Exploration du métabolisme des lipides IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique RAPPELS Cholestérol / Triglycérides Lipoprotéines Exploration d’une Anomalie Lipidique HDL, LDL ApoA1, ApoB Lp(a) Lipidogramme IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique RAPPELS Cholestérol / Triglycérides Lipoprotéines IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique Cholestérol (total) Molécule lipidique indispensable à l ’organisme: 30% alimentaire (=Exogène) 250-500mg 70% synthétisé par l ’hépatocyte (= Endogène) 700mg à l ’origine des hormones stéroïdes (cortisone, cortisol, aldostérone, oestrogènes, progestérone, testostérone) vitamine D, sels biliaires. Constituant des Mb cellulaires, gaine de myéline des neurones IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique Cholestérol (total) Variation en fonction de l ’âge et du sexe augmentation régulière de 0,5 mmol/L tous les 10 ans de 30 à 60 ans F<H (F avant ménopause) grossesse: augmentation Facteurs environnementaux Alcool Tabac Obésité  Cholestérol total IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique Triglycérides Composés lipidiques glycérol +3AG principale réserve d ’énergie 1g TG = 2,3 x 1g glucide ou protéine sont stockés dans le tissus adipeux IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique Triglycérides Variation en fonction de l ’âge et du sexe H: augmentation régulièrement jusqu ’à 40 ans puis stable F: stable jusqu ’à la ménopause, puis augmentation grossesse: augmentation Facteurs environnementaux aliments riche en glucides rapides, graisses saturés alcool tabac obésité CORTICOIDES, OESTROG, CYCLOSPORINE Acides gras mono ou poly insaturés   TG IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique Cholestérol total et Triglycérides Chol esterifié + Cholestérol libre cholest estérase Cholestérol total libre acides gras Chromogène incolore PÉROXYDASE H2O Chromogène coloré cholestérol oxydase H2O2 Triglycérides lipase estérase GLYCÉROL acides gras GlycéroKinase glycérol 3 Phosphate Gl Ph oxydase IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique Cholestérol (total) mmol/L x 0,39 = g/L INTERPRETATION: notion de SEUIL < 5,2 mmol/L Normal > 5,7 mmol/L Augmenté > 4,2 (+ 1 fact risque) Augmenté > 3,4 (+ 2 fact risque) Augmenté IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique Triglycérides mmol/L x 0,88 = g/L INTERPRETATION 1,7 à 2,3 mmol/L Normal 2,3 à 5,7 hyperTG modérée > 5,7 hyperTG sévère IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

Structure générale d’une lipoprotéine IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

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Composition des lipoprotéines plasmatiques 5 classes selon leur composition, leur densité: Chylomicrons Very Low Density Lipoprotein Intermediate Density Lipoprotein Low Density Lipoprotein Hight Density Lipoprotein IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

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IFTAB Métabolisme lipidique Lipoprotéines Rôles des apolipoprotéines Rôle structural Rôle de ligand (récepteurs Membranes cellulaires) Rôle de cofacteur enzymatique activateur ou inhibiteur d’enzymes intervenant dans le métabolisme des lipoprotéines Ex: apo CII activateur, apoCIII inhibiteur de la lipoprotéine lipase IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

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IFTAB Métabolisme lipidique Lipoprotéines CHYLOMICRONS Transport des TG d ’origine alimentaire Apport d ’acides gras aux tissus (tissu adipeux, foie, muscle) sous l ’action de la lipoprotéine lipase et grâce au récepteur de l’apoE IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique Lipoprotéines VLDL Transport des TG d ’origine endogène action de la lipoprotéine lipase se transforment en IDL IDL Transport des TG/Chol convertis en LDL ou captés par le foie IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique Lipoprotéines LDL Principal transport du cholestérol (sous forme estérifié) captées par les cellules grâce au récepteur LDL HDL Captent le cholestérol des cellules périphériques ou des autres lipoprotéines assurent son retour vers le foie (cholestérol estérifié éliminé dans la bile) IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

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Composition des lipoprotéines plasmatiques La composition des lipoprotéines n ’est pas fixe: elles sont en permanence dans une dynamique d ’échanges entre leurs différences classes. IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

Principales apolipoprotéines IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique Exploration d’une Anomalie Lipidique HDL, LDL ApoA1, ApoB Lp(a) Lipidogramme IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique Indications des différents examens pour le dépistage des dyslipidémies: Distinguer 2 catégories de sujets: ceux  population à risque cardiovasculaire ceux  population à risque IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

Prévention primaire ou secondaire ? - pas d’ATCD personnel de maladie cardiovasc  A pour but de retarder l’apparition des complications cliniques de l’athérosclérose Prévention secondaire  ATCD personnels de maladie coronaire (angor, IDM) ou de maladie vasc (AVC, artériopathie des MI) DNID avec atteinte rénale ou avec plus de 2 facteurs de risque associés. A pour but de retarder la récidive des complications cliniques de l’athérosclérose IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

Exploration d ’une Anomalie Lipidique mal cardiovasc, facteur de risque Sujet NON à risque Sujet à risque Bilan: CT, TG Bilan: CT, TG, HDL, LDL Anomalie Normal Anomalie Normal Pas de bilan avant: 45a (H), 55a (F) Puis tous les 5a Confirmation par 2ème bilan puis bilan + complet (HDL, LDL,…) Surv ts 3a Ts les ans si Diabète Conf par 2ème bil puis bil + complet Lp(a), LPG, ... A jeun depuis de 12h IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

Exploration d ’une Anomalie Lipidique Aspect du sérum Après 12 h (24h) de repos à +4°C Augmentation LDL ou HDL: sérum clair Augmentation VLDL ou IDL: sérum opalescent Augmentation chylomicrons: sérum initialement lactescent devient couche crémeuse et sous-nageant clair IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

