Influence de CLA1 & CLA2 sur la signalisation par les acides gras polyinsaturés lors de l’intolérance au glucose Céline Comte, Christian Tessier, Jérôme Bellenger, Sandrine Bellenger et Michel Narce UMR 866 INSERM Université de Bourgogne Physiopathologie des Dyslipidémies - Dijon

Les Acides Linoléiques Conjugués (CLA) Introduction Les Acides Linoléiques Conjugués (CLA) Terme générique désignant un mélange d’isomères géométriques et positionnels de l’acide linoléique Principales sources alimentaires : Produits carnés et laitiers de ruminants Et maintenant

Les Acides Linoléiques Conjugués (CLA) Introduction Les Acides Linoléiques Conjugués (CLA) trans-10, cis-12 CLA = CLA2 cis-9,trans-11 CLA = CLA1 Acide linoléique (Pariza et coll., 2001)

Effets des CLA Mais… De nombreuses contradictions dans la littérature Introduction Effets des CLA Nombreux effets biologiques mis en évidence: Obésité Cancer Inflammation Athérosclérose Diabète… Mais… De nombreuses contradictions dans la littérature

Diabète de type 2 et CLA Effets bénéfiques Effets délétères Introduction Diabète de type 2 et CLA Effets bénéfiques Amélioration de la tolérance au glucose (Houseknecht et al., 1998) Amélioration de la sensibilité à l’insuline (Ryder et al., 2001) Prévention de l’hyperinsulinémie (Nagao et al., 2003) Effets délétères Apparition d’une résistance à l’insuline (Tsuboyama-Kasaoka et al., 2000) de la glycémie et de l’insulinémie à jeun (Roche et al., 2002) du taux d’insuline plasmatique (Clément et al., 2002)

? Diabète de type 2 et CLA Diabète de type 2 CLA Introduction Diabète de type 2 et CLA Pourquoi ces contradictions ? Différences entre les espèces (rat vs souris) Statut physiologique (normal vs diabète type 2 ou syndrome métabolique) Durée des études Quantité et proportion des isomères de CLA… CLA Diabète de type 2 ? Protocole expérimental

Les CLA peuvent suivre les mêmes voies métaboliques que LA. Introduction Métabolisme des CLA Les CLA peuvent suivre les mêmes voies métaboliques que LA. Interférences avec le métabolisme des AGPI activités delta-6 et delta-5 désaturantes (Chuang et al., 2001 ; Chuang et al., 2004 ; Bretillon et al., 1999 ; Eder et al., 2002 ; Slomma et al., 2004) (Banni, 2002)

Introduction Rôles des AGPI D’après Guesnet et coll., 2005

Signalisation par les AGPI – Les Phospholipases A2 (PLA2) Introduction Signalisation par les AGPI – Les Phospholipases A2 (PLA2) Catalysent la première étape de synthèse des eicosanoïdes R — C O H 2 H2 P 1 X 3 PLA2 Cyclooxygénases (COX) Eicosanoïdes (prostaglandines, thromboxanes) AGPI (DGLA, AA, EPA)

Interférences avec la signalisation par les AGPI Introduction Interférences avec la signalisation par les AGPI 3 études in vitro sur cellules humaines : - activité PLA2 par CLA1 et CLA2 - activité et expression sPLA2 par CLA2 Macrophages (Stachowska et coll., 2007) Cellules musculaires lisses vasculaires (Ringseis et coll., 2005) expression cPLA2 IV par CLA1 et CLA2 Cellules endothéliales aortiques (Eder et coll., 2003) activité et expression sPLA2 par CLA1 et CLA2 Activité PLA2 dans le foie lors d’une supplémentation avec CLA1 ou CLA2 ?

Interférence avec métabolisme AGPI Perturbations activités PLA2 CLA1 & CLA2 Interférence avec métabolisme AGPI Effets contradictoires sur la diabète de type 2 et la tolérance au glucose activités D5D et D6D Perturbations activités PLA2 CLA1 & CLA2 Lors du diabète de type 2 Signalisation par les AGPI ?

Supplémentation avec CLA1 ou CLA2 But du travail Diabétique type 2 Supplémentation avec CLA1 ou CLA2 Signalisation par les AGPI (PLA2)

Nouveaux-nés Wistar âgés de 2 jours Matériels & Méthodes Nouveaux-nés Wistar âgés de 2 jours Injection de tampon citrate Animaux Témoins Injection de 65 mg STZ/kg PC, dissoute dans du tampon citrate Animaux STZ 1% ISIO4 1% CLA1 1% CLA2 Lot I T Lot C1 T Lot C2 T Lot I S Lot C1 S Lot C2 S Au sevrage Sacrifice à l’âge de 4 mois

Caractérisation du modèle Test de Tolérance au Glucose Matériels & Méthodes Caractérisation du modèle Test de Tolérance au Glucose 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 30 60 90 120 a b c b, c Glycémie (g/L) Temps (min) T ISIO S ISIO T CLA1 S CLA1 T CLA2 S CLA2 Intolérance au glucose des animaux STZ CLA2 semble avoir un effet délétère

Caractérisation du modèle Index de Sensibilité à l’Insuline (ISI) Matériels & Méthodes Caractérisation du modèle Index de Sensibilité à l’Insuline (ISI) 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 1,4 1,6 1,8 ISIO 4 T ISIO 4 S CLA1 T CLA1 S CLA2 T CLA2 S ISI (mg . l2 / mmol . mU . min) a b b,d c d de la sensibilité à l’insuline des animaux STZ CLA1 + CLA2 semblent avoir un effet délétère

Signalisation par les AGPI Expression génique PLA2 Matériels & Méthodes Signalisation par les AGPI Activités sPLA2 & cPLA2 Expression génique PLA2

Signalisation par les AGPI – Les Phospholipases A2 (PLA2) PLA2 sécrétées (sPLA2) PLA2 cytosolique Ca2+-dépendantes (cPLA2) sPLA2 IIA cPLA2 IV PLA2 cytosolique Ca2+ -indépendantes (iPLA2) iPLA2 VI Impliquées dans état inflammatoire

Signalisation par les AGPI – sPLA2 Résultats Signalisation par les AGPI – sPLA2 20 40 60 80 100 a b b,c c (% des valeurs contrôles I T) Activité sPLA2 ISIO 4 T CLA2 T CLA1 T CLA2 S CLA1 S ISIO4 S 20 40 60 80 100 120 140 sPLA2 IIA ARNm sPLA2 IIA/L19 (% des valeurs contrôles I T) b a,b c,d a c d activité sPLA2 chez animaux STZ et par CLA1 & CLA2, expression uniquement dans lots STZ

Signalisation par les AGPI – cPLA2 Résultats Signalisation par les AGPI – cPLA2 20 40 60 80 100 120 (% des valeurs contrôles I T) Activité cPLA2 a ISIO 4 T CLA2 T CLA1 T CLA2 S CLA1 S ISIO4 S 20 40 60 80 100 120 cPLA2 IV iPLA2 VI ARNm gène cible/L19 (% des valeurs contrôles I T) a b c d a,c a,b expression iPLA2 VI par CLA2, renforcée chez animaux STZ expression cPLA2 IV par CLA1 et chez animaux STZ CLA2

Perturbations activité ou expression PLA2 Conclusion Lors d’une supplémentation en CLA1 ou CLA2 lors de l’intolérance au glucose : CLA1 CLA2 Perturbations activité ou expression PLA2 Synthèse eicosanoïdes ? Signalisation par les AGPI ?

Merci de votre attention !!