 Les Biomarqueurs → les mesures employées pour exécuter Une évaluation clinique.  Prélèvement non invasif: plasma/urine (LCR)  Facilement mesurable  Reflet de la régression ou de la stabilisation au cours du Traitement  Sensible et prédictif du risque de complications en cas de diminution de dose Dehoux M, Ann Biol Clin 2013 ; 71(1) : 5-11  Permettre de détecter les sujets à traiter dans une population malade,  Etablir le moment optimum pour débuter le traitement, d’établir les modalités de celui-ci  D’évaluer précocement l’efficacité thérapeutique.

Cellule de Gaucher Moelle osseuse, Rate, foie …. Profil cytokinique inflammatoire IL 1 TNFα IL8 IL 6 CCL18 MIP1 Chitotriosidase Dalbi F.Hematology,2009

Chitotriosidase Enzyme de Conversion de l’Angiotensine TRAP Ferritinémie, CCL18 MIP1α et  Néoptérine Glucosylsphingosine Patients non traitésPatients traités objectifs thérapeutique non atteints Objectifs thérapeutiques atteints Touts les 12 moisTouts les 3mois6 à 12 mois

FERRITINEFERRITINE  Sous traitement: La ferritine diminue un peu plus lentement (60% en 2 ans)  (Vigan et al, 2014).  L’absence de diminution ou la ré-augmentation de Ferritine →→ comme des signes d’alerte en faveur d’une insuffisance ou d’une baisse d’efficacité du traitement. Viagan et al OJRD,2014

Enzyme de Conversion de l’Angiotensine(ECA)  Non spécifique de la surcharge lipidique  Généralement augmentée mais grande variabilité  Par manque de spécifité, son dosage est devenue obsolète Centre de référence des maladies lysosomales / Décembre 2015 Aerts JMFG, Journal of Inherited Metabolic Disease, 2011

Tartrate Resistant Acid Phosphatase (TRAP)  Production par les cellules de Gaucher (rate produit ½ de l’enzyme circulante)  Sous TRT, une baisse rapide mais souvent partielle  Ne semble pas corréler avec les complications osseuses  Son dosage n’est plus recommandée. Centre de référence des maladies lysosomales / Décembre 2015

Chitotriosidase (1)  Une glycosyl hydrolase ( enzyme appartenant à la famille des chitinases)  Rôle de défense de l’organisme contre les pathogènes contenant de la chitine.  Sélectivement exprimée dans les macrophages tissulaires activés de façon chronique, pouvant atteindre des taux sériques très importants. (Dans la maladie de Gaucher :10 à 1000X)  Valeures extrêmes : ,  Corrélation assez bonne avec la clinique chez les patients asymptomatiques: ↗ modérée formes sévères: augmentation très importante Hollak & al,JCI 1994 ollak

Chitotriosidase (2)  Dosage plasmatique par Fluorométrie (Substrat fluorogénique) ou EIA(ELISA)  Valeurs normales : nmol/h/ml & 560 pg/ml  Valeurs chez les patients Gaucher : 600> (10.000à nmol/h/ml)  Interprétation chez les patients sous thérapie en fonction des valeurs antérieures : le patient est son propre témoin +++ Kanneganti M. J. Epithel. Biol.Pharmacol.,2013

Chitotriosidase et suivi thérapeutique (3)  La chitotriosidase constitue un des marqueurs biologiques le plus sensible et le plus spécifique connu à ce jour permettant de suivre l’évolution de la maladie de Gaucher. Aerts et al..Acta Paediatr Suppl  Un suivi longitudinal de la CHT 1 est utile au suivi clinique.  L’activité de la CHT1 diminue en réponse au traitement et que cette baisse est corrélée aux autres indicateurs d’une réponse clinique positive comme la normalisation des paramètres hématologiques et viscéraux. Quel est l’intérêt du dosage de la chitotriosidase pour les patients traités ? Zimran A. American Journal of Hematology,2016 Vargiami, HIPOCRATIA,2016

 Marqueur sensible de l’interruption du TRT A quelle fréquence doit on doser la CHT1?

Quelles sont les limites de la CHT1 en tant que biomarqueur?

CCL18 ou PARC  PARC: Pulmonary and Activation- Regulated Chemokine, 69 AA  Role dans les processus d’homéostasie et inflammatoire  Expression : poumon, GL,thymus MO, intestin  Sources: DC, Mo, Macrophage  Stimulis : cytokines VOIE TH2  Répression de la sécrétion: IFN , TNFα  Dosage plasmatique par EIA

Marqueur alternatif CCL18 /PARC G.Rolf, Blood,2004

Deegan,BCMD,2005 C hang,BCMD,2010 Intérêt chez les Déficients en CHT1

 MIP1α et MIP-1β: macrophage inflammatory protein  Détection par ELISA ou Luminex  Augmentation importante dans le plasma  Chémokine Produite par les macrophages inflammatoires  Corrélation entre le taux plasmatique de MIP-1β et l’atteinte osseuse EV Pavlova,Expert Opinion.Med.Diagn,2012 MIP-1α( CCL3) & MIP-1β (CCL4)

Glucosylsphingosine ou lyso- GL1 (1) J. Stirnemann,Int. J. Mol. Sci. 2017, Dans un modèle murin de déficit en glucocérébrosidase, le glucosylcéramide est transformé via une voie alternative de la céramidase en glucosylsphingosine, qui est dégradée par GBA2 cytoplasmique activé à pH neutre en S1P, un métabolite très actif GBA2: Glucosylceramidase Beta 2

Glucosylsphingosine ou lyso- GL1 (2) PLOS, 2013

Lyso-GL1,marqueur corrélé à l’évolution des TRT (imiglucérase,velaglucérase ERT)

Néoptérine  La néoptérine est une ptéridine produite au sein des macrophages par dégradation du GTP, un nucléotide purique, sous l'effet de l'interféron γ jouant un rôle particulier dans la signalisation cellulaire du système immunitaire en indiquant un état pro- inflammatoire.

Hematology,2016