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IFTAB Métabolisme lipidique C-HDL Variation en fonction de l ’âge et du sexe F>H: mais dimin après la ménopause, puis augm grossesse: augm Facteurs environnementaux tabac obésité Exercice physique Alcool oestrogènes augment dimin C-HDL IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique C-HDL Dosage non isolable dans une EAL Permet de calculer CLDL par Friedwald si < 0,9 mmol/L ou > 2,05 mmol/L : jusifie le dosage de l ’ApoA1 IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique HDL-cholestérol Techniques de dosage: Référence: ultracentrifugation Technique recommandée /ARCOL SFBC: précipitation avec phosphotungstate de magnésium/chlorure de Mg (PTA) (limites: 1ère étape non automatisée, manque d e reproductibilité) Nouvelles techniques: directes, automatisées dosage en phase homogène IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique HDL-cholestérol Nouvelles techniques: directes, automatisées principes: 2 réactifs sont utilisés R1: réagit avec les LP[ApoB] (Chyl, VLDL, LDL) masque l ’accessibilité de leur Chol au réactif R2 IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique HDL-cholestérol Nouvelles techniques: directes, automatisées principes: 2 réactifs sont utilisés R1: sulfate d ’alpha cyclodextrine: formation de complexes hydrosolubles avec les LP[ApoB] polyanions détergents: adsorbés à la surface des LP[ApoB] Ac anti ApoB: immunoihnibition avec les LP[ApoB] Corrélation +++ avec PTA IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique HDL-cholestérol Nouvelles techniques: directes, automatisées principes: 2 réactifs sont utilisés R1: réagit avec les LP[ApoB] (Chyl, VLDL, LDL) masque l ’accessibilité de leur Chol au réactif R2 R2: cascade enz classique du dosage du Chol Cholestérol estérase Cholestérol oxydase Péroxydase / chromogène R2 IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique LDL-cholestérol 3 types de méthodes: ultracentrifugation calcul par la formule de Friedewald: LDLC mmol/l = CT - HDLC - (TG/2,2) LDLC g/l = CT - HDLC - (TG/5) calcul uniquement si TG < 4mmol/l dosage direct IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique LDL-cholestérol dosage direct solubilisation micellaire sélective du C LDL par un détergent non ionique + dérivé glucidique + ions Mg2+ qui  la réactivité du Chol HDL, VLDL, chylomicron IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique LDL-cholestérol IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

Valeurs seuil recommandées www.afssaps.sante.fr Sujet sans facteur de risque C total 4,1 – 5,2 mmol/L (1,60 – 2,0g/l) C-LDL 3,35 - 4,10 mmol/L (1,30 - 1,60 g/l) TG 0,4 - 1,70 mmol/L (0,35 - 1,50 g/l) C-HDL 1,0 – 2,0 mmol/L (0,40 – 0,75g/l) IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique ApoA1 et ApoB 1/2 vie + longue - sensible à la prise alimentaire que les TG ou le Cholestérol Analyses non isolables, bilan de 2ème intention Analyses bien standardisées Rapport ApoB/ApoA1 augm =+ de chol peut être déposé ds les tissus comme les parois artérielles ApoB / ApoA1: indicateur des 2 LProtéines majeures de transport du Cholestérol et corrélé au risque athérogène IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique Apo A1 Reflet du C-HDL rôle: active la LCAT qui estérifie le chol libre provenant des C périphériques en Chol estérifié Permet d ’apprécier le C-HDL lorsque les TG sont élevés (TG>4 mmol/L) Méthode de dosage: néphélémétrie H: 1,2 - 1,6 g/L F : 1,3 - 2,1 g/L IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique Apo B Reflet du C-VLDL, C-IDL, C-LDL (ens des lipoparticules athérogènes) marqueur de risque cardiovasc + fort que C-LDL (lien + fort entre ApoB et LDL petites et denses) Interêt lorsque les TG sont élevés (TG>4 mmol/L), Méthode de dosage: néphélémétrie H: <1,35 g/L F : <1,25 g/L IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique Lipidogramme éléctrophorèse des Lipoprotéines sur gel d ’agarose, ou polyacrylamide permet une analyse quantitative et qualitative des Lipoprotéines À la base de la classification des dyslipidémies de Frederickson indiqué ds l ’exploration d ’anomalies lipidiques d ’exploration délicate (ex: HyperTG, suspicion d ’IDL) IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique Lipidogramme IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique Lp(a) Facteur de risque cardiovasculaire indépendant Normale: < 0,2g/L Prothrombotique et proathérogène (surtout si >0,45g/l) Utile pour compléter 1 bilan chez patient ayant hyperlipidémie athérogène (ex IIa) est génétiquemt déterminée: inutile de la doser régulièrement. Son taux ne témoigne pas de l ’efficacité/inefficacité du ttt IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

IFTAB Métabolisme lipidique Lp(a) structure IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06

Lp(a) physiopathologie Rôles de la lipoprotéine (a) : principales voies d'action potentielles de la Lp(a) au niveau de la paroi vasculaire [6]. (1) Formation de complexes Lp(a)-protéoglycannes rapidement captés par les macrophages. (2) Oxydation de la Lp(a) par les cellules circulantes et/ou par les cellules de la paroi favorisant sa captation par les macrophages résidants. (3) Action sur l'homéostasie fibrinolytique locale, par modulation de la synthèse et de la sécrétion du tPA (Activateur Tissulaire du Plasminogène) et du PAI-1(Inhibiteur de l'activateur du plasminogène). (4) Augmentation de l'adhésion des monocytes à l'endothélium IFTAB Métabolisme lipidique 15-sept.-06