Diagnostique des Bactéries Gram Négatives d’Importance Médicale

Bactérie Gram Négatives Representatives Flore naturelle des membranes muqueuses des tractus respiratoires et génitaux Anaérobies facultatifs Oxydase positive - Fermentent le glucose Cocci Gram-negative Neisseria gonorrhoea; Neisseria meningitis Bacilles Gram-negatifs Famille Enterobacteriaceae Escherichia coli, Salmonella enterica, Shigella, Klebsiella spp, Proteus spp Famille Pseudomonaceae Pseudomonas spp Autres Morganella morganii Flore naturelle du tractus intestinal - Anaérobies facultatif - Oxydase negative - Fermentent le glucose Résidents naturels des sols et des eaux Aérobies strictes - Oxydase positive - Non-fermenteurs

Identification des Gram - Oxydase + - Pseudomonaceae Neisseriaceae Enterobacteriaceae Morganella Fermentation du glucose Fermentation du lactose McConkey + - + - Neisseriaceae Pseudomonaceae Enterobacter Escherichia Klebsiella Serratia Proteus Salmonella Shigella Respiration aérobie

Identification des Gram - Lactose + Indole + - Quelle est la source de C? Escherichia Enterobacter Klebsiella Tryptophane Citrate (-) Citrate (+) Quelle est la source de C? Motilité + - Citrate Enterobacter Klebsiella

Identification des Gram - Lactose - H2S + - Quelle est la source de C? Proteus Salmonella Shigella Serratia Cystéine Quelle est la source de N? Citrate & Acide de sucrose Uréase Urée, donc protéine utilisé + - + - Proteus Salmonella Serratia Shigella

Test Métaboliques pour l’Identification des Gram - MacConkey Milieu sélectif et différentiel Prévient la croissance de Gram + Fermentation du lactose (colonies rose, non-fermenteurs sont incolorées)

Test Métaboliques pour l’Identification des Gram - (Suite) Combine de sources de C sont possible? #1. Utilise toujours le glucose en 1ier = source de C préféré! #2. Choisissent entre lactose, sucrose, protéine. TSI Trois sucres Glucose (limitant) Sucrose Lactose Protéines Cystéine Indicateur Phénol rouge #3.Si protéine utilisé  Rxn alkaline(orange) Si sucre utilisé  Rxn acidique (jaune) Si utilisé aérobie  jaune en haut. Si utilisé anaérobie  jaune en bas. Qu`est-ce qui est arrivé ici?

Test Métaboliques pour l’Identification des Gram - (Suite) SIM Milieu semi-solide Permet de visualiser la motilité Métabolisme de la cystéine CystéineH2S; H2S+ FeSO4 Précipité noir Métabolisme du tryptophane (A) TryptophaneIndole+NH4 + Pyruvate (B) Indole+Réactif de Kovac Rouge

Quel utilise le tryptophane? Non-motile Non-inoculé Indole + - H2S et motile Nom du réactif utilisé? Quel utilise le tryptophane?

Test Métaboliques pour l’Identification des Gram - (Suite) Seulement 1 source de carbone possible. Citrate Source de carbone unique: Indicateur Bromthymol bleu Utilisation du citrate génère des produits alcalins Change du vert au bleu Quel produit change la couleur à bleu? E. coli = (-) Enterobacter and Klebsiella = (+)

Multi Test: Enteropluri-test Quel famille bactérienne est testé? Enterobacteriaceae PERCER DES TROUS ICI Tubes de tests métaboliques multiples Utilisation d’un inoculum constant Rapide Lecture peut être automatisé Préparations et inconsistances normalisé

Voir le vidéo au lien suivants: http://www.youtube.com/watch?feature=player_detailpage&v=l5qHyr1FULE Extra: https://www.youtube.com/watch?v=wWj5LvLSHD8