EXPLORATION DU METABOLISME DES LIPIDES Dr CHIKOUCHE A

1- Condition de prélèvements 2- Aspect du sérum  3- Dosage  des paramètres lipidiques courants: 3-1-Dosage des triglycérides : 3-2 -Dosage du cholestérol: 3-3- Variations physiologiques: 4- Suivit biologique 5- Dosage de la fraction HDL-Cholestérol 6- Apoprotéines A1 et B 7- Indices d'athérogénicité 8- Intérêt du lipidogramme

1- Condition de prélèvements: Après un jeune d'au moins 12 heures Sur tube sec de 5 à 10 ml par ponction veineuse

2-Aspect du sérum En premier lieu noter L’aspect du sérum qui peut être Clair (normal ou hypercholesterolémie) trouble, opalescent ou lactescent (hypertriglycéridémie)

Faire le test de crémage: Laisser le tube contenant le sérum pendant plus de 12 heures à + 4°C et noter : Si une couche crémeuse surnageante apparaît au-dessus d’une couche plus claire.

Si aspect lactescent et ou couche crémeuse = excés de chylomicron Si aspect trouble ou opalescent = excés de VLDL ou IDL Si aspect trouble et surnageant crémeux = excés de VLDL et de chylomicrons

3- Dosage des paramètres lipidiques courants: Noter Bien : Quand on parle de : Cholestérol total = somme des différentes fractions de cholestérol (libre et estérifié) transportées par les différentes lipoprotéines, Triglycérides = somme des différentes fractions de triglycérides transportées par les différentes lipoprotéines. Dans le plasma du sujet normal: 80 % des TG sont dans les VLDL, 75 % du cholestérol sont dans les LDL.

3-1-Dosage des triglycérides : par des méthodes colorimètriques enzymatiques : Valeurs normales : 0.45 – 1.50 g/l. 3-2 -Dosage du cholestérol: par des méthodes colorimètriques enzymatiques: Valeurs normales =1,50g/l à 2 g/l

3-3- Variations physiologiques: Grossesse: Augmentation des TG et du Cholesterol ( Maximum durant la 36 – 38 ème semaine) En période post gravidique: Hypercholestérolémie Age: Entre 40 – 60 ans = Hypercholestérolémie Après 80 ans = Diminution des TG Selon le sexe Rapport LDL/HDL = diminué chez la femme = augmenté chez l’homme Activité sportive: Entraine une diminution du taux de cholestérol.

4- Suivit biologique: Si cholestérol ≤ 2 g/l + si TG ≤ 1,5 + pas de facteurs de risques = Bilan normal. Si le cholestérol ≥ 2 g/l et ou TG ≥ 1,5 et ou présence de facteurs de risques: = Bilan à compléter par d’autres dosages.

Les facteurs de risques: Age › à 50 ans , HTA , Antécédent familiaux de dyslipidémie Obésité Tabagisme Diabéte Dépots lipidiques superficiels

5- Autres paramètres à doser: Dosage de la fraction HDL-Cholestérol : a- Après précipitation des lipoprotéines légères b- Aprés immunoprécipitation c- Par électrophorèse

Précipitation sélective des lipoprotéines légéres On fait sélectivement précipiter les lipoprotéines légères (chylomicrons, VLDL, LDL) par l’acide phosphotungstique, en présence de chlorure de magnésium ou du sulfate de dextran et on dose le cholestérol lié au HDL présent dans le surnageant. Immunoprécipitation On fait précipiter les lipoprotéines non HDL par des AC anti apo B et on dose le cholestérol lié au HDL présent dans le surnageant

Valeurs normales du HDL-Cholestérol : 0,50 - 0,70 g/l Cholestérol HDL  Risque très faible  Risque standard  Risque élevé Homme  > 0.55g/l 0.35-0.55g/l < 0,35g/l Femme  > 0.65g/l  0.45-0.65g/l  < 0,45g/l Le taux de HDL cholestérol est inversement proportionnel au risques d’athérosclérose :

Le LDL cholestérol est : Calculé par la formule de friedewald Dosé après immunoséparation Dosé par l’électrophorèse

Calcul du LDL cholestérol par la formule de friedewald: Chol. LDL (en g/l) = Chol.T - Chol.HDL-TG/5 Mais cette formule n'est valable que si TG < 4g/l

Dosage du LDL cholestérol par Immunoprécipitation ou immunoséparation On fait précipiter les lipoprotéines non LDL (chylomicron, VLDL, IDL, HDL) grâce à des billes de latex couvertes d'anticorps anti-Apo E et anti-Apo A1 et on dose le cholestérol lié au LDL présent dans le surnageant. Se fait rarement

Les valeurs normales sont: Femme = 1,00-1,45g/l (2,58 à 3,87 mmol/l) Homme = 1,10-1,55g/l (2,84-4,13mmol/l) Risque d’athérosclérose élevé = si valeurs supérieures. Le taux du LDL cholestérol est proportionnel aux risque d’athérosclérose Le risque cardiovasculaire augmente exponentiellement avec le taux de cholestérol LDL.

6- Dosage des Apolipoprotéines A1 et B Par immunoturbidimétrie Par immunodiffusion radiale (méthode de MANCINI). Par électroimmunodiffusion Par des techniques immunoenzymatiques

Valeurs normales Apo A1  Apo B  Femme  1,30-2,10g/l  < 1,25g/l  Homme  1,20-1,60g/l  < 1,35g/l  Risque si  < 0,90g/l  >1,35g/l  L'Apo A1 est corrélée au cholestérol HDL L'apo B est corrélée au cholestérol LDL

7- Indices d'athérogénicité: Rapport CT/Chol.HDL < 4,50 Rapport LDL/HDL < 3,55 chez l'homme 3,22 chez la femme Rapport apo B/apo A1 < 1,5

8- Électrophorèse des lipides ou lipidogramme Utile pour typer la dyslipidémie

Dosage de la Lp (a) Par des méthodes immunologiques. Le taux plasmatique ne doit pas dépasser 0,30 g/l

EAL (exploration d’une anomalie lipidique) Recommandations sur le bilan à pratiquer Dépistage EAL systématique une fois chez tous les adultes Comprend: CT, TG, aspect du sérum à jeun, HDL‐c et LDL‐c Bilan normal Ne pas le répéter avant 5 ans sauf changement clinique ou du mode de vie Bilan anormal Le recontrôler au moins une fois Complété par un bilan diagnostique: TSHus, glycémie, créatininémie Si un traitement est envisagé Ajouter le dosage des transaminases Ajouter le dosage des CPK si situations à risque Si le patient est mis sous traitement EAL et des transaminases 1 à 3 mois plus tard Dosage des CPK dans des situations à risque et en cas de symptômes

Conclusion: Le dosage des paramètres lipidiques est très important car il permet le diagnostic et le suivit des patients. Il comporte essentiellement l’aspect du sérum, le dosage du CT, des TG et du HDLc et le calcul du LDLc.