Travail en zone stérile Cultures in vitro 1S But du TP Antisepsie Asepsie Travail en zone stérile Mise en culture Sources
But du TP: C’est l’antisepsie C’est le travail en asepsie. Mettre en culture des fragments de St Paulia dans un ou des milieux nutritifs La difficulté: Ne pas mettre en culture d'autres êtres vivants que le St Paulia (bactéries, champignons) D ’où la nécessité: -d'une stérilisation de la surface des fragments à implanter et des milieux de culture. C’est l’antisepsie -d ’empêcher les microorganismes de re-contaminer la culture après antisepsie. C’est le travail en asepsie.
Antisepsie Les moyens utilisés: antiseptiques (pour les plants) ou désinfectants (pour les outils) L ’eau de Javel (hypochlorite de sodium). On ajoute un agent mouillant (détergent) à la Javel ou on utilise un produit du commerce (Domestos). L’alcool Le chauffage à la flamme ou le flambage des outils plongés dans l’alcool).
Asepsie Lavage des mains et avant bras Cheveux attachés (l’idéal est le port d’un bonnet) Port du masque Travail sous le cône stérile produit par un bec Bunsen Zone protégée
Organisation de la zone stérile B 1 C 2 4 3 C 1 2 4 3 A 1 B 2 4 C 3 E Rinçage D Alcool et outils Domestos et fragment végétal Rinçage 3 Rinçage 2
Mise en culture
Clonage de Saint Paulia: Sources Clonage de Saint Paulia: http://pagesperso-orange.fr/davidsandra/saintpaulia/X.htm