditaire (Enzymes érythrocytaires) Réticulocytes: 19,2% (365 000mm3) Congrès Tunis Sept 2007

Cas n°1 Examens biologiques HPLC: Hb A : 81.3% Hb F : 4.5% Hb X :8% Hb A2 : 6,2% (VN <3,5) Congrès Tunis Sept 2007

Cas n°1 Examens biologiques Isofocalisation N T P N électrique Suspicion d’Hb instable Fraction anormale Congrès Tunis Sept 2007

Cas n°1 Examens biologiques (Avant transfusion) Corps de Heinz positifs (80%) Congrès Tunis Sept 2007

Cas n°1 Enquête familiale Père : (splénectomisé?) Mère : Num: Hb: 13,1g/dl, VGM:97fl, Rétic: 232 000/mm3 hémolyse compensée HPLC: Hb A2: 2.9%, HbF <1%, Hb X (petit pic) Isofocalisation: pas d’anomalie visible Corps de Heinz: + Mère : bilan normal Congrès Tunis Sept 2007

Diagnostic moléculaire Cas n°1 Diagnostic moléculaire Technique de screening: DGGE Technique de confirmation: séquençage Congrès Tunis Sept 2007

Diagnostic moléculaire Cas n°1 Diagnostic moléculaire Père et fille Mutation hétérozygote du gène ß-globine: c.127 T>C (bêta42 Phe>Val) Hb Sendagi (Hb instable connue) Congrès Tunis Sept 2007

Physiopathologie Déstabilisation du tétramère d’hémoglobine : Infiltration d’eau dans la molécule d’Hb Anomalie de l’hème: formation d’hémichromes Anomalies de la zone de contact des chaînes de globine Insertions/délétions d’aa Congrès Tunis Sept 2007

Diagnostic biologique Numération + réticulocytes Etude de l’Hb (HPLC, isofocalisation) Recherche de corps de Heinz Test de stabilité à la chaleur (1h à 50°C) à l’isopropanol Congrès Tunis Sept 2007

Recherche de corps de Heinz Coloration supravitale (bleu de Crésyl brillant) Incubation prolongée (½h, 1h, 2h, 4h, 24h) Examen de toutes les lames Aspect: inclusions accolées à la membrane, balles de golf… Congrès Tunis Sept 2007

Corps de Heinz Congrès Tunis Sept 2007

Diagnostic moléculaire Hb F Hb A Congrès Tunis Sept 2007

Génétique Transmission dominante 1 seul allèle muté ≠ thalassémies Congrès Tunis Sept 2007

Génétique Transmission dominante 1 seul allèle muté ≠ thalassémies Cas particuliers : en associations avec une ß° thalassémie  thal intermédiaire Congrès Tunis Sept 2007

Diagnostic différentiel Anémie hémolytique avec splénomégalie : Sphérocytose héréditaire Hémolyse provoquée/médicaments + corps de Heinz Déficit en G6PD Congrès Tunis Sept 2007

Traitement Anémie hémolytique modérée: Anémie sévère: Folates Surveillance lithiase biliaire Médicaments Anémie sévère: Transfusions Anémie chronique avec splénomégalie: Splénectomie Congrès Tunis Sept 2007

Quelques hémoglobines instables Hb Köln la plus fréquente Hb Hammersmith, Poitier, Brest, Clermont Ferrand… Hb Tunis-Bizerte : Alpha1 129(H12) Leu>Pro Anémie, microcytose (alpha thal) Famille tunisienne (mère homoz, 2 enfants hétéro) HbVar : A database of Human Hemoglobin Variants and Thalassemias Congrès Tunis Sept 2007

Laboratoire d’hématologie Hôpital Saint Eloi Pr JF Schved Dr M Giansily S Cunat H Igual F Becker Congrès Tunis Sept 2007