La présentation est en train de télécharger. S'il vous plaît, attendez

La présentation est en train de télécharger. S'il vous plaît, attendez

Les bactériocines de classe IIa : des armes naturelles contre les pathogènes alimentaires Thibaut JACQUET Travaux encadrés par Anne-Marie Revol-Junelles.

Présentations similaires


Présentation au sujet: "Les bactériocines de classe IIa : des armes naturelles contre les pathogènes alimentaires Thibaut JACQUET Travaux encadrés par Anne-Marie Revol-Junelles."— Transcription de la présentation:

1 Les bactériocines de classe IIa : des armes naturelles contre les pathogènes alimentaires Thibaut JACQUET Travaux encadrés par Anne-Marie Revol-Junelles et Catherine Cailliez-Grimal

2 Domaines de compétence : Physicochimie – Microbiologie - Bioconversion Savoir-faire: Caractérisation, fonctionnalisation et vectorisation de molécules dintérêt. Détermination de leurs propriétés structurales et fonctionnelles en vue de leur application dans les domaines de la santé et alimentaire. 2

3 3 Problématique Listeria monocytogenes Lactococcus sp. Septicémies, méningites, infections utérines chez la femme enceinte…

4 4 Lactococcus lactis Listeria monocytogenes Bactériocine (Nisine, E234) Problématique

5 Carnobacterium maltaromaticum : une souche compétitrice de Listeria monocytogenes Listeria monocytogenes ATCC15313 Carnobacterium maltaromaticum CP5 Inhibition due à une bactériocine de classe IIa : Cbn BM1. 5

6 Quest-ce quune bactériocine ? Synthétisé par voie ribosomale sous forme dun précurseur Modifié ou non par voie post-traductionnelle Spectre daction étroit Peptide antibactérien 6

7 Quest-ce quune bactériocine de classe IIa ? Faible poids moléculaire (37 à 48 a.a.) Peptide cationique, hydrophobe et thermostable Présence dune séquence conservée en N-terminal 7

8 Structurée en hélice uniquement en milieu apolaire Leucocine A Sakacine P Curvacine A Carnobactériocine B2 8 Quest-ce quune bactériocine de classe IIa ?

9 Objectifs des travaux de recherche : 1) Déterminer le(s) mécanisme(s) daction de Cbn BM1, une bactériocine de classe IIa produite par Carnobacterium maltaromaticum CP5. 2) Déterminer les propriétés de surface des bactéries cibles de Cbn BM1. 9

10 Mécanisme(s) daction de Cbn BM1 10 Les bactériocines ciblent la membrane bactérienne : - Perturbation des potentiels membranaires - Modification de la fluidité membranaire - Perturbations morphologiques des bactéries Milieu extra- cellulaire Cytoplasme

11 Perturbation des potentiels membranaires Deux potentiels membranaires composent la force protomotrice : La perturbation de chacun de ces potentiels peut être observée par une variation de lintensité de fluorescence de sondes spécifiques Le : gradient transmembranaire dions K+ et Na+ - Le pH : gradient transmembranaire dions H+ pH Milieu extra- cellulaire Cytoplasme

12 Mesure du potentiel de Listeria monocytogenes Fluorescence Intensity (A.U.) Ajout de Cbn BM1 Cbn BM1 perturbe le potentiel de L. monocytogenes. Sonde : DiSC(3)5 12 t (s) Ajout de Nigéricine

13 Mesure de la fluidité membranaire Mesure de lanisotropie de fluorescence 13 - Le TMA-DPH : pour la fluidité de la surface de la membrane - Le DPH : pour la fluidité du cœur de la membrane Utilisation de deux sondes :

14 Cbn BM1 rigidifie uniquement la surface de la membrane de Listeria monocytogenes EGDe. Variation of fluorescence anisotropy (A.U.) 14 Fluorescence Anisotropy Variation(A.U.) Mesure de la fluidité membranaire

15 15 Modifications morphologiques par Cbn BM1 Topographie des bactéries par microscopie de force atomique

16 16 Modifications morphologiques par Cbn BM1

17 17 Modifications morphologiques par Cbn BM1

18 18 Modifications morphologiques par Cbn BM1 Bactérie non traitéeBactérie traitée par Cbn BM1

19 19 Conclusion Les mécanismes daction ont été déterminés au niveau : - des potentiels transmembranaires - des modifications de fluidité membranaire - de la morphologie cellulaire - des fuites de composés intracellulaires

20 20 Ces différentes études ont également été réalisées en fonction de létat physiologique des bactéries cibles. Les mécanismes daction de Cbn BM1 ont été mis en évidence sur quatre souches bactériennes : - Listeria monocytogenes EGD-e - Listeria monocytogenes EGD-e mptI - Carnobacterium maltaromaticum DSM Carnobacterium maltaromaticum CP5 Conclusion

21 21


Télécharger ppt "Les bactériocines de classe IIa : des armes naturelles contre les pathogènes alimentaires Thibaut JACQUET Travaux encadrés par Anne-Marie Revol-Junelles."

Présentations similaires


Annonces Google