Violette Allouchery DES Oncologie 19/04/2019 Mutations circulantes ESR1 à la fin du traitement adjuvant par anti-aromatases et après la rechute dans le cancer du sein exprimant les récepteurs hormonaux. Violette Allouchery DES Oncologie 19/04/2019

Introduction Généralités Mutations du gène ESR1 ESR1 code le récepteur alpha aux œstrogènes Mutation Changement de conformation du récepteur Activité transcriptionnelle indépendante de la liaison au ligand Tumorigénèse, croissance tumorale. (Toy et al; 2013 ; Robinson et al; 2013 ; Jeselsohn et al; 2014 ; Li et al; 2013) Mécanisme fréquent de résistance aux anti-aromatases en phase métastatique et marqueur de mauvais pronostic. (Chandarlapaty et al; 2016 ; Fribbens et al; 2016 ; Clatot et al; 2016) Acquises : rares sur les tumeurs primitives : 2% (Takeshita et al; 2015) Fréquentes : détection dans 30% des métastases de tumeurs RO+ exposées aux AA. (Clatot et al; 2016) Récurrentes : 4 mutations hotspot (D538G, Y537N, Y537C, Y537S) représentent 74% des mutations décrites. (Segal et al; 2014) Centre Henri-Becquerel

Introduction Détection des mutations ESR1 Réalisable par ddPCR sur sang circulant avec excellente corrélation plasma-biopsie métastatique sur les 4 mutations les plus fréquentes : D538G, Y537N, Y537S et Y537C. (Sefrioui et al; 2015 ; Schiavon et al; 2015) Rôle des anti-aromatases (AA) Traitement clef dans le cancer du sein hormonosensible des patientes ménopausées Phase métastatique Phase adjuvante avec exposition habituelle de 5 ans Données manquantes concernant l’émergence des mutations ESR1 durant l’exposition aux AA en phase adjuvante. Taux de mutations ESR1 variant de 2.6 à 11.3% lors de la récidive métastatique des patientes exposées aux AA en phase adjuvante. (Chandarlapaty et al; 2016 ; Schiavon et al; 2015) Centre Henri-Becquerel

Objectif Objectif : Evaluer la fréquence des mutations ESR1 à la fin du traitement adjuvant par anti-aromatases chez les patientes suivies pour un cancer du sein localisé avec rechute ultérieure. Type d’étude : Etude observationnelle descriptive, de cohorte rétrospective, monocentrique, réalisée sur collection biologique déclarée. Centre Henri Becquerel, Rouen Centre Henri-Becquerel

Critères d’inclusion Femme de plus de 18 ans traitée pour un cancer du sein localisé avec indication à une hormonothérapie adjuvante. Avec un suivi biologique (Ca 15-3) et clinique régulier sur le Centre. Ayant rechuté durant son suivi après la fin du traitement adjuvant finalisé. Ayant achevé son traitement adjuvant en 2008 ou au-delà (afin d’avoir accès à la sérothèque du centre) avec au moins 2 ans de traitement par anti-aromatase durant la phase adjuvante de son traitement. Echantillon plasmatique (Ca 15-3) disponible durant les 6 derniers mois sous AA en adjuvant. Centre Henri-Becquerel

Critères de non-inclusion Absence de consentement pour une conservation d’échantillons biologiques pour réalisation d’études différées dans un intérêt individuel ou scientifique Centre Henri-Becquerel

Critère de jugement principal Fréquence des mutations circulantes d’ESR1 détectées par Digital PCR sur sang périphérique à la fin du traitement adjuvant par anti-aromatases d’un cancer du sein suivi au CHB. Centre Henri-Becquerel

Critères de jugement secondaire Fréquence des mutations circulantes d’ESR1 lors de la rechute locale et/ou métastatique. Fréquence et cinétique des mutations circulantes d’ESR1 sur les prélèvements disponibles lors de la progression après 1è ligne métastatique. Centre Henri-Becquerel

Méthode Analyses des mutations par ddPCR réalisées sur reliquats biologiques des dosages du Ca15-3 de fin de traitement adjuvant, rechute métastatique ou locale, et à progression après 1è ligne métastatique. 4 étapes : Extraction de l’ADN à partir du plasma Quantification par fluorimétrie de l’ADN extrait Préamplification de la région d’intêret d’ESR1 Etape de détection (PCR digitale) Limite de détection établie à 0.05%. Centre Henri-Becquerel

Méthode Analyse Nombre de sujets nécessaires estimé à 32. Puissance de 90%. Risque alpha de 5% pour détecter une proportion de mutations circulantes pour au moins 5% des patientes. Considérant que 10% des patientes ne seront pas analysables. (Clatot et al; 2016) nombre de sujets nécessaires : 36. Inclusion prévue de 42 patientes. Centre Henri-Becquerel

Modalités organisationnelles Déroulement de l’étude Recueil de données de Janvier à Février 2017 Extraction de tous les tubes en Mai 2017 Analyse des tubes finalisées fin Juin 2017 Soumission fin Novembre 2017 Publication le 16/05/2018 dans Breast Cancer Research. Tuteur Dr Florian Clatot Financement Financement Interne Projet Emergent Centre Henri Becquerel Centre Henri-Becquerel

Contribution personnelle Sélection des patientes, recueil de données cliniques et biologiques Participation à la recherche et au désarchivage des prélèvements biologiques congelés et stockés Poster présenté à l’ESMO en Septembre 2017 Ecriture de l’abstract et du short report Centre Henri-Becquerel