Cours d'Hémato-cytologie DUT ABB 2- Hémogramme Auteur : Bruno Flamand, IUT de Dijon

CYTOLOGIE HEMATOLOGIQUE L’HEMOGRAMME ou Numérations-Formule Sanguine (NFS) englobe: -les numérations des éléments figurés -le dosage de l’Hémoglobine -la mesure de l’Hématocrite -les calculs des constantes érythrocytaires -l’établissement de la formule leucocytaire Prélèvement: sang veineux sur EDTA (ou si thrombopénie induite par EDTA, prélèvement sur citrate de Na), éventuellement sang capillaire

Numérations: GR (ou érythrocytes ou hématies) , GB (ou leucocytes) , Numérations: GR (ou érythrocytes ou hématies) , GB (ou leucocytes) , Plaquettes (ou Thrombocytes) . Valeurs et constantes: -érythrocytaires: -Taux Hémoglobine sanguin Hb -Hématocrite Hte -Volume Globulaire Moyen VGM -Concentration Corpusculaire Moyenne en Hb CCMH -Taux Corpusculaire Moyen en Hb TCMH -Indice de Distribution des Rouges IDR -plaquettaires: -Thrombocrite THT -Volume Plaquettaire Moyen VPM Indice de Distribution Plaquettaire IDP

GR, Hb, Hte,VGM,TCMH,IDR: diagnostic des pathologies du GR, orientation du diagnostic des anémies Plaquettes: diagnostic d’une anomalie de l’hémostase primaire GB, FL: diagnostic des pathologies infectieuses, inflammatoires, hémopathies malignes (leucémies…) L’Hémogramme est automatisé complètement ou partiellement dans les laboratoires

GR Homme 4,5 à 6 .106 /mm3 Femme 3,8 à 5,5 .106 /mm3 Hématocrite Homme 40 à 54 % Femme 37 à 47 % Hémoglobine Homme 13 à 17 g/100ml Femme 12 à 16 g/100ml VGM 82 à 98 fl CCMH 32 à 36 % TCMH > 27 pg IDR <15 % Plaquettes 150 000 à 450 000 /mm3 GB 5000 à 10 000 /mm3 Granulocyte neutrophile 1500 à 7000 /mm3 Granulocyte éosinophile 0 à 400 /mm3 Granulocyte basophile 0 à 100 /mm3 Lymphocyte 1500 à 4000 /mm3 Monocyte 200 à 800 /mm3

  Anciennes unités Facteur x Unités internationales Globules rouges 106 par mm3 106 T/L (téra, 1012) Hémoglobine g/100 ml 0,621 mmol/L Hématocrite % ou dl/dl 0,01 L/L VGM µ3 F/L (femto,10-15) TCMH pg 0,062 fmol (femto,10-15) CCMH % ou g/100ml Globules blancs 103 par mm3 G/L (giga, 109) Plaquettes

Numération GR: Erythropénie < VN > Polyglobulie Hématocrite: Hte% = (Vol. globulaire / Vol. sanguin total) x100 Référence: paramètre mesuré en détermination manuelle par centrifugation en tube capillaire calibré Hte= (h globulaire / h sang total) x 100 Paramètre Calculé dans Automate: Hte = VGM x Num. GR Hémodilution < VN > Hémoconcentration

Taux d’hémoglobine sanguin: Hb en g/dl Dosage spectrophotométrique à 540 nm Hb (Fe 2+) Hb (Fe 3+) Hb (Fe 3+) CN- Echantillon sanguin total est lysé par Hexacyanofferrate III ([Fe(CN)6]3- , qui oxyde l’Hb en met-Hb La metHb formée est complexée avec le cyanure de K+ (KCN) en Cyanmet-Hb, composé stable, dont l’absorbance est proportionnelle à la concentration. Diminution de Hb: ANEMIE

Volume Globulaire Moyen: VGM en fl (10-15 L) paramètre calculé (c’est une moyenne…), même sur automate, même si les automates mesurent le volume de chaque GR VGM = (Hte % / GR 106/mm3) x 10 Microcytose < Normocytose > Macrocytose Taux Corpusculaire Moyen en Hb: TCMH en pg (10-12 g) TCMH = (Hb g/dl / GR 106/mm3) x 10 Hypochromie* < Normochromie

Concentration Corpusculaire Moyenne en Hb: CCMH en % (g/dl) CCMH = (Hb g/dl / Ht %) x 100 Hypochromie* < Normochromie *La CCMH est considérée comme un indice moins sensible de l’hypochromie que la TCMH dans les anémies, en effet la TCMH diminue avant la CCMH dans l’installation d’un cas d’anémie Indice de distribution des Rouges: IDR % Coefficient (calculé par automate) de variation des volumes de la population de GR IDR = (K x SD) / VGM Augmentation de IDR : Anisocytose

Numération plaquettaire PLT: Thrombopénie < VN > (Hyper)Thrombocytose Thrombocrite: hématocrite plaquettaire THT = VPM x Num. PLT Volume Plaquettaire Moyen: VPM en fl Augmentation du VPM: macrocytose plaquettaire Indice de Distribution Plaquettaire: IDP % Augmentation IDP: anisocytose plaquettaire

Numération GB: Leucopénie < VN > Hyperleucocytose Formule leucocytaire: répartition des différentes sous-populations de leucocytes -FL manuelle par lecture microscopique de frottis coloré au MGG (100 à 200 leucocytes répertoriés) -FL automatisée (5000 à 10000 leucocytes répertoriés) Les résultats sont rendus en valeur relative % et en valeur absolue par mm3 mais l’interprétation n’est valable que sur les valeurs absolues GN Neutropénie < VN > Polynucléose GE (hyper)Eosinophilie > VN GB Basocytose > VN L Lymphopénie < VN > Hyperlymphocytose M Monocytopénie < VN > Monocytose

Granulocyte neutrophile Polynucléose neutrophile DEFAUT Paramètres EXCES Erythropénie GR (Polyglobulie) Hemodilution Hématocrite Hemoconcentration Anémie Hémoglobine Microcytose VGM Macrocytose Hypochromie CCMH* TCMH IDR Anisocytose Thrombopénie Plaquettes HyperThrombocytose Leucopénie GB Hyperleucocytose Neutropénie Granulocyte neutrophile Polynucléose neutrophile Granulocyte éosinophile Hyperéosinophilie Granulocyte basophile Basocytose Lymphopénie Lymphocyte Hyperlymphocytose Monocytopénie Monocyte Monocytose *La CCMH est considérée comme un indice moins sensible de l’hypochromie que la TCMH dans les anémies, en effet la TCMH diminue avant la CCMH dans l’installation d’un cas d’anémie